J6-1白血病细胞P2X7受体基因的克隆和功能初步分析

2006年12月26日 中华血液学杂志 2006 Vol.27 No.9 P.602-605 10 （天津）为了从白血病细胞系J6-1细胞中克隆P2X7受体编码区全序列并研究其功能。研究者用RT-PCR法从J6-1细胞中扩增P2X7受体编码区全序列，克隆到一ARGET真核表达载体，并进行DNA序列分析；然后转染HEK293细胞，获得稳定表达细胞株，RT-PCR和Western blot法检测P2X7受体在HEK293中的表达,相差显微镜下观察转染细胞在激动剂刺激下膜泡的形成。结果 从J6-1细胞中克隆了P2X7受体编码区全序列，在第559位有1个A→G有义突变，导致Asn187→Asp182,J6-1细胞来源的P2X7受体可在HEK293细胞中表达，在激动剂作用下可介导膜泡的形成。可见 从白血病细胞中克隆出具有正常功能的P2X7受体编码区全序列，J6-1细胞中可能存在其它未知的机制造成P2X7受体功能丧失。