大鼠角膜碱烧伤的治疗研究

2007年05月28日 中华眼科杂志 2007 Vol.43 No.2 P.134-141 医学空间（MEDcyber.com）5月28日消息，羊膜为载体的体外培养的人角膜缘上皮细胞移植可有效重建眼表，具有较高的临床应用价值与发展前景。

碱性眼化学烧伤是临床常见而处理棘手的眼外伤之一。伤后发生的无菌性角膜性角膜溃病、穿孔、眼球粘连及继发性青光眼等，更是眼部致残的常见原因。

中华眼科杂志二月第二期刊登一项研究，体外培养人角膜缘上皮细胞，通过免疫荧光染色法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分析表型，BrdU掺人法检测慢周期(slow-cycling)细胞。建立大鼠角膜碱烧伤模型，随机分为单纯对照组、羊膜移植(AMT)组及羊膜为载体的角膜缘上皮细胞移植(LSAT)组，术后通过裂隙灯显微镜观察、角膜切片HE染色及免疫荧光染色等方法对各组大鼠眼表恢复情况进行评价。研究人角膜缘上皮细胞的生物学特性，探讨体外培养的人角膜缘上皮细胞移植进行眼表重建的临床应用价值及前景。

吉林大学第一医院眼科杨威等研究人员研究显示，培养早期大多数角膜缘上皮细胞p63和K19染色阳性，仅少数细胞K3染色阳性；随培养时间的延长，K3阳性细胞增多，部分细胞同时表达p63和K3。RT-PCR示培养的角膜缘上皮细胞中p63和K12均有阳性表达，而角膜上皮细胞仅表达K12.BrdU掺入法检测到慢周期细胞。动物实验表明，LSAT可以显著减轻角膜病变，使角膜恢复完整性和透明性，眼表评分各项指标与AMT组和对照组比较差异均有统计学意义。LSAT组大鼠角膜切片染色示大部分上皮细胞抗人核和K3染色阳性。

因此可见 体外培养的人角膜缘上皮细胞中p63不仅表达于角膜缘干细胞，在短暂扩充细胞中也有一定量的表达；慢周期细胞的存在证实了培养的角膜缘上皮细胞中角膜缘干细胞的存在，p63和K19阳性、K3阴性的细胞为角膜缘干细胞；羊膜为载体的体外培养的人角膜缘上皮细胞移植可有效重建眼表，具有较高的临床应用价值与发展前景。