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【摘要】 目的 了解国内用于HIV－1/2检测的ELISA试剂盒现状。方法 用湖北省艾滋病性病防治中心确认实验室提供的200份样品，用明胶凝集法和蛋白印迹法来评价四个厂家的HIV抗体ELISA诊断试剂的敏感性、特异性。结果 被评价的各种检测诊断试剂敏感性在92.11%～94.74%之间，特异性在93.21%～100.00%之间，功效率93.50%～98.50%之间。结论 HIV抗体检测诊断试剂有较好的检测性能，国产试剂敏感性和特异性与进口试剂相差不大，适合在中国市场作为临床诊断中使用。
【关键词】 艾滋病病毒； ELISA； 诊断试剂； 分析
【Abstract】 Objective To determine HIV-1/2 ELISA retest protocol for blood samples of donors which are negative for HIV-1/2 detected primarily by a kind of ELISA kits.Methods To use PA to retest and Western blot analysis to confirm the preliminary testing resuits of four ELISA diagnostic kits,then to compare the sensitivities and specificities of the four kits. Results The sensitivities of the four kits were between 92.11%～94.74%, specificities between 93.21%～100.00% and efficacies between 93.50%～98.50%.Conclusion These four HIV antibody ELISA diagnosic kits have good quality, the sensitivities and specificities of both domestic ELISA kits and foreign ELISA kits are almost the same,and these ELISA kits can be used for clinical diagnosis in China.
【Key words】 HIV; ELISA; diagnostic kits; analysis
自从1981年在美国发现首例由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的艾滋病以来，人类一直在与其进行不懈的斗争。各类检测方法及检测手段都在不断改进和更新。用于HIV抗体检测的第一代ELISA试剂用全病毒包被，第二代ELISA试剂则发展为重组或多肽抗原，目前使用的为第三代ELISA试剂，不仅包被抗原高度纯化，且采用重组和多肽相结合，双抗原夹心法的应用使HIV抗体需要经两次选择，大大提高了特异性，使漏标率明显下降，并可同时检测IgG、IgM抗体，且成本较低［1］。目前，HIV诊断的标准方法是进行HIV抗体的血清学检测，临床常用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血液中艾滋病病毒1/2型（HIV1/2）抗体的方法筛查HIV感染者。血清学检测由初筛试验及确认试验组成，先用敏感性高的ELISA试剂进行筛查，结果阴性时判为阴性。结果阳性时用不同原理的试剂复检，复检结果阴性时判为阴性；结果阳性或一阴一阳时做蛋白印迹试验检测。WB结果可解释为阴性、阳性及不确定。
1 材料与方法
1.1 被评估的试剂 为北京万泰、华大吉比爱、珠海丽珠、生物梅里埃四家厂商提供的HIV抗体ELISA试剂盒，各试剂均有批准文号和批检报告，在试剂有效期内使用。
1.2 参考试剂及确认试剂 明胶凝集试剂（PA），日本伯乐富士瑞必欧株式会社生产;确认试剂新加坡Genelabs公司生产的Diagnostics HIV Blot.2.2试剂盒。试剂均符合国家标准并在有效期内使用。
1.3 评估用样品组成 总样品200份,其中已知阳性样品38份,阴性样品34份；未知样品是本省哨点监测样品128份。所有阳性样品均做WB确认试验。
1.4 方法 初筛试验为固相酶联免疫吸附试验（ELISA），复检试验为明胶凝集法（PA）和酶联免疫吸附试验（ELISA），确认试验为GENELABS蛋白印迹法。
1.5 仪器 奥地利产全自动定量绘图酶定仪reader2010，北京拓普全自动洗板机。
1.6 人员操作 试验严格按照各厂家的试剂说明书操作。检测工作操作人员均经过培训，取得上岗资格证书。
2 结果
见表1、表2。 表1 4种HIV抗体ELISA试剂评估检测结果表2 4种HIV抗体ELISA试剂评估结果比较全部初筛阳性标本经过Genelabs公司生产的Diagnostics HIV Blot.2.2试剂盒确认，无不确定结果。ELISA初筛试剂评估的试剂敏感性在92.11%～94.74%之间,特异性在93.21％～100%之间,功效率在93.50％～98.50之间(详见表2)。根据本次评估结果可以看出4家公司的试剂在敏感性上普遍较低, 敏感性在92.11%～94.74%之间,试剂之间相差不大,于去年相比(96.67%～100%之间)下降比较大,而在特异性上表现较好,除1家公司在93.21%以外,另三家公司的特异性在97%以上。
3 讨论
HIV抗体诊断试剂有多种，目前国内实验室普遍使用ELISA法，此法敏感性高，特异性强，至今已发展到第四代产品，但在实际工作中应用的仍是第三代双抗原夹心ELISA作为初筛试验首选的试剂［2］。参加本次评估的ELISA试剂有4种,国产ELISA试剂在敏感性和特异性已经与进口产品达到同等水平。从功效率看,本次评估国产试剂与进口试剂无明显差别，大部分国产试剂在敏感性和特异性上与进口试剂相比具有一定优势。
综上所述，通过200份血清样本检测，各厂家试剂的质量仍有一定差异，作为HIV－1/2抗体检测试剂，四家厂商的试剂敏感性普遍不高。因此，面对众多经过批批检定后的HIV抗体检测试剂盒，不同厂家及同一厂家生产的不同批次试剂的敏感性和特异性可能存在一定差异，各实验室最好应用标准质控血清对新购试剂及在每次检测时进行质量控制和质量评价，应把质量评估结果作为选用试剂盒的参考依据，选择合适实验试剂组合，避免HIV阳性样品漏检，以确保检测工作结果的准确可靠。
【参考文献】
1 叶顺章. 性传播疾病的实验室诊断. 北京：科学出版社，2001，75-76.
2 刘淑琴，薛芳.HIV抗体初筛阳性样本三种初筛试剂复检与确认试验结果的对比分析.中华中西医杂志，2003， 4（23）：29.
作者单位： 430079 湖北武汉，湖北省疾病预防控制中心
(编辑：汪 洋)