淫羊藿对正常及免疫系统受损小鼠免疫功能的调节作用

     【摘要】 目的 研究了淫羊藿对正常小鼠及受环磷酰胺（CP）损伤免疫系统的小鼠的免疫调节作用。方法 实验设淫羊藿3300mg/（kg·bw）组、淫羊藿3300mg/（kg·bw）＋CP［25mg/（kg·bw）］组、CP［25 mg/（kg·bw）］组、正常对照组。灌胃给药21天。观察小鼠脏器系数、外周血T淋巴细胞ANAE阳性率、足趾DTH、腹腔巨噬细胞吞噬功能等指标。结果 淫羊藿组的T淋巴细胞的ANAE阳性率、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数明显高于对照组（P<0.05）；淫羊藿＋CP组的脾脏器系数、ANAE阳性率、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数均恢复至正常水平；淫羊藿＋CP组的胸腺脏器系数和足趾DTH较CP组有明显升高，但没有恢复至正常水平。结论 淫羊藿对受环磷酰胺损伤免疫功能小鼠的免疫系统有一定的调节作用。

    【关键词】 淫羊藿；小鼠；免疫调节

      淫羊藿，其茎叶主要含有淫羊藿苷，多年生草本，生长于多荫蔽的树林及灌木丛中［1］。主要分布在我国南方地区。据《本草纲目》上记载：淫羊藿主治阳痿绝伤、茎中痛、利小便、强志。研究表明：淫羊藿有雄性激素样作用，并能降低健康人的全血粘度，改善器官和组织的血液供应；具有增强免疫功能的作用；淫羊藿的提取物淫羊藿总黄酮对小鼠的免疫活性细胞具有调整作用；淫羊藿多糖具有抗叠氮胸苷（一种治疗人类免疫缺陷性病毒性传染病AIDS的治疗药物）对小鼠造血系统及免疫功能的损害作用［2～5］。本实验对正常及受环磷酰胺损伤免疫系统 的小鼠用淫羊藿煎汁灌胃进行了系列的实验研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料 新鲜淫羊藿叶、茎晒干，打碎，浸泡过夜，煎煮浓缩。二级雌性昆明种小鼠（体重22～24g），雄鸡（制取鸡红细胞），羊红细胞SRBC，以上动物均由贵阳医学院实验动物中心提供。合格证号：SCXK(黔)2002-0001。饲料为《双狮牌》小鼠全价灭菌饲料。实验动物使用许可证：SYXK(黔)2003-0003。

    1.2 方法

    1.2.1 动物分组 据动物体重随机分组，用雌性小鼠80只，分为4组，每组动物20只，设为正常对照组、淫羊藿3300mg/（kg·bw）组、淫羊藿3300mg/（kg·bw）＋环磷酰胺（CP）25mg/（kg·bw）组、环磷酰胺（CP）25mg/（kg·bw）组。灌胃量为0.02ml/g。每日上午10时灌胃给淫羊藿浸提液，下午4时灌胃给CP，连续给药21天。

    1.2.2 观察指标

    1.2.2.1 小鼠免疫器官重量测定 于给药后第21天称重并处死小鼠，取胸腺、脾脏称重，计算脏器系数。

    1.2.2.2 小鼠外周血T淋巴细胞醋酸萘酯酶染色测定（ANAE） 于给药后第21天，尾静脉取血涂片，孵育，孔雀绿-甲基绿复染，油镜下计数200个淋巴细胞，计算ANAE阳性率。

    1.2.2.3 小鼠迟发型超敏反应（DTH）的测定 于给药后第17天腹腔注射0.2ml（1×108个SRBC），第21天用0.02ml（1×108个SRBC）攻击小鼠后左跖底，于攻击前和攻击后24h分别测定小鼠后左足跖厚度，确定DTH强度。

    1.2.2.4 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定 于给药后第22天给小鼠腹腔注射0.2ml 5％鸡红细胞悬液，16～18h后 处死动物，腹腔注入Hank’s工作液2ml，轻揉小鼠腹部，吸出腹腔液， 37℃恒温保湿30min，Giemsa-wright-PB染色10min，油镜下计数100个巨噬细胞中吞噬鸡红细胞总数和100个巨噬细胞中吞有鸡红细胞的巨噬细胞数目，计算吞噬指数和吞噬率（吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数，吞噬率＝吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数×100%）。

    2 结果

    2.1 淫羊藿对小鼠免疫器官重量及外周血T淋巴细胞ANAE阳性率的影响 见表1。

    表1可见，淫羊藿＋CP组的脾脏指数、ANAE与正常对照组比较，差异无显著性，胸腺指数较正常对照组明显降低（P< 0.01），但明显高于CP组（P< 0.01）。淫羊藿组的ANAE阳性率明显高于正常对照组（P< 0.01）。

    2.2 淫羊藿对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响 见表2。表1 脾脏、胸腺脏器系数及ANAE 阳性率注;与正常对照组比较，*P< 0.01；与CP组比较，△P< 0.01表2 巨噬细胞吞噬率、吞噬指数及 DTH强度注：与正常对照组比较，*P< 0.01；与CP组比较，△P< 0.01表2中，与正常对照组比较，淫羊藿组的吞噬率、吞噬指数都有明显升高（P< 0.01），对CP造成免疫功能低下的小鼠，在同时给食淫羊藿时，其吞噬率、吞噬指数都恢复至正常水平；CP降低小鼠的DTH强度，但在同时给淫羊藿后，其足趾厚度差值较之CP组有明显增高（P< 0.01），但未能恢复至正常水平。

    3 讨论

    淫羊藿近年来多见用在保健食品中，它对人体的保健及调节功能可能与其含有黄酮和多糖类物质有关。从本次研究中可见，淫羊藿在小鼠免疫系统受损的情况下，能有效调节其免疫功能，明显提高淋巴细胞ANAE阳性率，对受损小鼠迟发型变态反应有部分改善作用，表明淫羊藿对小鼠细胞免疫功能有明显增强作用。淫羊藿使小鼠腹腔巨噬细胞功能明显提高，提示淫羊藿对巨噬细胞表面的多种受体如IgEFc受体、补体C3受体等具有促进识别功能或直接刺激活化巨噬细胞，使其吞噬功能增强［6］。本次实验采用环磷酰胺建立小鼠免疫系统受损的动物模型，经本实验室多次摸索，认为环磷酰胺剂量为25mg/kg时，经连续21天给药，小鼠的免疫功能降至低水平，但此时小鼠未发生死亡或死亡的数量很少，不会影响实验结果的分析，本次研究证明这个小鼠免疫功能受损模型是成功的。

    淫羊藿对受损的机体免疫功能具有很明显的改善作用，但其具体的功效成分、作用强度及最佳生物学效应还待进一步的研究。

    【参考文献】

    1 江苏新医学院.中药大辞典.上海：上海科学技术出版社，1990，389-391.

    2 李锐松，许俊杰.健康人口服淫羊藿煎剂前后血液流变学的观察.中药药理与临床，1988，4（3）：44-45.

    3 杨贵贞，耿排力.淫羊藿含剂及其提取物对实验动物免疫活性细胞的调整作用及其机理探讨.中国免疫学杂志，1985，2（1）：25-26.

    4 丁雁，邢善田，周余黄.淫羊藿多糖促进小鼠T和B细胞3H-TdR掺入和诱生干扰素的作用.中国免疫学杂志，1985，1（6）：42-43.

    5 丁雁，陈萍，邢善田，等.淫羊藿多糖对叠氮胸苷抑制小鼠造血和免疫功能的对抗作用.中国药理学与毒理学杂志，1994，8（3）：203-204.

    6 马振业.中药方剂免疫药理研究.西安：陕西科学技术出版社，1986，115-118.

    作者单位： 550004 贵州贵阳,贵州省疾病预防控制中心

　 (编辑：余 强)