反相高效液相色谱法测定布洛芬混悬液中布洛芬含量

摘要 目的：用反相高效液相色谱法测定布洛芬混悬液中布洛芬的含量。方法：采用Nova-pak C18柱(3.9mm×150 mm，4μm)为分析柱，甲醇-水-冰醋酸(80：20：1)为流动相，流速为lmL／min，检测渡长为220nm，柱温为25℃。结果：布洛芬在40～l20μg／mL范围内浓度与峰面积线性关系良好，回归方程为A=2.521×10000000C+8.289×1000，r=0.9999，平均加样回收率为99.84％，RSD为0.33％。结论：反相高效液相色谱法简便、准确，可用于布洛芬混悬液的质量控制。
关键词：高效液相色谱法；布洛芬混悬液；含量测定
布洛芬(Ibuprofen，IBF)混悬液是临床常用的解热镇痛药，疗效确切，给药剂量易于控制，且具有水果香气、甜味和鲜艳的颜色，易为儿童接受，特别适合儿科使用。《中国药典》采用中和法测定IBF原料及片剂含量⋯，笔者采用反相高效液相色谱法测定了IBF混悬液中IBF含量，现报道如下。
1 仪器与试药
Waters高效液相色谱仪(包括600四元梯度泵、在线脱气机、柱温箱、996二极管阵列检测器、Millennium32色谱工作站)；MettlerAE240电子分析天平(瑞士)。IBF对照品中国药品生物制品检定所，批号为：0179—9702；IBF混悬液(江苏恒瑞医药股份有限公司，批号为2000309l9，200310l8，2003l122)。
2 方法与结果
2．1 色谱条件及系统适应性
色谱柱：Nova-pak Cl8柱(3.9mm×150mm，4μm)；流动相：甲醇-水-冰醋酸(80：20：1)；检测波长：220nm；流速：1mL／min；柱温：25℃。IBF保留时间为4.6min，理论塔板数按IBF计算不低于l200。
2．2 对照品溶液的配制
精密称取经五氧化二磷干燥器减压干燥至恒量的IBF对照品适量，用60％甲醇配成IBF浓度为80μg／mL的对照品溶液。
2．3 线性关系考察
精密称取IBF对照品25mg，置25mL量瓶中，加甲醇15mL使溶解，加水至刻度摇匀。精密吸取该溶液1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 mL置25 mL量瓶中，用流动相定容，得到IBF浓度为40，60，80，100，120μg／mL的系列标准溶液。分别取l0μL进样，以IBF峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归，得回归方程A=2.52l×l0000000C+8.289×l000，r=0.9999，n=5。结果表明IBF在40～120μg／mL范围内浓度与峰面积线性关系良好。
2．4 样品含量测定
取IBF混悬液，摇匀，精密吸取5mL(约相当于IBF100mg)，置100mL量瓶中，加60mL甲醇，振摇使IBF溶解，加水至刻度，摇匀。精密吸取该溶液2.0mL，置25mL量瓶中，用流动相定容，吸取l0μL进样。另取浓度为80μg／mL的IBF对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算含量。测得3批样品批号分别为20030919，20031018，
20031122的IBF含量分别为98.56％，99.21％，99.83％。
2．5 加样回收试验
取已知含量的IBF混悬液样品，按2．4项下方法配成IBF浓度为160μg／mL的稀释液。取浓度为80μg／mL的IBF对照品溶液，用流动相分别稀释成l0，20，40，60，80μg／mL 5个浓度的溶液，分别取5个不同浓度的IBF对照品溶液，与IBF混悬液(已知含量)的稀释液(160μg／mL)等量混合，按2．4项下方法测定，计算IBF的加样回收率。
2．6 干扰试验
按IBF混悬液处方配制不含IBF的空白混悬液，按2．4项下方法操作。结果表明处方中辅料对IBF测定无影响。
2．7 精密度试验
取IBF对照品溶液(80μg／mL)10μL进样，重复测定6次，测得IBF峰面积的RSD为0.26％ 。
2 8 重复性试验
取同一份样品，按2．4项下方法测定IBF含量，平行测定6次，样品含量测定结果的RSD为0.47％．
2 9 稳定性试验
取样品溶液按2．4项下方法操作，对样品稀释液在不同时间进样分析。结果稀释液在72h内稳定，RSD为0.59％。
3 讨论
在图所示的标样色谱图上，使用Millennium 色谱软件提取IBF色谱峰的扫描光谱图(210～350nm波长)，结果显示IBF在200nm和264nm均有最大吸收，但两波长处的灵敏度相差较大，220nm处的最低检测浓度是264nm处的20倍(分别为lμg／mL和0.05μg／mL)，为提高检测的灵敏度，故选择220nm作为检测波长。IBF混悬液的部颁标准也是采用高效液相色谱法，其检测波长为264nm，灵敏度较本法偏低。本法具有操作简便、专属性强、灵敏度高、测定结果不受辅料影响等特点，适合用于IBF混悬液的质量控制。
参考文献：
[1]国家药典委员会，中华人民共和国药典(二部)[M]．北京：化学工业出版社．2000：121．
[2]WS-329(X-257)-98，中华人民共和国卫生部标准(试行)[S]。