比色法测定伊班膦酸钠片的含量

    【摘要】  目的  测定伊班膦酸钠片的含量。方法  比色法测定伊班膦酸钠片的含量，检测波长826nm。结果  伊班膦酸钠在0.5～5μg/ml范围内呈良好的线性关系，回归方程为Y=-0.02+0.00595X（γ=0.9999）。平均回收率为99.3%（n=6，RSD 0.48%）。结论  该方法简便、准确。

    【关键词】  伊班膦酸钠片；含量；比色法

    【Abstract】  Objective  To determine the content of sodium ibandronate tablets.Methods  A spectrophotometry method was used with the detection wavelength at 826nm. Results  The calibration curve was linear over the range 0.5～5μg/ml，regression equation:［Y=-0.02+0.00595X（γ=0.9999）］. The average recovery was 99.3% (n=5，RSD 0.48%).Conclusion  This method is simple and accurate.

    【Key words】  ibandronate tablets; content;spectrophotometry method

    伊班膦酸钠（Ibandronate）是二膦酸盐类化合物，属一类新药，其化学名为1-羟基-3-（N-甲基-N-正戊基）-氨基-亚丙基二膦酸单钠盐一水物。主要用于治疗骨质疏松症。与同类二膦酸盐类衍生物比较，伊班膦酸钠的药效更显著，副作用更小。伊班膦酸钠结构既缺少发色基团，又不具备电化学特性，故不能用常规的紫外、荧光或者电化学分析方法检测，给药物的含量分析带来了一定的困难。Forsman 曾经报道了用离子交换色谱柱后反应分析磷酸盐、亚磷酸盐，流动相中加入醋酸、柠檬酸以及钼试剂［1］。Thompson 也报道了alendronate、etidronate、clodronate 的分析方法，在流动相中加入苯三酸并用氢氧化锂调节pH的间接光度检测法［2］。国外多为HPLC法，反应均较为复杂。国内曾报道用Cu2+衍生物比色法［3］，本文则采用经典的磷钼兰比色法，原理为二膦酸盐灼烧后变成正磷酸盐，与定磷试液（含钼酸铵和抗坏血酸）形成磷钼兰而显兰色，灵敏度更高。

    1  仪器与试药

    SX-4-10型马沸炉；Beckman DU-650型紫外分光光度计；BS-110S型电子天平。供试品及对照品（99.9%）均由本实验室提供；其他试剂均为分析纯。

    2  方法

    2.1  溶液配制  对照品溶液的制备（A）：精密称取干燥恒重的伊班膦酸钠对照品0.09g置100ml的量瓶中，加水使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含伊班膦酸钠900μg）。供试品溶液的制备（B）：取伊班膦酸钠30片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于伊班膦酸钠45mg），置50ml量瓶中，加水适量，充分摇匀，使伊班膦酸钠完全溶解，加水至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。辅料溶液的制备（C）：按伊班膦酸钠片剂处方精密称取相当于伊班膦酸钠45mg的片剂中所需辅料量，置50ml量瓶中，加水适量，充分摇匀，使伊班膦酸钠完全溶解，加水至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为辅料溶液。

    2.2  含量测定  精密量取A、B、C各1ml置坩埚中，加0.2g氢氧化钙，摇匀，水浴蒸干，灼烧至灰白色，冷至室温，加稀盐酸10ml使溶解，移置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得A*，B*，C*。精密量取A*0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml，置25ml量瓶中，加定磷试液（稀硫酸：2.5%钼酸铵溶液：10%抗坏血酸溶液为3：1：1）5ml，加水稀释至刻度，摇匀后，置45℃水浴保温30min，照分光光度法［4］，在826nm的波长处测定吸光度，用吸光值对浓度作标准曲线。精密量取B*，C*各4.0ml，同上法测定吸光度，二者吸光度之差对照标准曲线求得伊班膦酸钠的量，此值与标示量之比即为片剂含量。

    3  结果

    3.1  测定波长的选择  分别取A*、B*、C*溶液适量，置25ml量瓶中，加定磷试液5ml，加水稀释至刻度，45℃水浴30min后，在400～1000nm波长扫描，所得峰形相似，826nm波长处有最大吸收。

    3.2  干扰因素的考察  辅料中只有乳糖溶于水，其余可通过过滤除去。辅料的续滤液加氢氧化钙灼烧后所得的C*和A*、B*扫描所得图形相似，虽吸光值很小，但对含量测定有干扰。故计算时应去除辅料的影响，避免测得含量偏高。

    3.3  氢氧化钙量的影响  取1ml对照品溶液，分别加入0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7g氢氧化钙，同上测定，结果表明吸光值随氢氧化钙量的增加而增加，氢氧化钙量大于0.5g时，灼烧物溶解时有不溶物产生。选氢氧化钙量为0.2g时，测得对照品溶液吸光值与伊班膦酸钠的浓度呈现良好的线性相关，γ=0.9999。

    3.4  水浴温度与时间的选择  取A*分别在45℃加热30、40、60min，70℃加热30min，100℃加热15min后测定，以45℃加热30min最佳。

    3.5  标准曲线  当伊班膦酸钠浓度为0.5～5μg/ml时，与吸光度呈良好线性，回归方程：Y=-0.02+0.00595X，γ=0.9999（n=4）。

    3.6  精密度、重复性试验  按2.1项下配制同一批号供试品溶液5份，按2.2项下测定，RSD 0.78%。取同一批号供试品5份，各按2.1项下配制成供试品溶液，按2.2项下测定，RSD 0.56%。

    3.7  回收率试验  称取（批号20040829）的供试品45mg，50mg，55mg，分别加空白片30片，置50ml量瓶中，加水溶解至刻度，滤过，按2.2项下测定。测得平均回收率为99.3%，RSD为0.48%（n=9）。

    3.8  供试品含量测定结果  供试品（批号：20040829、20040919、20041219）的含量（标示量％）分别为99.8%、99.2%和99.5%，RSD分别为0.49％、0.87％和0.66％（n=3）。

    4  结论

    本文中的灼烧测磷比色法测定的含量，是利用经典易行的方法，较文献［1，2］方法更为简便、可靠，而且样品检测结果准确，精密度及重复性高，平均回收率为99.3%。本方法中伊班膦酸钠在826nm波长处有最大吸收，在0.5～5μg/ml浓度范围内线性良好，较文献［3］报道的方法（线性范围为10～50μg/ml）灵敏度更高，更适用于伊班膦酸钠片的含量测定。

    【参考文献】

    1  Ulf Forsman，Margareta Andersson，Helen Tornros. Ion-exchange chromatography with post-column reaction for the analysis of phosphonoformance，phosphite and phosphate. J Chromatogr，1986，369:151.

    2  Thompson R，Grinberg N，Perpall H，et al. Separation of organophosephonates by ion chromatography with indirect photometric detection. J Liq Chromatogr，1994，17(11):2511.

    3  周杏琴，胡名扬，杨敏，等.伊班膦酸钠片含量分析方法的研究.药物分析杂志，2001，21(6)：396-398.

    4  国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）.北京： 化学工业出版社，2005，附录22-23.

     (编辑：邓  锋)

    作者单位： 214063 江苏无锡，卫生部核医学重点实验室，江苏省原子医学研究所