多种生长因子分阶段诱导小鼠胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞

2006年12月04日 中华内分泌代谢杂志 2006 Vol.22 No.3 P.268-272 9 （广州）为了以一种5个阶段的诱导方法诱导小鼠胚胎干(ES)细胞分化为胰岛素分泌细胞。研究者以一种5个阶段的、包含胰高血糖素样肽1(GLP-1)、肝细胞生长因子(HGF)、神经生长因子(NGF)、β细胞素(betacellulin)、激活素A(activin A)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和尼克酰胺等7种生长因子的诱导方法诱导ES细胞30 d，应用RT-PCR、双硫腙染色和免疫组化检测胰岛素表达，以流式细胞仪检测胰岛素阳性细胞百分比，用RIA法测定培养液胰岛素水平。结果 分化细胞中可检测到胰岛素和一些其他胰岛相关基因mRNA表达。双硫腙染色和胰岛素免疫组化染色阳性.分化细胞胰岛素阳性细胞百分比为(24.0±2.5)%(n=6).在5.6 mmol/L和25 mmol/L葡萄糖浓度作用下，培养液胰岛素水平分别为(0.05±0.01)μg/L和(0.13±0.02)μg/L(n=6)。可见 应用上述分阶段诱导方法可将小鼠ES细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞，在葡萄糖作用下该细胞能释放胰岛素到培养液中，胰岛素分泌水平随着葡萄糖浓度的增高而增高。