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【关键词】 血清胸腺因子； 抑瘤率； 生命延长率
Serum thymus factor （FTS）inhibition function to the animal implantative tumor of the experimental study
LE Jia-jing,ZHANG Lin-ke,ZHANG Chang-ping，et al.National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products, Beijing 100050,China
【Abstract】 Objective This article has damped the lump function as well as the life extension function from in vivo experimental study FTS to the Dutch lump animal. Methods After different animal portability tumor model hypodermic injection different dosage FTS, the determination lump heavy, or recording animal survival time. Results After the Dutch lump mouse and big mouse hypodermic injection different dosage FTS, discovered FTS 2.5 mg/kg, 1.25 mg/kg can obviously suppress mouse portability tumor H22, the S180 growth （P< 0.01） and FTS 2.2 mg/kg, 1.1 mg/kg suppresses big mouse portability tumor W256 the growth （P< 0.01）, and, FTS 2.5 mg/kg, 1.25 mg/kg, also may obviously increase EAC, the H22 ascites lump life rate of elongation （P< 0.01）. Conclusion FTS may obviously increase the Dutch lump animal’s anti-tumor function.
【Key words】 serum thymus factor; damps the lump rate; life rate of elongation
血清胸腺因子（Thymulin,简称FTS）是从人和猪的血清中分离得到的一类具有增强机体免疫功能的小分子量多肽［1］,人工合成的FTS与自然合成的FTS同样具有免疫活性。目前，FTS的正处于研究阶段，本文通过不同肿瘤模型，研究了FTS对动物移植性肿瘤的抵抗作用，为今后进一步研究FTS的抗肿瘤作用打下良好的基础。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂 血清胸腺因子（FTS）,批号 060821, 由深圳市翰宇生物工程有限公司提供,其纯度为>96%,冻干粉末,冷冻保存，临用前取FTS 1mg，加1ml消毒生理盐水稀释为1mg/ml的原液，供皮下注射用。阳性对照药为环磷酰胺，针剂，10mg/10ml, 山西泰盛制药有限公司提供 ,批号20040413； 5－氟尿嘧啶，针剂，250mg/10ml，上海旭东海普药业有限公司，批号060107。
1.2 瘤株 小鼠肉瘤（S180）、小鼠肝癌（H22）、小鼠艾氏腹水瘤（EAC），取接种于小鼠的腹腔第7天的瘤株,配成106/ml瘤细胞悬液，腹水瘤接种于小鼠腹腔，0.4ml/鼠；实体瘤接种于小鼠前肢腋窝皮下，0.2ml/鼠；大鼠瓦克肉瘤（W256），取接种于大鼠腹腔第7天的Walker-256瘤株，配成106/鼠瘤细胞悬液接种于大鼠右侧腿肌肉，0.2ml/鼠。
1.3 动物 实验用体重18～20g的SPF级雄性昆明小鼠，以及体重100～120g的SPF级wistar大鼠，动物合格证号：SCXK京（2005-2006），均由中国药品生物制品检定所实验动物中心提供。饲养观察2天后使用。实验动物室为无菌空气二级过滤，人工日光灯12h自动照明，恒温、恒湿送风，温度22～24℃，相对湿度40%～45％。鼠笼具为塑料盒,不锈钢丝盖。
1.4 剂量设置 根据药效曲线结果设置剂量为高、中、低三个剂量组，小鼠给药剂量2.5、1.25、0.63mg/kg，给药体积为0.2ml/10g。大鼠给药剂量为2.2、1.1、0.55mg/kg，给药体积为2ml/kg。阳性对照药环磷酰胺，临用前配成10mg/ml，小鼠皮下0.1ml/10g，剂量为100 mg/kg；大鼠皮下2ml/kg，剂量为89.2 mg/kg；5－氟尿嘧啶，临用前配成2.510mg/ml，小鼠皮下0.1ml/10g，给药剂量25mg/kg。空白对照用NS，药液临用时根据动物个体体重调整给药体积。
1.5 给药方法 动物接种瘤株后，于次日检查瘤株培养情况，如无污染，则将动物称重并随机分组后，皮下注射给药，给药组及对照组每日给药1次，共14天；5－氟尿嘧啶，隔日1次，共3次，环磷酰胺一次性给药。
1.6 检测指标 根椐实验要求腹水瘤用生命延长率=（给药组存活时间-对照组存活时间）/对照组存活时间×100% ，实体瘤用抑瘤率=（对照组瘤重-实验组瘤重）/对照组瘤重×100%，>30%为有效指标。
1.7 统计学处理 实验数据用x±s表示，组间比较用t检验。
2 方法与结果
2.1 FTS对昆明小鼠移植型实体瘤H22的抑瘤影响 取接种H22瘤株24h后的昆明小鼠50只，均分为5组，分别按高、中、低3个剂量注射FTS，对照组注射NS，用环磷酰胺做阳性对照。给药后第14天，各组称重，断颈处死取瘤称重，结果见表1。表1 FTS对昆明小鼠实体瘤H22的抑瘤影响注：与对照组比较， **P<0.01
2.2 FTS对昆明小鼠移植型实体瘤S180的抑瘤影响 取接种S180瘤株24h后的昆明小鼠50只，均分为5组，分别按高、中、低3个剂量注射FTS，对照组注射NS，用环磷酰胺做阳性对照。给药后第14天，各组称重，断颈处死取瘤称重，结果见表2。 表2 FTS对昆明小鼠实体瘤S180的抑瘤影响 注：与对照组比较， **P<0.01
2.3 FTS对wistar大鼠移植型实体瘤w256的抑瘤影响 取接种w256瘤株24h后的wistar大鼠50只，均分为5组，分别按高、中、低3个剂量注射FTS，对照组注射NS，用环磷酰胺做阳性对照。给药后第14天，各组称重，断颈处死取接种瘤株的右腿称重，结果见表3。表3 FTS对wistar大鼠实体瘤w256的 抑瘤影响由表1～3可知，FTS各剂量间呈现量效关系，高、中剂量组可以显著地抑制H22、S180小鼠实体瘤的生长，在对大鼠W256肉瘤的作用中，除高、中剂量外，低剂量也可显著的抑制肿瘤的生长，由此可见，FTS对实体瘤的敏感度是不同的。
2.4 FTS对昆明小鼠移植型腹水瘤EAC生命延长作用的影响 取接种EAC瘤株24h后的昆明小鼠50只，均分为5组，分别按高、中、低3个剂量注射FTS，对照组注射NS，用5-氟尿嘧啶做阳性对照，每天记录动物死亡情况，记录各组的存活天数，结果见表4。表4 FTS对昆明小鼠腹水瘤EAC生命延长作用的影响注：与对照组比较， **P<0.01
2.5 FTS对昆明小鼠移植型腹水瘤S180生命延长作用的影响 取接种S180 瘤株24h后的昆明小鼠50只，均分为5组，分别按高、中、低3个剂量注射FTS，对照组注射NS，用5-氟尿嘧啶做阳性对照，每天记录动物死亡情况，记录各组的存活天数，结果见表5。表5 FTS对昆明小鼠腹水瘤S180生命延长作用的影响 注：与对照组比较， **P<0.01
由表4～5可知，FTS各剂量间呈现量效关系，高、中剂量组可以显著地延长EAC、S180小鼠的存活时间，增加其生命延长率，显现了抗肿瘤的作用。
3 结论
胸腺素包括胸腺素α家族、β家族、胸腺体液因子（THF）、血清胸腺因子（Thymulin, FTS）、胸腺生成素（Thymopoietin）等数十种［2］。此类制剂在抗感染、抗肿瘤和自身免疫疾病中起着重要作用［3］，提取的胸腺素制剂在临床已有多年的应用，但都是多种肽类的混合物［4］，我室利用合成技术合成了FTS，有意于开发成一类抗肿瘤药，目前对于FTS的研究在国内外还未见报道，从本文的初步研究中不难发现，血清胸腺因子（FTS）在抗肿瘤方面有着积极的作用，可以抑制S180、H22及w256实体瘤的生长，高剂量的抑制率达到了40.7%、50.0%及65.2%（P<0.01）,并且对EAC、S180腹水瘤也有延长生命的作用，生命延长率达到了58.6%、37.6% （P<0.01），均大于新药提出的30%的指标［5］，FTS的抗癌作用作为一种新的抗癌药，在肿瘤治疗中将有广泛的用途。
【参考文献】
1 JF Bach, M Dardenne, JM Pleau. Biochemical characterization of a serum thymic factor .Nature, 1977, 266（3）:55-56.
2 JM Pleau , M Dardenne, Y Blouquit ,et al. Structural study of circulating thymic factor: a peptide isolated from pig serum. II. Amino acid sequence. J Biol Chem， 1977，252（22）:8045-8047.
3 Villa Verde DMS, Dfresne MP, Vannier-dos Santos MA, et al. Identification of nuclear triiodothyronine receptors in the thymic epithelium. Endocrinol, 1992, 131:1313-1320.
4 新药（西药）临床前研究指导原则汇编（药学 药理学 毒理学）.中华人民共和国卫生部药政局,1993,137-141.
5 徐叔云,卞如濂，陈修. 药理学实验方法学.北京：人民卫生出版社，2002,1762-1763.
作者单位：100050 北京，中国药品生物制品检定所（Δ通讯作者）