造血系统肿瘤WT1基因启动子区域DNA甲基化及其调控的研究

2005年11月10日 中华血液学杂志 2005 Vol.26 No.9 P.517-520 4 （苏州）为了应用聚合酶链反应(PCR)的实验方法研究白血病细胞系中WT1基因启动子区域的DNA甲基化水平，及其与WT1基因表达的关系，研究者①采用RT-PCR技术及甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR，MSP)技术检测8226、HL-60、Jurkat、KG-1及Raji等血液系统肿瘤细胞系中WT1基因mRNA表达水平及其启动子区域的DNA甲基化状态；②以5-杂氮脱氧胞嘧啶(5-aza-CdR)对U937细胞系进行去甲基化处理，并观察WT1基因表达水平的改变。结果①HL-60、K562、KG-1、NB4及SHI-1细胞系中WT1表达水平高，而8226、Jurkat、Raji、U266和U937细胞系WT1表达水平则极低，同时检测到在8226、Jurkat、Raji、U266和U937这5个细胞系存在WT1基因启动子区域DNA高甲基化；②经去甲基化处理后，U937细胞系的WT1基因表达水平较未处理者上升，同时伴随着WT1启动子区域DNA甲基化水平的下降和未甲基化水平的升高。可见 WT1基因启动子区域DNA高甲基化是抑制其表达的机制之一。