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首页合作平台在线期刊中华医药杂志2004年第4卷第8期中医中药

骨康注射液对骨痂修复细胞基因DNA影响的研究

来源:INTERNET
摘要:2骨痂修复细胞基因DNA含量分析采用免疫组化法,将两组模兔于用药后1、2、3、4、5周取材固定,再用5%EDTA液脱钙10~15天,冲洗、切块、石蜡包埋。观察骨痂修复细胞基因DNA含量图像分析:Feulgen染色片经显微镜放大400倍,每例摄取外骨膜、骨折端、内骨膜图像各3幅存盘每批及批间输入图像的入射光强度皆严格控制在同一水平......

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  1 动物造模

  选用新西兰雄性大白兔44只,体重2~3kg,在无菌条件及静脉麻醉下,暴露左桡骨中下1/3处,用自制铁矩将其横断,造成0.3~0.8cm缺损的标准骨折模型。术后随机分为2组,即骨康注射液组(由九节茶、丹参组成,为黑龙江中医药大学附属医院制品)与金葡组(长春高斯达制药厂生产),并分别于术后1、2、3、4、5周对两组模兔进行断颈处死观察对比。(其中每组每期4只,另4只是正常组)。

  2 骨痂修复细胞基因DNA含量分析

  采用免疫组化法,将两组模兔于用药后1、2、3、4、5周取材固定,再用5%EDTA液脱钙10~15天,冲洗、切块、石蜡包埋。之后进行Feulgen染色,采用由空军总医院生产的CMISA型彩色图像分析仪进行含量分析。

  观察骨痂修复细胞基因DNA含量图像分析:Feulgen染色片经显微镜放大400倍,每例摄取外骨膜、骨折端、内骨膜图像各3幅存盘每批及批间输入图像的入射光强度皆严格控制在同一水平上,通过交互分割方法,每例各部分割80~100个细胞,每批选择同批染色片的小淋巴细胞30~50个作为二倍体对照。计算骨痂修复细胞数目。表1 骨痂修复细胞DNA倍体所占百分率(略)表2 骨痂修复细胞DNA指数动态变化 (略)

  3 结果

  正常骨痂修复细胞多数为2倍细胞,DNA指数<1。用药组骨折后第1、2周以3~4倍体细胞为主,第3周时以2倍体细胞为主,第4、5周接近正常组织情况,DNA指数逐渐降低,第5周时接近正常。对照组总体变化趋势同中药组,但DNA指数第1、2周明显小于后者(P<0.01),3周后呈“回升”现象(见表1、2)。

  4 讨论

  祖国医学认为:骨折后血离筋脉,瘀积不散,使经络受阻,经脉涩滞,血循障碍,《辩证录》曰:“血不活则骨不能接”,“瘀不去则骨不能接”。则骨折局部的血液循环与骨折愈合的关系越来越被重视。通过观察骨痂修复细胞基因DNA含量得知,骨痂修复细胞DNA指数明显优于对照组(P<0.05)。在骨折局部的血肿吸收和机化的骨折愈合过程内,血肿吸收越快机化越迅速,能把骨折临近部位的钙更多地动员出来沉积到骨折局部;并能改善血管壁的通透性,加快血液循环,有利于离子交换与骨小梁的改建和再吸收,把更多钙动员出来,其骨折愈合也就越快。祖国医学认为要 想加速骨折愈合,接骨续筋不可少。经许多研究表明,胶原是骨组织重要的组成部分,如果没有胶原,钙盐无法形成和沉积。因胶原的主要成分是蛋白,而氨基酸是合成蛋白的基础。因而在活血化瘀的基础上,使血容量增加,保证了合成胶原所需的氨基酸的供给,激活了成纤维细胞、成骨细胞、成软骨细胞的活性,也使骨生成细胞在数量上及分布部位上均增加,这些细胞除了存在于骨外膜骨痂及桥梁骨痂外,还可在连接骨痂和近端的封闭骨痂内看到。经动物实验观察得知:在骨痂修复细胞基因DNA含量及DNA倍体所占百分率变化,明显优于对照组(P<0.01)。

  从而亦证明该剂不但能活血化瘀,还能增加胶原的合成。因此骨康注射液具有较好的活血通络、化瘀消肿,即改善血液循环,促进血肿的吸收、机化作用;又具有较好的接骨续筋功能,即能增加局部胶原的合成,增加细胞的数量,促进细胞的活性。 

  作者单位:1 150040黑龙江中医药大学附属医院
   
      2 310005浙江中医学院附属新华医院 

作者: 王桂媛 史晓林 2005-6-30
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