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【摘要】 目的 观察茵陈五苓散对大鼠酒精性肝损伤血清ALT、AST和病理组织学的影响，为临床酒精性肝损伤的防治提供实验依据。方法 采用白酒灌胃造模，50只Wistar大鼠随机分成正常组、模型组、预防1组、预防2组、治疗组，分别于实验第5周、第9周末尾静脉取血，分离血清，测定ALT、AST。并于第9周取血后肝脏取材，常规HE染色，光镜观察。结果 模型组血清ALT、AST明显升高，预防1、2组、治疗组血清ALT、AST均低于模型组，差异具有显著性（均P＜0.01）。模型组成功建立酒精性肝损伤病理学模型，预防组、治疗组病理学改变较模型组显著减轻。结论 茵陈五苓散能有效地预防和治疗大鼠酒精性肝损伤。
【关键词】 茵陈五苓散；酒精性肝损伤；大鼠；ALT；AST；病理组织学
Effectiveness of yinchen wuling powder on prevention and treatment of alcoholic liver injury in rats
ZHOU Huan， CAI Junhong， CＨＥＮ Shaoling.
the People’s Hospital of Baoan District，Shenzhen 518101，China
【Abstract】 Objective To observe the effect on blood serum ALT，AST and pathological histology of alcoholic liver injury in rats， and provide the experimental basis for the clinical treatment of alcoholic liver injury. Methods We made the model by filling the stomach with alcohol，50 Wistar rats were divided into five groups at random， the normal control group，model group，prevention 1 group，prevention 2 group and treatment group. After 5 and 9weeks，the rats＇blood serum ALT，AST were determined. And extract materials from the liver of each group of rats after 9 weeks， then we made HE staining and made optical observation. Results The amount of ALT，AST in rat＇s blood serum of model group was increased. The amount of ALT，AST in rat＇s blood serum of each prevention group and treatment group was reduced， compared with that of model group， there was significant difference statistically（P＜0.01）.We successed in making the model of pathological histology of alcoholic liver injury of rat. The pathological change of prevent and treatment group was siginificant reduced. Conclusion Yinchen wuling powder can effectively prevent alcoholic liver injury of rat.
【Key words】 Yinchen Wuling powder;alcoholic liver injury; rat; ALT; AST; pathological histology
长期大量饮酒可以造成肝损伤［1］，随着酒精消费人口的逐渐增多以及人们对生活质量的要求日益提高，如何能有效地防治酒精性肝损伤是一个令人关注的问题。我们运用茵陈五苓散治疗酒精性肝损伤取得了较好的疗效。茵陈五苓散对酒精性肝损伤的防护作用如何呢？本实验运用大鼠白酒灌胃造成动物模型，观察茵陈五苓散对大鼠酒精性肝损伤的防治作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 Wistar大鼠50只，雌雄各半，体重200～250g，由中山医科大学动物中心提供。
1.1.2 药物与试剂 茵陈五苓散：茵陈、泽泻、猪苓、茯苓、白术、桂枝按原方比例配药。购自宝安区人民医院中药房，水煎，生药浓度为2.6g/ml。56°红星二锅头酒，北京红星股份有限公司生产，用蒸馏水配成50%白酒。ALT、AST试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 分组 大鼠50只适应饲养1周后随机分为5组，每组10只。
1.2.2 造模与给药方法 (1)正常组：固定室温，自然光照，自由饮水和摄食饲料，共9周。(2)模型组：除正常喂养外，前5周每日以10ml/kg白酒分2次灌胃。(3)预防1组：除正常喂养外，每日以10ml/kg白酒分2次灌胃，并于每次灌酒前1h灌药5ml/kg。(4)预防2组：除正常喂养外，每日以10ml/kg白酒分2次灌胃， 并于每次灌酒后1h灌药5ml/kg。(5)治疗组：除正常喂养外，前5周每日以10ml/kg白酒分2次灌胃，以后4周每天按原时间两次灌药5ml/kg。
1.2.3 实验方法 于第5周和第9周末，所有大鼠均禁食12h，尾静脉取血，新鲜血3000r/min离心10min取血清，按试剂盒所规定的方法检测各项指标。用t检验进行统计学分析。并于第2次取血后颈椎处死，剖取肝脏，在距肝脏边缘0.5cm处取材，10%甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋切片，采用HE染色方法，行光镜观察其病理变化。
2 结果
2.1 血清肝功能变化 血清ALT和AST水平模型组较正常组显著升高（P＜0.01）；与模型组相比血清ALT和AST在预防1、2组均显著下降（P＜0.01）；治疗组第9周与第5周相比， ALT和AST显著下降（P＜0.01）。见表1。
表1 第5周和第9周大鼠血清生化测定结果 (略)
2.2 病理学变化 正常组肝小叶结构清晰，细胞索排列整齐，肝窦正常，肝细胞多边形，分界清，细胞核圆而大，位于细胞中央，胞质丰富。模型组肝小叶界限不清，细胞索紊乱，大部分肝窦消失。肝细胞呈气球样变，胞质广泛出现大小不等的脂肪滴，细胞核被挤向细胞周边，部分细胞核体积缩小。可见点状或灶状坏死，以中央静脉区最为明显，并伴有大量炎性细胞浸润。预防1、2组、治疗组病理变化较模型组显著减轻，肝小叶结构基本清晰，细胞索、肝窦无明显异常。肝细胞无明显空泡，部分呈轻度浊肿，核结构较清晰，核质略少，偶见少量炎细胞浸润，未见细胞坏死。
3 讨论
从中医学理论分析，酒为湿邪，过量饮酒，伤及脾胃，导致湿热之邪蕴积，熏蒸肝胆。临床上，酒精性肝损伤的患者，主要表现黄疸、乏力、恶心、纳呆等湿热困脾的症状，证型以湿重于热为常见。茵陈五苓散出自于《金匮要略》，用于治疗湿重于热之黄疸［2］。方中以清利湿热的茵陈为君药，配合泽泻、猪苓、茯苓利水湿，白术健脾燥湿，桂枝辛温通阳化气行水。诸药合用，共奏清热解毒利湿、健脾和胃化浊之功。其中茵陈经现代药理研究表明，能明显减轻肝细胞肿胀、气球样变、脂肪变性与坏死，具有保肝作用；白术能减少肝细胞坏死，促进肝细胞再生［3］。泽泻具有明显扩血管作用，包括主动脉、肠系膜上动脉、肾动脉和门静脉等［4］。猪苓的提取物猪苓多糖具有利尿作用，对小鼠免疫功能有增强作用［5］。
本实验采用白酒灌胃的造模方法成功建立大鼠酒精性肝损伤模型。第9周解剖模型组，光镜可见肝小叶界限不清细胞索紊乱，大部分肝窦消失，肝细胞呈气球样变，胞质广泛出现大小不等的脂肪滴，细胞核被挤向细胞周边，部分细胞核体积缩小。经过5周的白酒灌胃造模，治疗组大鼠血清ALT、AST明显升高，符合肝损伤诊断标准。经过给药治疗，第9周治疗组大鼠血清ALT、AST下降至与正常组接近，且病理学观察肝小叶结构基本清晰，细胞索、肝窦无明显异常。肝细胞无明显空泡，部分呈轻度浊肿，核结构较清晰，核质略少，偶见少量炎细胞浸润，未见细胞坏死。说明茵陈五苓散能有效治疗酒精性肝损伤。预防1、2组与模型组相比，血清ALT、AST均明显降低，差异具有显著性（P＜0.01），病理学观察亦较模型组显著减轻。提示茵陈五苓散对酒精性肝损伤有良好的预防作用。实验结果表明，茵陈五苓散具有显著的护肝作用，能有效地预防和治疗大鼠酒精性肝损伤，为临床防治酒精肝提供了相关的实验依据，但其机制有待于进一步研究探讨。
【参考文献】
1 高荣慧.葛花汤治疗酒精性肝损伤82例.中国民间疗法，1996，4(1)：39.
2 李克光，杨百茀.金匮要略讲义.上海：上海科学技术出版社，1985，185.
3 杨牧祥，甄彦君，田元祥，等.解酒护肝饮对大鼠酒精性肝损伤病理组织学影响观察.河北中医，2000，22(12)：950-952.
4 冯志杰，姚希贤. 泽泻对肝硬化门脉高压大鼠离体血管的扩张效应.中华实用医学，2000，2(6)：7.
5 王林丽，吴寒寅，罗桂芳.猪苓的药理作用及临床应用.中国药业，2000，9(10)：58-59.
作者单位： 518101 广东深圳，深圳市宝安区人民医院中医科
(编辑：秋 实)