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干扰RNA抑制组织因子表达对阿霉素诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡有影响

来源:医学空间
摘要:《中华血液学杂志》2007年第28卷第9期中国研究者研究了组织因子(TF)表达对阿霉素诱导人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC细胞凋亡的影响。研究者以Westernblotting法检测SK-N-MC细胞TF表达。分子生物学方法构建TFsiRNApSUPER表达载体......

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《中华血液学杂志》2007年第28卷第9期 中国研究者研究了组织因子(TF)表达对阿霉素诱导人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC细胞凋亡的影响。研究者以Western blotting法检测SK-N-MC细胞TF表达。分子生物学方法构建TFsiRNApSUPER表达载体,以脂质体介导进行基因转染。以水溶性四唑盐(WST)法检测阿霉素细胞毒性。以Western blotting法检测阿霉素诱导的caspase-3、多聚ADP核糖转移酶(PARP)的活化水平。以Hochest33342染色,荧光显微镜下检测凋亡细胞。结果发现①SK-N-MC细胞高表达TF;②转染TF siRNA-pSUPER表达载体的SK-N-MC细胞,TF表达水平呈剂量依赖性降低;③转染TF siRNA-pSUPER的SK-N-MC细胞及转染pSUPER质粒的对照细胞分别以不同浓度阿霉素处理24h,前者与后者相比存活细胞数显著降低;④转染TFsiRNA.pSUPER的SK-N-MC细胞及转染pSUPER质粒的对照细胞分别以阿霉素处理4、8h,可见前者较后者caspase-3、PARP活化增强;⑤转染TFsiRNA-pSUPER的SK-N-MC细胞与对照细胞相比,经阿霉素处理后的凋亡细胞数显著增多(P〈0.05)。由此,研究者得出结论,人神经母细胞瘤SK-N-MC细胞中TF异常高表达,以siRNA特异性下调TF表达后,可增强阿霉素细胞毒性及其诱导的肿瘤细胞凋亡。肿瘤细胞中TF的异常高表达可能参与阿霉素诱导凋亡的调控。
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