肾小管上皮细胞ATP耗竭再恢复时热休克蛋白72与Paxillin的相互作用

2006年09月26日 中华肾脏病杂志 2006 Vol.22 No.7 P.411-415 13 （广州）为了研究肾小管上皮细胞ATP耗竭再恢复时热休克蛋白(HSP)72与桩蛋白(Paxillin)的相互作用和意义。研究者应用代谢抑制剂暂时性阻断肾小管上皮细胞ATP的生成，引起细胞内的ATP耗竭；换用含10 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液，使细胞内ATP再恢复,以热处理细胞或编码HSP72 RNA的腺病毒感染细胞，诱导细胞高表达HSP72.Western印迹检测HSP72水平；间接免疫荧光和Western印迹检测Paxillin在细胞内的分布变化。免疫共沉淀观察HSP72与Paxillin的相互作用。结果肾小管上皮细胞ATP耗竭再恢复时，对照组细胞内的Paxillin由局部黏附结构区域向细胞浆内弥散分布；HSP72由细胞浆转移至细胞膜。细胞高表达HSP72后，HSP72在细胞浆和细胞膜中的蛋白含量均增加(P＜0.05)；Paxillin由细胞浆向细胞膜的转移明显减少(P＜0.05)；Paxillin在细胞内的正常分布改善；HSP72和Paxillin之间的相互作用显著增加(P＜0.05)。可见肾小管上皮细胞ATP耗竭再恢复时，HSP72可保持Paxillin在细胞内的正常分布特点和区域，其机制可能是HSP72增加与Paxillin的相互作用，发挥分子伴侣的功能。