不同培养方法骨髓破骨细胞样细胞分化及活性的实验观察

2006年11月06日 中华风湿病学杂志 2006 Vol.10 No.5 P.284-287 8 （太原）为了研究不同骨髓细胞培养方法对大鼠破骨细胞样细胞(OLC)诱导分化及活性的影响。研究者大鼠骨髓细胞以巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)作用后与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)协同诱导OLC分化，采用全骨髓细胞(A组)及密度梯度离心后骨髓单个核细胞(B组)两种培养方法，通过倒置相差显微镜及细胞染色观察两组OLC分化数量的差异，通过骨吸收陷窝分析及OLC膜表面整合素β3(CD61)表达量比较两组OLC活性的差异。结果 B组培养5、7 d抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性多核OLC数量及TRAP活性均高于A组，骨吸收陷窝计数亦较A组为多，差异均有统计学意义(P＜0.01，P＜0.05)；陷窝面积比培养早期两组比较差异无统计学意义，7 d时B组大于A组，差异有统计学意义(P＜0.01)；OLC膜表面CD61表达量及平均荧光强度0及3 d时B组均较A组明显增高，随培养时间延长组间比较差异无统计学意义。可见低转速、短时间密度梯度离心后骨髓细胞培养诱导OLC分化获得的细胞数量较多且不影响其活性，是一种简便有效的OLC培养方法。