丝裂原激活蛋白激酶阻断剂与DNA甲基化酶抑制剂对人结肠癌细胞的协同影响

2006年07月12日 中华消化杂志 2006 Vol.26 No.2 P.87-91 24 （上海）为了研究细胞外信号调节激酶-丝裂原激活蛋白激酶途径(ERK-MAPK)与DNA甲基化间的关系及对结肠癌细胞生物学行为的协同影响。研究者培养人结肠癌细胞SW1116，分别以PBS、二甲基亚砜(DMSO)为对照组，PD 98059 50μmol/L、5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)5μmol/L、PD 98059 50μmol/L+5-aza-dC 5μmol/L进行药物干预，以定量RT-PCR检测DNA甲基化酶(Dnmt)1、3a和3b基因转录水平；流式细胞仪分析细胞周期；MTT测定细胞活力；光学显微镜下观察细胞形态学变化。结果 ERK-MAPK途径阻断剂PD 98059下调Dnmt 1和Dnmt 3b，Dnmt抑制剂5-aza-dC下调Dnmt 1、Dnmt 3a和Dnmt 3b，且5-aza-dC联合PD 98059对Dnmt1及Dnmt 3a mRNA的表达下调更为显著。5-aza-dC明显降低G0/G1期细胞百分比(P＜0.05)，G2/M期细胞百分比明显增加(P＜0.05)；PD 98059使G0/G1期细胞百分比降低(P＜0.05)，G2/M期增加。PD 98059明显抑制细胞生长.PD98059促进细胞分化，呈上皮样改变，细胞变狭长，胞质减少，细胞排列开始出现相对整齐；5-aza-dC干预组细胞大小不一，出现较多多倍体细胞(多个核分裂相)。可见 ERK-MAPK途径阻断剂及Dnmt抑制剂均能抑制结肠癌SW1116细胞分裂、增殖，并诱导细胞分化；两者有协同作用；ERK-MAPK信号转导途径能调控DNA甲基化水平。