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【摘要】 目的 提高抗病毒口服液的质量控制标准。方法 采用薄层层析法对连翘、知母、石菖蒲进行鉴别。结果 知母、石菖蒲和连翘的薄层色谱鉴别专属性强，阴性对照无干扰。结论 本法简便、准确,专属性强,可对该药品进行有效的质量控制。
【关键词】 抗病毒口服液；连翘；知母；石菖蒲；薄层色谱法
抗病毒口服液具有清热祛湿、凉血解毒之功效，用于风热感冒、温病发热、上呼吸道感染、流感、腮腺炎等病毒感染疾患。处方主要由板蓝根、连翘、知母、芦根、广藿香、地黄、石菖蒲、郁金、石膏等九味中药组成。现试行的质量标准（标准号：YBZ12762005）比较简单,定性鉴别方面只有连翘一味药材的薄层鉴别。鉴于原质量标准难以很好的控制产品的质量，提高其质量标准势在必行。笔者通过实验研究，在改进连翘薄层鉴别方法的同时，增加建立了知母、石菖蒲薄层鉴别方法，更加有效地控制产品的内在质量，现报道如下。
1 仪器与试药
1.1 仪器 BS224S电子天平（德国sartorius）；KQ-100型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2 试药 连翘苷对照品(批号110821－200406)、 菝葜皂苷元对照品(批号744－9904) 、 连翘对照药材(批号120908－200411)、石菖蒲对照药材(批号121098-200403)均购自中国药品生物制品检定所；抗病毒口服液(市售)；硅胶G(青岛海洋化工厂) ；其余所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 连翘的薄层鉴别 取本品20ml,用醋酸乙酯提取3次,每次20ml,合并醋酸乙酯液,水浴挥干,残渣加甲醇溶解并定容至1ml，作为供试品溶液；另取连翘对照药材3g ,加水煎煮1.5h ,滤过,滤液经醇沉后滤过,蒸干滤液,残渣加水溶解后按供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；再取连翘苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg 的溶液,作为对照品溶液；再取缺连翘的阴性样品（按处方中药味比例，自配不含连翘的群药）按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。按照薄层色谱法《中国药典》2005年版一部附录VI B）试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液和阴性对照溶液各10μl,连翘苷对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿－甲醇－冰醋酸(85∶10∶5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛溶液, 在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的斑点,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见图1。
2.2 知母的薄层鉴别 取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣加乙醇10ml、盐酸1ml，加热回流1h后浓缩至约5ml，加水10ml，用石油醚（60～90℃）振摇提取两次，每次10ml，合并石油醚液，水浴蒸干，残渣加甲苯1ml溶解，作为供试品溶液；取菝葜皂苷元对照品，加甲苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；另取知母阴性对照样品,同法制成阴性对照溶液。按照薄层色谱法《中国药典》2005年版一部附录VI B）试验，吸取上述供试品溶液和阴性对照溶液各10μl, 菝葜皂苷元对照品溶液5μl，分别点于同一硅G薄层板上，以甲苯-丙酮（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见图2。
2.3 石菖蒲的薄层鉴别 取本品30ml，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并醋酸乙酯，置60℃水浴上蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml溶解，作为供试品溶液。另取石菖蒲对照药材0.5g，加甲醇5ml超声20min，滤过，作为对照药材溶液。按照薄层色谱法（《中国药典》2005年版一部附录VI B）试验，吸取供试品溶液和阴性溶液各10μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（60～90℃）-醋酸乙酯（8：2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见图3。
3 讨论
3.1 连翘的TLC鉴别 本鉴别方法中，供试品溶液的制备，原标准及部分文献［1］采用现试行的质量标准中含量测定项下的供试品，即采用大孔树脂柱洗脱。本实验采用醋酸乙酯直接萃取而取消了过柱的过程，结果色谱斑点清晰,阴性无干扰。该方法简便、快速,减少了繁琐的操作步骤,且节约试剂，同时本实验增加了对照药材溶液作为对照，专属性强，重现性好，且除连翘苷外，还增加了对照药材的特征斑点。
3.2 知母的TLC鉴别 本鉴别方法中，供试品的提取曾参考文献［2］采用水加盐酸水解得菝契皂苷元,试验重现性不好，加大酸和水的用量且延长回流提取的时间,结果依然不理想，后改用乙醇水解效果较好；本实验曾参考文献［3］将水解后的石油醚萃取液经碱洗再水洗后检不出样品中的特征斑点，所以本实验将石油醚萃取液挥干后直接溶解点样；文献法多采用苯作样品溶剂及展开剂，本文以石油醚取代甲苯以减少毒性，实验结果表明，薄层色谱斑点清晰，重现性好，阴性无干扰。
3.3 石菖蒲的TLC鉴别 本鉴别方法中,供试品的制备曾采用石油醚（30～60℃）萃取,但发现部分批次样品发生乳化现象，影响实验结果，后改用醋酸乙酯来提取，结果较理想；考虑到石菖蒲的主要成分为挥发油［4］，本文在制备供试品溶液的时候考察了不同水浴蒸干温度（室温、30℃、60℃、80℃、100℃）对实验结果的影响，结果表明，室温下自然挥干的供试品斑点的颜色很淡，可能是由于挥干温度太低（约15℃，醋酸乙酯的沸点为77.06℃），挥干时间过长，暴露在空气中挥发油损失造成，而置100℃水浴蒸干的供试品由于挥干温度过高，斑点颜色明显变淡，置30℃、60℃、80℃水浴蒸干的供试品斑点颜色无明显差异。因此水浴蒸干的温度宜控制在30℃～80℃。
【参考文献】
1 卢日刚,刘伟林.抗病毒口服液质量标准研究.中成药,2004，26（11）：888-891.
2 贾庆文，张秋红，刘伶，等. 抗病毒口服液质量标准的研究. 山东医药工业，2002，21（3）：3-4.
3 黄晓玲，刘乡乡，王世勇，等. 抗病毒口服液的质量标准研究.中药新药与临床药理，2004，15（3）：181-183.
4 李吉来，陈飞龙，贺丰，等.石菖蒲挥发油成分的GC-MS分析及不同提取方法的比较研究.中药材，2001，24（7）：494-495.
作者单位：1 210008 江苏南京，江苏省药检所 2 529100 广东江门，江门市新会区人民医院（△通讯作者） 3 529100 广东江门，江门市新会区会城医院