鼓膜上皮干细胞的分布和培养

《中华耳鼻咽喉科杂志》2004年第39卷第12期 中国研究者确定了上皮干细胞在鼓膜上的分布，鼓膜穿孔后干细胞的变化，鼓膜上皮不同部位的体外培养生长特点，建立鼓膜干细胞体外培养和增殖的方法。研究者选取4只幼年Sprague-Dawley(sD)大鼠和4只成年sD大鼠，均为雌性，作正常鼓膜观察，28只成年雌性大鼠作鼓膜紧张部中央2mm穿孔。于穿孔后不同时间取鼓膜冰冻切片，进行β1整合素和角蛋白19免疫组化检测。15只成年雌性SD大鼠30个鼓膜，体外用丝裂霉素C损伤黏膜面，分成鼓环上皮和紧张部中央上皮两部分，比较鼓环和紧张部细胞倍增时间。以1h为标准，把鼓环细胞按贴壁时间分类。结果发现角蛋白19和β1整合素阳性细胞在紧张部分布于鼓环和锤骨柄区域，在松弛部散在分布，在紧张部中央无阳性细胞。幼年鼠和成年鼠无差别。紧张部急性穿孔后鼓环和锤骨柄阳性细胞数量增加，穿孔边缘无阳性染色。体外培养鼓环上皮细胞倍增时间(51．1±0．73)h明显短于紧张部中央上皮(92．87±5．65)h。1h内贴壁的细胞，生长活跃，产生较大的集落，富含上皮干细胞。由此，研究者得出结论，上皮干细胞在鼓膜紧张部分布于鼓环和锤骨柄区域，在紧张部的中央没有干细胞。在适当的培养液中，干细胞增殖良好，并可以通过贴壁时间进行初步的纯化。