HBV前S1抗原与HBV五项标志物同步检测的互补性及与ALT的关系

    HBV前S1抗原与HBV五项标志物同步检测的互补性及与ALT的关系 (pdf)

       【摘要】  目的  探讨乙肝病毒前S1抗原与HBV血清五项标志物同步检测的互补性，以及与血清ALT异常的关系。方法  对确诊的285例乙肝病例抽取空腹血，采用ELISA法及TH-2型酶标仪分别进行前S1抗原和HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc五项检测；血清ALT应用日立7170A生化分析仪速率法检测；其结果数据按各血清组合模式分别进行比较，统计学处理采用χ2检验。结果  前S1抗原在第一模式［HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)组］77.6%的检出率，与在第二模式［HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)组］42.9%的检出率，及第三模式［HBsAg(+)、抗-HBc(+)组］31.8%的检出率之间差异有显著性(χ2=21.04和χ2=21.49，P＜0.01)；前S1抗原在HBeAg(+)组的检出率占78.46%，与HBeAg(-)组检出率40.45%比较，差异有非显著性（χ2=29.0，P＜0.01）；血清ALT异常者在前S1抗原(+)、HBeAg(+)组中占62.5%（30/48），明显高于前S1抗原(+)、HBeAg(-)组和前S1抗原(-)、HBeAg(+)组中的异常率16.7%，组间比较差异有显著性（χ2=29.9，P＜0.01）。结论  前S1抗原与病毒复制有关，与HBeAg具有一致性；与HBV五项标志物同步检测，对HB-e系统发生变异所致的错漏问题，在理论和实际工作中能起到互补作用，可减少和避免阴性结果对临床的误导；血清ALT的消长与前S1抗原和HBeAg的存在与阴转有关，可综合估计急性乙肝病人的病程与预后。

    【关键词】  HBV前S1抗原；HBV五项标志物；ALT；同步检测；互补性

      Complementarity of HBV pre-antigen S1 and HBV five label substances with simultaneous examination as well as the correlation of pre-antigen S1 with ALT

    LI Ze-meng，WEI Rong，ZHANG Jin，et al.Xian the No 4 Hospital，Shaanxi Xian  710004，China

    【Abstract】  Objective  The complementarity of pre-antigen S1 at hepatitis B virus and HBV five label substances with simultaneous determination was investigated；an abnormal relationship between pre-antigen S1 and serum glutamic pyruvic transaminase (alanine aminotransferase，ALT) in patients with hepatitis B was examined.Methods  Blood samples from fasting out- and in-patients with hepatitis B were collected and the following items were detected:  pre-antigen S1 (ELISA，Shanghai Alfa Biotech Co，lowest detective concentration 0.1μg/L)，HBV five label substances (HBsAg，anti-HBs，HBeAg，anti-HBe，and anti-HBc，ELSA kit，Shanghai Ke Hua Biological Product Co.).An enzyme immunoassay instrument (TH-12，made in Austria) was used for determining and reporting results.Serum ALT was detected with Hitachi 7170A automatic biochemical analyzer.Chi-square test was used for statistical analysis.Results  The pre-antigen S1 and various combining patterns of serum items was compared: the highest detective rate of positive pre-antigen S1 (77.6 %) was found in the group of HBsAg(+)，anti-HBe(+)，anti-HBc(+).In contrast，the pre-antigen S1 was positive in 42.9% cases with HBsAg(+)，anti-HBe(+)，anti-HBc(+) and 31.8% with HBsAg(+)，anti-HBc(+).The detective rate of pre-S1 antigen in first combing pattern was significantly different from that in second and third combing patterns (χ2 =21.04，χ2 =21.49，P＜0.01)，respectively.However，there is no significant difference between second and third patterns (χ2 =1.78，P＞0.05).Furthermore，the relationship of pre-antigen S1 and HBV-e system was determined: the positive detective rate (78.46%) of pre-antigen S1 in HBeAg (+) group was significantly higher than 40.45% in HBeAg (-) group (χ2 =29.0，P＜0.01).Finally，abnormal relationship between serum ALT and pre-antigen S1 as well as various combing pattern was compared: 30 cases (63.5%) of abnormal serum ALT was found in group of pre-antigen S1 (+) and HBeAg(+)，which is significantly higher that 16.7% in group of pre-antigen S1 (+) and HBeAg (-) and 16.7% in pre-antigen S1 (-) and HBeAg (+) (χ2 =29.9，P＜0.01).No statistical difference between groups of pre-antigen S1 (+)HBeAg (-) and pre-antigen S1 (-)HBeAg (+) (χ2 =0，17，P＞0.05).Conclusion  The pre-antigen S1 was similar to HBeAg and related to viral replication，which was consistent with the previous reports ［5］.Simultaneous examination for pre-antigen S1 and HBV five label substances is a good complementary method to prevent from misdetection resulting from a possible variation of HBV-e antigen and antibody system，which also could reduce and avoid clinical mistake to report negative results.Based on the examinations for serum ALT，combing with detection to early change of pre-antigen S1 and pre-antibody S1，the prognosis and illness course in patients with acute hepatitis B could evaluated comprehensively.

    【Key words】  HBV pre-antigen S1；HBV five label substances；ALT (alanine aminotransferase)；simultaneous examination；complementarity

    前S1抗原是乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白（含S、前S1和前S2蛋白）的重要成分，在病毒感染、装配、复制与细胞基因表达活性和机体免疫应答等方面所起的重要作用［1，2］，已受到临床的普遍重视。因此，前S1抗原的存在反映HBV活动复制和肝损害，具有独立检测价值和补充乙型肝炎（以下简称“乙肝”）检测的意义［3～5］。为探讨其与HBV血清五项标志物之间的关系和同步检测的互补性，以及与乙肝病人血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）异常的关系，笔者对乙肝病人HBV血清五项标志物及前S1抗原进行了同步检测，并结合ALT等分析，现将统计资料完整的285例结果报道如下。

    1  资料与方法

    1.1  资料来源  本组285例乙肝病例，均为我院内科门诊和(或)住院部病例。其乙肝的诊断，参照2000年9月中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会在西安联合修订《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准。其中男168例，女117例，年龄最大74岁，最小11岁，平均35岁。均抽取空腹血分离血清标本，于当天检测。

    1.2  试剂与方法  前S1抗原检测用ELISA双抗体夹心法试剂盒，由上海阿尔法生物技术公司提供（最低检测浓度为0.1μg/L）。HBV血清五项标志物（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc）采用ELISA法试剂盒，由上海科华生物试剂公司提供。所用酶标仪系奥地利TH-2型及配套洗板机，各项实验操作均严格按照说明书进行。ALT检测应用日立7170A全自动生化分析仪和上海复星长征液体生化试剂盒，其参考值0～40u/L。

    1.3  统计学处理  用χ2检验。

    2  结果

    2.1  前S1抗原与HBV五项标志物各血清模式间的比较  见表1。

    2.2  前S1抗原与HBeAg关系比较  见表2。表1  前S1抗原与HBV标志物不同血清模式间的结果比较 表1中前S1抗原在第一模式中检出率（77.6%），较第二模式（42.9%）、第三模式（31.8%）检出率偏高，差异有显著性(χ2=21.04和χ2=21.49，P＜0.01)；第二模式与第三模式之间检出率差异无显著性（χ2=1.78，P＞0.05）。另在少见血清模式HBsAg(+)、抗-HBs(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)组和HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)组病例中，各检出1例和2例前S1抗原(+)。表2  前S1抗原与HBeAg关系比较表2中HBeAg(+)组中前S1抗原(+)占78.46%，220例HBeAg(-)组中，前S1抗原(+)占40.45%。两组间检出率差异有显著性（χ2=29.0，P＜0.01）。

    2.3  前S1抗原与ALT值异常的关系  见表3。表3  前S1抗原与ALT升高的关系表3显示，前S1抗原(+)、HBeAg(+)组中血清ALT异常者占62.5%（30/48），明显高于前S1抗原(+)、HBeAg(-)组16.7%(15/90)和前S1抗原(-)、HBeAg(+)组16.7%(2/12)，差异有显著性（χ2=29.9，P＜0.01）；而前S1抗原(+)、HBeAg(-)组和前S1抗原阴性、HBeAg(+)组之间差异无显著性（χ2=0.17，P＞0.05）。在ALT高值段，前S1抗原和HBeAg均阳性，而在ALT恢复期，前S1抗原和HBeAg均不同程度出现阴转。说明ALT异常与前S1抗原和HBeAg的存在与病毒复制有关。

    3  讨论

    从1990年Petit［3］等观察到前S1抗原参与介导病毒颗粒粘附宿主肝细胞后，国内外有多数文献［2～8］报道：前S1抗原与HBsAg、HBeAg、HBV-DNA有很好的相关性，能够反映HBV感染复制，与传染有关。本组结果显示，在285例HBsAg(+)病例中，前S1抗原(+)占49.5%，而在HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)组合模式中，前S1抗原却占77.6%（45/58）的较大比例。这一结果与文献［1］报道的急性乙肝中前S1抗原与HBsAg同时出现，但其阴转率明显高于HBsAg的结果相似，说明前S1抗原不但与病毒复制及传染有关，而且在反映病毒清除和病情转归方面优于HBsAg。

    对于HBeAg，相关资料［4］显示它和HBcAg有75%的共同氨基酸序列，被普遍认为与HBV-DNA水平常一致，是临床上表达病毒复制较实用的血清标志物指标。通过对前S1抗原与HBV五项标志物的同步检测分析，使前S1抗原与HBeAg的关系更为明晰。在HBeAg(+)组中前S1抗原(+)占78.46%，而在HBeAg(-)病例中，前S1抗原(+)检出率却占40.45%，经与不同组合模式进行关系比较，仅此两组之间有明显的差异（P＜0.01），显示前S1抗原与HBeAg具有较好的一致性。这一结果说明前S1抗原在HBV感染早期就可检出，与多数研究［4～6］报道的前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg出现和消失相关的结果基本一致。

    关于前S1抗原与HBV五项标志物同步检测的互补作用，这在HB-e系统检测中显得尤为突出。本文220例HBeAg(-)组中检出前S1抗原(+)89例（占40.45%），对这一实际现象，有学者［5］认为是HBV为逃避宿主的免疫反应，其C基因前C区常发生变异导致HBeAg的不表达现象。因此对HBeAg(-)结果同时又有前S1抗原(+)的存在，并不意味着HBV的清除或复制水平的减低，而应考虑HBeAg(-)病人中有相当一部分人存在病毒复制的可能。本文结果与大多数文献［5～7］报道的实际检测结果一致，体现了前S1抗原在HBV感染过程中检测的优势，但却不能单独代替HBeAg和HBV-DNA的实验检测。基于HB-e系统常发生变异可能导致的错漏，笔者将前S1抗原和HBV五项标志物做同步实验检测，经临床应用观察，两者在理论和实践上有明显的互补作用，对认识HBV感染、活动性复制及预后判断有重要意义。同时为临床提供了新的综合判别指标，可避免或减少因HBeAg变异而产生的阴性结果对临床治疗的误导。因此，提示HBeAg(-)者，仅检测乙肝五项标志物是不够的，应补充前S1抗原或HBV-DNA的检测。

    ALT是肝细胞损伤的标志性血清酶，其阳性率达96.7%。ALT虽在某些骨骼肌疾病时亦出现增高，但主要表现的仍是肝炎急性期肝细胞损伤的程度，在肝炎恢复期ALT又可逐步恢复正常。对于前S1抗原与ALT异常的关系，本文显示：在资料完整的150例ALT检测中，ALT异常47例，其中前S1抗原(+)并伴随ALT增高者占95.7%（45/47），而前S1抗原(-)病例中仅有4.3%ALT增高（2/47），两组间差异有显著性（P＜0.01）；在前S1抗原(+)和HBeAg(+)组中ALT异常占63.87%(30/47)，而在前S1抗原(+)、HBeAg(-)组中ALT异常仅占31.9%（15/47），两组间差异有显著性（P＜0.01）。表明本文血清ALT异常主要出现在HBeAg阳性和前S1抗原阳性病例中，提示并印证了前S1抗原出现在乙型肝炎感染的早期，及HBV大量复制对肝细胞造成损害且极具传染性这一特点，同时血清ALT异常要持续到前S1抗原和HBeAg这一复制指标的阴转之后才会逐渐降低［8］。这使前S1抗原与HBeAg的相关性，在本组资料中得到进一步明确。对于血清ALT的消长，临床通常只作为评价HBV疗效和病情转归的指标，在同步检测前S1抗原后，根据其阴转和前S1抗体的阳转情况综合判别，则可估计急性乙肝病人的病程与预后［1］。同时为临床一直沿用的HBsAg和HB-e系统判断治疗效果的方式增加了新指标，将对抗HBV治疗药物的效果反应，在判断上变得更明确和灵敏。

    【参考文献】

    1  冯福民，米志宝，张习坦，等.乙型肝炎病毒前S1抗原检测法及临床意义.天津医药，1998，26(2)：74.

    2  Hu PS.Quntitative Studies of the hepatitis B virus pre-s proteins: laok of correlation  with the HBeAg status I.Virol Meth，1987，16:97.

    3  Petit MA，Zoulim F，Capel F，et al.Variable expression of preS1  antigen in serum during chronic hepatitis B virus infection: An accurate marker for the level of hepatitis B virus  reapplication.Hepatology，1990，11:809.

    4  姚光弼.乙型肝炎病毒前S1蛋白及其临床意义.国外医学·流行病学传染病学分册，1988，15(47):15.

    5  钟磊.乙型肝炎病毒前S1抗原及抗体与HBV血清标志物的相关性.临床检验杂志，1999，17（6）：142 -141.

    6  徐蓓，姚光弼.乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其与病毒复制的关系.中华实验和临床病毒学杂志，1997，11（2）：117.

    7  刘惠诊.乙型肝炎病毒前S1抗原及抗体的检测及临床意义.首都医大学报，1997，18（3）：246.

    8  柳长柏.乙型肝炎病毒感染者血清前S1和前S2抗原同步检测的临床意义.上海医学，1991，14（11）：631.

    作者单位： 710004 陕西西安，西安市第四医院

　(编辑：罗  彬)