点击显示 收起
【摘要】 目的 提高药品质量标准。方法 采用高效液相色谱法测定该药中栀子苷的含量。结果 栀子苷在0.0747～0.8964 g范围内呈良好的线性关系r=0.9999。结论 该方法操作简便，快捷，结果准确，可靠。
【关键词】 高效液相色谱法；查干呼杨音汤；栀子苷；含量测定
查干呼杨音汤为传统蒙药制剂，由栀子、诃子、川楝子等七味药组成。具有清热凉血，解热镇痛的功效，临床上用于治疗头痛、目赤、肾热、血脉病、坏血症等病症。栀子为本品的君药，栀子苷为栀子的特征有效成分，为确保人民用药安全有效，更好的控制本品的质量，故选择栀子苷作为内在指标成分。参照有关文献［1］，建立高效液相色谱法测定本品中栀子苷含量的方法，具有分离效果好、灵敏、准确等优点。
1 仪器、试剂及药品
1.1 仪器 美国Alltech高效液相色谱仪，M626输液泵，VIS-200型检测器。天平：Precisa 92SM-202A。
1.2 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18色谱柱(5μm，250mm×4.6mm)，ODS预柱；检测波长238nm；流动相［1］：乙腈-水（15：85）；流速：1.0ml/min；柱温：33℃。
1.3 试剂 乙腈为色谱纯试剂，水为高纯水，其他试剂均为分析纯；对照品：栀子苷为中国药品生物制品检定所提供（批号：110749-200511 供含量测定用）。样品来源：由阿拉善盟蒙医医院提供。
2 方法与结果
2.1 线性范围的考察 精密称取栀子苷对照品4mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密吸取0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取10μl进样，按上述色谱条件测定。以峰面积积分值对进样量进行回归分析，结果栀子苷在0.0747～0.8964 g范围内呈良好的线性关系。回归方程为Y=562330X-1255.7，r=0.9999（Y为峰面积积分值，X为进样量）。
2.2 供试品溶液的制备 取本品约0.4g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇45ml超声处理40min，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.3 对照品溶液的制备 取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，摇匀，即得。
2.4 精密度试验 精密吸取供试品溶液10μl，重复进样6次，测定供试品中栀子苷峰面积积分值，RSD为0.15%。试验表明，仪器精密度良好。
2.5 稳定性试验 取供试品溶液，分别于0h、2h、4h、6h、8h、10h进样测定，记录栀子苷峰面积积分值。RSD为0.24%。试验结果表明，供试品在10h内稳定性良好。
2.6 重复性试验 按拟订的含量测定方法，对同一批样品分别制备供试品溶液6份，测定峰面积积分值并计算含量。平均含量为11.16mg/g，RSD为1.03%。
2.7 回收率试验 取已知栀子苷含量的样品（11.16mg/g）按3个不同浓度，每个浓度3份，精密称定，3个浓度供试品分别精密加入1.1ml、1.4ml、1.6ml（1.4960mg/ml）栀子苷对照品甲醇溶液，按拟定的含量测定方法制备供试品溶液，测定每份的含量，以下列公式计算回收率。结果见表1。回收率(%)=测得总含量（mg)-制剂中含量（mg) 对照品加入量（mg)表1 回收率试验结果（略）
2.8 样品含量测定 取本品0.4g，精密称定，按拟订的含量测定方法制备供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液（30μg/ml）与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定并计算含量，结果见表2。对照品、供试品与阴性供试品的HPLC图谱见图1～3。表2 样品中栀子苷含量测定结果图1 对照品溶液图谱图2 供试品溶液图谱（略） 图3 阴性供试品（缺栀子）图谱（略）
3 讨论
在选定的条件下，查干呼杨音汤中栀子苷很容易和样品中其他组分分离，栀子苷与其相邻色谱峰的分离度远远>1.5；按栀子苷峰计算，理论板数（N）在5000以上。同时取缺栀子的阴性供试品溶液进样，结果表明，阴性供试品在与栀子苷色谱峰相同的保留时间处无对应峰，该方法重现性好，专属性强，方中其他组分对栀子苷的测定无干扰，因此我们选用栀子苷作为指标成分，控制其内在质量效果好。
【参考文献】
1 国家药典委员会编．中华人民共和国药典．北京：化学工业出版社，2005,173.
作者单位：1 015000 内蒙古巴彦淖尔，巴彦淖尔市药品检验所
2 014000内蒙古包头，内蒙古北方重工业集团有限公司医院
(编辑：宋 冰)