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【摘要】 目的 观察不同类型冠心病患者血清基质金属蛋白酶-9的水平变化，探讨MMP-9与冠心病的关系。方法 选取我院心内科及湘雅二医院2006年9月～2007年4月入院诊断为冠心病的患者101例，其中最后诊断为急性心肌梗死（AMI）33例，不稳定型心绞痛（UAP）37例，稳定型心绞痛（SAP）31例。健康对照组（C）20例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清MMP-9的水平。结果 （1）AMI组、UAP组与SAP组患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平均显著高于对照组（P＜0.01，P＜0.01,P＜0.05）。（2）AMI组与UAP组患者血清MMP-9水平均显著高于SAP组（P均＜0.01）。（3）AMI组患者MMP-9水平与UAP组比较差异有显著统计学意义（P＜0.01）。（4）按SAP、UAP到AMI由轻到重的等级排列，MMP-9的水平由低到高依序增高。结论 冠心病患者血清MMP-9水平升高。血清MMP-9水平增高提示斑块的不稳定性，同时也可以作为冠心病患者危险分层的一个重要生化监测指标，预测急性冠脉事件的发生。
【关键词】 冠心病 急性心肌梗死 不稳定型心绞痛 稳定型心绞痛 基质金属蛋白酶-9
Measurement and clinical significance on serum MMP-9 in patients with coronary heart disease
LUO Sai-ying，LUO Yi-bin.Pathology Department of the Eighth Hospital in Changsha City,Hunan 410001,China
［Abstract］ Objective To observe the fluctuation of serum matrix metalloproteinases-9（MMP-9）in different types of coronary heart disease patients,and discuss the relation between MMP-9 and coronary heart disease.Methods 101 patients were chosen with first impression of coronary heart disease from September 2006 to April 2007 in two hospitals,the medical heart ward of the eighth hospital in Changsha and second affiliated hospital of Xiangya University,at last,in which 33 patients were diagnosed with Acute Myocardial Infarction（AMI）,37 patients with Unstable Angina Pectoris（UAP）,31patients with Stable Angina Pectoris（SAP）.20 healthy people were chosen as comparison team（C）.The method of Two Antibody “Sandwich” Enzyme-Linked Immunosorbent Assay（ELISA）was used to determine the concentration of serum MMP-9.Results （1）The concentrations of serum matrix metalloproteinases-9（MMP-9）in AMI patients,UAP patients,SAP patients were all significantly higher than in the healthy people of comparison team（P<0.01,P<0.01,P<0.05）.（2）The concentrations of matrix metalloproteinases-9（MMP-9）in AMI patients,UAP patients were significantly higher than in patients with SAP（P all <0.01）.（3）Compared the different concentrations of serum MMP-9 between the patients with AMI and the patients with UAP,there were significant meanings（P<0.01）.（4）From less severe SAP,UAP to more severe AMI,the more severe of the disease was,the higher concentrations of the serum MMP-9 were.Conclusion The concentration of serum MMP-9 will increase in patients with coronary heart disease.The increase of the serum MMP-9 suggests the instability of plaque in coronary vessels.It can also been used as an important biochemistry monitoring index to determine the severity of coronary heart disease and to forecast the occurrence of severe coronary heart attack.
［Key words］ coronary heart disease;acute myocardial infarction;unstable angina pectoris;stable angina pectoris;matrix metalloproteinases-9
冠状动脉粥样硬化是冠心病的病理基础。急性冠状动脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）主要包括不稳定型心绞痛（unstable angina pectoris,UAP）和急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）。目前认为冠状动脉内粥样硬化斑块破裂继发血栓形成是ACS发生的主要原因［1，2］。研究已证实［3］，在基质金属蛋白酶（MMPs）中MMP-9与动脉粥样硬化斑块的不稳定尤为相关，特别是在不稳定斑块的肩区，MMP-9的活动明显升高，较稳定斑块高3～5倍。MMP-9能特异地与细胞外基质相结合，降解细胞外基质，导致斑块不稳定，易形成血栓，发生AMI，并加重继发性心肌损害。本研究采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）测定不同类型冠心病患者血清MMP-9水平的变化，探讨其在冠心病发病中的作用及意义，为临床诊断和治疗提供依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 2006年9月～2007年4月在长沙市第八医院及湘雅二医院心内科住院的冠心病患者101例，入选AMI患者33例，其中男23例，女10例，平均年龄（66.5 ±9.6）岁。UAP患者37例，其中男25例，女12例，平均年龄（65.1±7.8）岁。稳定型心绞痛（stable angina pectoris,SAP）组31例，男22例，女9例，平均年龄（64.8±10.1）岁。同时选择长沙市第八医院健康体检中心行健康体检者20例作为健康对照组（control group，C），其中男11例，女9例，平均年龄（63.6±11.5）岁（50～77岁）。此组对象无心血管疾病史，经心电图、腹部B超、胸部X线透视，心肌酶学、血脂、血糖和肝肾功能等检查，排除心、脑、肾、甲状腺疾患、外周血管疾病及糖尿病，近4周内无感染史。
1.2 病例入选标准 符合我国《急性心肌梗死诊断与治疗指南》［4］、《不稳定型心绞痛诊断和治疗建议》［5］、《慢性稳定性心绞痛诊断和治疗指南》［6］和全国高等医学院校7年制《内科学》教材［7］的诊断标准。所有资料排除：合并急性炎症，恶性肿瘤，脑卒中，肝肾功能明显异常，自身免疫性疾病，合并严重周围血管病变，合并外科手术或严重创伤。
1.3 方法 入院即刻或次日清晨空腹抽取肘静脉血4 ml于干净空白试管中，所有血样在30 min内离心取得血清约1 ml置于1.5 ml离心管中，盖紧，置-70 ℃冰箱保存，用于MMP-9的测定。MMP-9用ELISA法测定，检测试剂购自上海森雄科技实验有限公司，操作步骤严格按规定进行。血糖与血脂的测定：所有患者于次日清晨及健康对照组于早晨均空腹时抽取4 ml静脉血，血脂采用终点酶法，血糖采用己糖激酶法，日本OLYMPUS AU400型全自动生化分析仪质控条件下测定。
1.4 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件包进行数据分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示。多组间比较采用单因素方差分析（One-Way ANOVA）,多组间均数两两比较采用q检验。P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 一般临床资料比较 四组人群的年龄、性别差异无统计学意义。三组患者血糖、血脂比较差异无统计学意义（P均＞0.05），与对照组比较差异有统计学意义（P均＜0.05），见表1。表1 一般临床资料比较
2.2 各组血清MMP-9的测定水平及改变 冠心病患者各组血清MMP-9的水平明显高于对照组，且SAP组、UAP组至AMI组浓度较对照组依序呈逐渐增高的趋势。四组人群MMP-9浓度方差分析显示差异有显著统计学意义（P＜0.01）,四组间两两比较，ＡＭＩ组与ＵＡＰ组、ＳＡＰ组和对照组比较差异有显著统计学意义（P均＜0.01），UAP组高于SPA组和对照组（P均＜0.01）,ＳＡＰ组MMP-9水平也高于对照组（Ｐ＜0.05）。见表２。表２ 各组血清MMP-9水平比较注：与对照组比较，☆P＜0.01，△P＜0.05；与UAP、SAP比较，#P＜0.01；与SPA比较，※P＜0.01
3 讨论
细胞外基质是血管壁的主要成分。MMPs是一组酶活性依赖锌离子的可降解细胞外基质的重要蛋白酶家族，细胞外基质构成动脉粥样硬化斑块的纤维帽部分，细胞外基质的降解贯穿于动脉粥样硬化（ＡＳ）发生发展的整个过程。MMPs的活性由斑块处的炎症活动驱动，它们降解纤维帽，使纤维帽变薄，促使斑块破裂［8］。斑块中几乎所有细胞均能生成MMPs，包括MMP-9在内的多种MMPs。
病理研究显示MMP-9是一种影响粥样斑块不稳定的主要的MMPs［9］。MMP-9是动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞分泌的主要MMPs，通过降解血管壁细胞外基质，使血管平滑肌细胞突破周围组织屏障及由蛋白多糖和胶原构成的致密网孔，从中膜向内膜迁移并进行增殖，同时分泌大量的细胞外基质，形成动脉粥样硬化斑块；其次，MMP-9可以降解粥样硬化斑块内细胞外各型胶原及明胶，可使弹性蛋白变弱，斑块的纤维帽变薄，削弱其抵抗应力的作用，使斑块易发生破裂，继化血栓形成和机化，导致AS损伤进展和斑块扩大。Brown等［10］对SAP和UAP病人的旋切斑块组织中胶原酶（MMP-2、MMP-9）检测表明，两组切片MMP-9阳性率相同，但代表合成活性的细胞内明胶酶以UAP患者表达高于SAP患者，说明MMP-9表达增高是斑块不稳定的生化基础。外周血MMPs水平能否反映斑块的稳定性，Kai等［11］对33例ACS患者血清MMP-2和血浆MMP-9水平进行测定，并与17例正常对照组进行对比。结果发现ACS患者血清MMP-2和血浆MMP-9水平高于正常对照组2～3倍。提示血清MMP-9及MMP-2水平于斑块稳定性密切相关。
Kalela等［12］及Blankenbeng等［13］报道血清MMP-9水平与冠心病的严重程度及冠心病的预后有明显的相关性。本试验结果显示，随着病情的发展，按SAP、UAP到AMI由轻到重的等级分级，血清MMP-9含量变化较对照组依序增高，说明血清MMP-9水平可以提示冠状动脉斑块的稳定状况，本试验与以前研究结果相符。由此可以推断出，粥样硬化斑块越不稳定，其血清中的MMP-9水平就越高，研究［14，15］显示不同类型冠心病患者，其MMP-9的水平及其变化不同，ACS患者具有更高的水平，而病情稳定的患者MMP-9水平相对较低。因此冠心病患者血清MMP-9水平增高可作为发生ACS的一个危险信号；同时患者血清MMP-9水平检测可以作为冠心病患者危险分层的一个重要生化监测指标。
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作者单位：410001 湖南长沙，长沙市第八医院检验科（△心内科）