脯氨酸羟化酶2 siRNA对抗霉素诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

2007年01月05日 中华肾脏病杂志 2006 Vol.22 No.11 P.673-676 15 （西安）为了探讨是否脯氨酸羟化酶2(PHD2)siRNA通过减少缺氧诱导因子(HIF)1的降解而减轻缺氧引起的肾小管上皮细胞凋亡。研究者构建针对人PHD2的表达质粒，将其转染到培养的人肾小管上皮细胞系(HKC)中。用RT-PCR方法观察其对PHD2表达的抑制作用。Western印迹观察HIF-1α的表达。培养的HKC细胞分为对照组、模型组和siRNA组。siRNA组经PHD2 siRNA转染后与模型组同时用抗霉素诱导，用Western印迹方法观察3组细胞HIF-1α的表达，用流式细胞仪观察3组细胞的凋亡情况。结果 经PHD2 siRNA转染的HKC细胞PHD2mRNA表达明显下调(P＜0.01)，HIF-1α蛋白表达明显上调(P＜0.05)。经抗霉素处理后，模型组和siRNA组HIF-1α蛋白表达均明显高于对照组(P＜0.01)，但siRNA组HIF-1α蛋白表达高于模型组(P＜0.05)。与模型组相比，siRNA组细胞凋亡明显减轻(P＜0.05)。可见 通过RNA干扰技术抑制PHD2的表达可以增强HKC细胞HIF-1的蛋白表达，从而增强其在缺氧条件下的抗凋亡能力。