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【文献标识码】 B 【文章编号】
抗乙型肝炎病毒（HBV）治疗在乙肝治疗中日益得到重视，α干扰素是最早被认可的抗HBV药物，但研究发现其持续应答率不高。拉米呋啶是新一代核苷类药物，且以其高效、服用方便、无明显毒副反应而受到临床青睐，但其使用过程中HBV易变异和停药后易复发等不足，而联合用药有提高疗效和延缓耐药产生研究已有报道［1］ 。本文采用AG-9900荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定HBV-DNA载量，动态观察治疗过程中HBV-DNA载量变化来评判干扰素、拉米呋啶疗效。
1 资料与方法
1.1 病例选择 所选病例均系在本院就诊的慢性乙型肝炎患者。诊断均符合1995年北京全国第五次传染病及寄生虫病会议修订的诊断标准。（1）入选病例年龄在18～55岁之间;（2）入选前HBV-DNA检测2次阳性;（3）血清ALT大于正常上限2倍。
入选病例共74例，其中α-干扰素组27例，男23例，女4例，平均年龄30岁;拉米呋啶组37例，男30例，女7例，平均年龄32岁;联合组（α-干扰素加拉米呋啶）10例，男8例，女2例，平均年龄33岁;各组在性别、年龄、病程等方面差异均无显著性（P>0.05）。
1.2 治疗方法 α干扰素组:均用α干扰素500万U，肌注1次/d，1周后改为隔日1次;拉米呋啶组:给予拉米呋啶100mg1次/d;联合组给予α干扰素500万U，肌注1次/d，1周后改隔日1次，拉米呋啶100mg1次/d，3组观察疗程均为6个月。
1.3 观察项目及方法
1.3.1 血清病毒学指标 HBV-DNA在治疗前2次阳性确认，治疗后每月检查1次。
1.3.2 HBV-DNA检测方法 仪器:AG9900Robo Master全自动荧光定量PCR仪 ［2］ （美国Biotronics公司提供）。试剂:HBV-DNA检测试剂由美国Biotronics公司提供。试剂引物序列:不对称扩增引物1为5′-TGCTCGTGTˉTACAGGCGCCGT-3′，引物2为5′-GAGˉGCATAGCAGCAGGATGAAGAG-3′，扩增产物HBVS基因区编码的241bp片段;信号扩增引物为5′-TTATCGCTGGATˉGTGTCTGCGGCGT-3′，纯化HBV-DNA标准品美国Biotronˉicts公司提供。Taq酶系由Promag公司提供。HBV-M检查在治疗前及治疗后每月检查1次，HBV-M检测方法:由美国Abbott公司提供全套AxSYM检测试剂及AxSYM全自动免疫发光分析仪。
1.3.3 血清生化指标 ALT、AST、TBIL、ALB、PT等治疗前及治疗后每2周检查1次，由日本日立7600型全自动生化仪检测。
1.4 疗效考核标准 完全反应:治疗结束后血HBV-DNA定量<5×10 4 拷贝/ml（HBV-DNA阴性），ALT正常。部分反应:治疗结束后血清HBV-DNA定量<5×10 4 拷贝/ml（HBV-DNA阴性），但ALT不正常;或ALT正常而血HBV-DNA定量>5×10 4 拷贝/ml（HBV-DNA阳性）。无反应:治疗结束后血HBV-DNA定量>5×10 4 拷贝/ml（HBC-DNA阳性），ALT不正常。
1.5 统计学方法 HBV-DNA含量结果采用求算对数平均值的方法来计算平均拷贝数，均数±标准差由ˉx±s表示，定量分析显著性检验采用t、t′检验，定性分析采用χ 2 检验。
2 结果
干扰素、拉米呋啶治疗中乙肝病毒DNA含量变化分析见表1。
表1结果显示，各组HBV-DNA含量治疗后均较治疗前有明显下降，统计处理差异均有显著性（P<0.05）。干扰素组HBV-DNA含量治疗前、后完全反应者均明显低于部分反应者、无反应者，统计处理差异有显著性（P<0.05），部分反应者明显高于无反应者（P<0.05）。拉米呋啶组HBV-DNA含量治疗前完全反应者明显低于无反应者（P<0.05），完全反应者与部分反应者差异无显著性（P>0.05）。
表1 3组干扰素、拉米呋啶治疗中乙肝病毒DNA含量变化分析 （略）
表2 3组HBV-DNA阴转率、ALT复常率分析（略）
表2显示，联合组、拉米呋啶组HBV-DNA阴转率、ALT复常率均明显高于干扰素组，统计学处理差异有显著性（P<0.05），联合组与拉米呋啶组比较差异无显著性（P>0.05）。
3 讨论
众所周知，HBV虽不能直接引起肝细胞病变，但病毒持续复制启动和诱发机体免疫清除，造成肝细胞损害。α-干扰素作为抗乙型肝炎病毒治疗已广泛应用于临床，一般报道完成疗程应答率约在50%左右，但其持续应答率仅为25%～40% ［3～5］ ，有报道血清HBV-DNA载量多寡对干扰素应答率相关 ［6］ 。拉米呋啶是1998年我国批准用于治疗慢性乙型肝炎新一代核苷类抗病毒药物，具有抑制病毒的逆转录酶和DNA聚合酶的作用，能明显抑制HBV-DNA复制，经几年来临床应用，已显示出其高效的抗病毒作用。但唯不足是随着用药时间延长，其耐药变异株的产生，Marc等报道治疗1、2、3年的变异率分别为16%、65%、73% ［7］ 。目前认为，抗HBV治疗疗效与感染者体内病毒蛋白表达状态，血清ALT水平、受感染时间等因素，特别是血清中病毒含量有关。本文采用AG-9900荧光定量PCR观察了经干扰素、拉米呋啶治疗患者血清中HBV-DNA含量变化，以考核其抗病毒疗效，结果干扰素组、拉米呋啶组、联合组HBV-DNA含量动态观察显示，HBV-DNA含量治疗后较治疗前均明显下降（P<0.05），其中完全反应组HBV- DNA含量降速最明显、部分反应组次之。
干扰素组血清HBV-DNA含量治疗前、后完全反应者均明显低于部分反应者、无反应者，差异有显著性（P<0.05），部分反应者明显高于无反应者（P<0.05）。提示干扰素疗效与血清HBV-DNA含量有关。拉米呋啶组HBV-DNA含量治疗前完全反应者明显低于无反应者（P<0.05），完全反应者与部分反应者差异无显著性（P>0.05）。干扰素组、拉米呋啶组、联合组HBV-DNA阴转率分别为58.15%、89.19%、100.00%，血清ALT复常率3组分别为45.15%、98.19%、100.00%。拉米呋啶组、联合组HBV-DNA阴转、血清ALT复常率均高于干扰素组（P<0.05），与文献报道相仿 ［3］ 。
参考文献
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作者单位:215007江苏省苏州市第五人民医院传染病研究室