西罗莫司诱导人肝癌细胞株BEL-7402凋亡及其机制

2007年03月30日 中华器官移植杂志 2006 Vol.27 No.10 P.583-586 6 （广州）为了探讨西罗莫司(SRL)在体外诱导人肝癌细胞株BEL-7402的凋亡作用及其机制。研究者以不同浓度的SRL(5、10、20、30、40和50nmol/L)作用于体外培养的人肝癌细胞株BEL-7402，应用流式细胞仪检测培养24、48和72 h时的细胞凋亡情况；Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化；Western Blot法观察BEL-7402细胞中Caspase-3、Bcl-2、Bcl-xl和Bax基因的表达变化；采用Caspase-3试剂盒检测Caspase-3酶的活性；JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位(△ψm)。结果 SRL可诱导BEL-7402细胞凋亡，并与药物浓度和作用时间呈正相关。SRL作用BEL-7402细胞后48 h，在Hoechst 33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征，凋亡过程中线粒体膜电位下降及Caspase-3酶原蛋白激活，伴有Bcl-2、Bcl-x蛋白表达的降低和Bax蛋白上调。可见 SRL能使抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl表达降低，促凋亡蛋白Bax表达上调，线粒体膜电位下降，激活Caspase-3酶原蛋白，从而诱导细胞凋亡。