小干扰RNA对人内皮细胞株类表皮生长因子域7基因表达抑制作用的实验研究

2006年12月06日 中华心血管病杂志 2006 Vol.34 No.7 P.643-646 17 （济南）为了研究小干扰RNA(siRNA)对类表皮生长因子域7(egfl7)基因表达的抑制作用。研究者利用Ambion公司设计合成的以egfl7为靶标的siRNA，通过脂质体将siRNA转入人脐静脉内皮细胞株，以未转染siRNA细胞和转染无关siRNA细胞为对照，利用MTS[3-(4，5-dimethylthiaz-2-yl)-5(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfopheny)-2H-tetrazolium，inner salt]法检测siRNA对细胞存活率的影响，同时检测乳酸脱氢酶和三磷酸腺苷，观察siRNA对细胞生长的影响，RT-PCR法检测egfl7mRNA水平的改变，Western blot检测egfl7蛋白表达的变化。结果 siRNA各组与对照组细胞存活率差异均有统计学意义(P＜0.05)，乳酸脱氢酶及三磷酸腺苷释放量差异也存在统计学意义(P＜0.01)。转染24h后，siRNA组egfl7 mRNA与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01)，同时egfl7蛋白表达也被明显抑制(P＜0.01)，其中siRNA1的抑制效率最高。可见体外转录合成的siRNA可抑制人脐静脉内皮细胞egfl7基因的表达。