PC-1转基因小鼠的建立及其与2型糖尿病发病的关系

2006年06月15日 中华内分泌代谢杂志 2005 Vol.21 No.6 P.554-556 11 （上海）为了探讨PC-1基因高表达与肥胖、胰岛素抵抗及2型糖尿病的关系。研究者构建pcDNA3.1/PC-1转基因质粒，经显微注射的方法获得G0代转基因小鼠；用PCR、Southern印迹、RT-PCR和Western印迹方法检测PC-1转基因小鼠的基因组整合和组织表达；对转基因小鼠进行腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT)和胰岛素耐量试验(ITT)。结果测序证明克隆的PC-1 cDNA序列与GenBank相应序列相比无误，转基因质粒中PC-1插入方向正确；鼠尾基因组DNA PCR和Southern印迹表明共获得8个PC-1转基因阳性的G0代小鼠，分别与野生型C57BL/6J小鼠交配后获得5个F1代PC-1转基因小鼠系；RT-PCR、Western印迹证实该基因在2个单系的骨骼肌和肝组织中有稳定表达,与野生型小鼠相比，转基因阳性小鼠的体重、空腹血糖、IPGTT和ITT结果无明显变化。可见成功构建稳定表达PC-1基因的转基因小鼠系，研究结果表明该基因在相关组织中的高表达不足以触发肥胖、胰岛素抵抗或2型糖尿病的发生。