先天性无虹膜症家系的基因突变位点研究

2007年04月17日 中华眼科杂志 2006 Vol.42 No.12 P.1113-1117 8 （深圳）为了探讨先天性无虹膜症家系的基因突变位点。研究者抽取家系成员的外周血2～5 ml，提取DNA,先合成2个多态性微卫星遗传标记(D11S904 和 D11S935)的引物进行聚合酶链反应(PCR)，PCR产物变性后用变性聚丙烯酰胺(PAGE)胶分离，根据带型和家系成员间的关系进行单体型连锁分析，判断家系无虹膜表型是否与PAX6基因相关；PCR扩增PAX6基因的所有外显子，所有PCR产物分别进行单链构象多态性(SSCP)分析，通过患者与正常人带型的差异确定突变发生的外显子，对有差异SSCP带型的PCR产物进行直接DNA测序，找到突变位点。结果 该家系先天性无虹膜表型明显与PAX6基因连锁；SSCP分析PAX6基因第9外显子PCR产物，显示患者均有异常带型出现，而家系正常人均无此异常带,测序结果显示突变位点为PAX6基因第9外显子c1080核苷酸C 突变为T，使编码精氨酸的密码子突变为终止密码子。可见 PAX6基因突变可导致先天性无虹膜。