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【关键词】 紫丁香甙
紫丁香甙具有镇静安神、扩张血管、降低血液粘度、抗疲劳等作用,是多种保健品中的功效成分。目前药物中紫丁香甙的测定已有报道[1,2],保健品中紫丁香甙的测定未见报道,由于保健品中紫丁香甙含量较低,并且成分复杂,故研究采用高效液相色谱法建立了保健食品中的紫丁香甙测定方法。
1 原理
样品经前处理后,过膜进样,利用高效液相色谱柱对不同的物质在流动相中的保留时间不同,以此作为定性依据,以样品的浓度为横坐标以样品的峰面积作为纵坐标以此作为定量依据,计算其含量。
2 试剂
本方法中除特殊规定外,所用试剂为分析纯,试验用水为蒸馏水或同等纯度的水。
2.1 甲醇 优级纯。
2.2 纯水。
2.3 紫丁香甙标准溶液 取适量紫丁香甙标品,以甲醇配成1mg/ml的储备液,临用时稀释成50μg/ml的标准应用液。
3 仪器
岛津LC-10A液相色谱仪,SPD-10A紫外检测器,Diamonsil(钻石)C-18柱。
4 分析步骤
4.1 样品预处理 固体样品:取5.00g样品,加入80ml甲醇,水浴回流2h,放冷,甲醇定容100ml,取续滤液50ml于蒸发皿中水浴挥干,50ml水溶解,10ml氯仿提取两次,去氯仿层、水层再分别用水饱和过的正丁醇萃取两次,合并正丁醇层于蒸发皿中水浴挥干,甲醇定容10ml。
液体样品:取100ml样品,20ml氯仿提取两次,去氯仿层、水层再分别用水饱和过的正丁醇20ml萃取两次,合并正丁醇层于蒸发皿中水浴挥干,甲醇定容10ml。
4.2 标准曲线的配置 取紫丁香甙储备液用甲醇配成浓度分别为1.5、5.0、10.0、20.0、50.0μg/ml的标准系列,测定标准系列的峰面积,以紫丁香甙浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标绘制标准曲线。
4.3 测定
4.3.1 仪器参考条件 色谱条件:紫外检测器,波长267nm;色谱柱:Diamonsil(钻石) C18柱5μm(200mm×4.6mm):流动相:甲醇-水=1:4;流速:0.6ml/min;进样量10μl。
4.3.2 测定方法 按上述色谱条件,取过膜(0.4μm)滤液进样进行分析,外标法定量。
5 结果计算
5.1 按下式计算
X=c m×V×100 1000
式中:X:紫丁香甙的含量,mg/100g;
C:标准曲线上查到的紫丁香甙的含量μg/ml;
V:样品浓缩体积,ml;
M:样品质量(体积),g(ml)。
5.2 本标准检出限 0.01μg/ml。
标准曲线线性范围 0~50 μg/ml。6 精密度和准确度
见表1。表1 方法的准确度精密度试验(略)
【参考文献】
1 俞敏倩,陈建民.高效液相色谱法测定11种雪莲花中的紫丁香甙及芦丁色谱.中国药学报,2001,5:243-244.
2 盛秀梅,李晓冬,吕春铃,等.高效液相色谱法测定刺五加注射液中紫丁香甙的含量.中医药学报,2000,4:52.
作者单位:135200 吉林靖宇,靖宇县疾病预防控制中心