|
摘要目的：用液液萃取法从复方中药戒毒制剂康灵片中提取分离出微量东莨菪碱，并采用气相色谱(GC/FID)内标法测定东莨菪碱含量。
方法:用Untrl1(HP)SE-30毛细管柱(25m×0.22mm，0.33μm),柱温为250℃,检测器为FID.
结果:东莨菪碱的回收率为97.97%,RSD为1.8%。
结论:方法灵敏度高，测定结果准确可靠。
关键词 毛细管气相色谱法 东莨菪碱
Determination
of Scopolamine in Chinese Herbal Medicine for
Detoxification (Kangling Pian) by HPLC Li Yongqing,Zhao
Wen and Zhu Jihong
(National Institute for Control of Pharmaceutical and Biological
Products, Beijing 100050) AbstractObjective：This paper reports the method of the separation of subtle
scopolamine from Chinese herbal medicine for detoxification by liquid-liquid
extraction and the determination of scopolamine by GC/FID with atropine
sulfate as internal standard.
Methods:In the method, Untrl1 (HP) SE-30
column (25 m×0.22 mm，0.33 μm) and FID detector are used with atropine as the internal
standard and column temperature is 250 ℃.
Results:The average recovery is 97.97%,RSD
is 1.8%.
Conclusion:The method is accurate and reliable.
Key words GC/FID, scopolamine 东莨菪碱属抗胆碱药，具有止咳平喘的功效，是中药洋金花中主要有效成分。戒毒药康灵片是以洋金花为主药与其它10多味中药配伍组成复方制剂，为阿片类滥用药物成瘾脱瘾的治疗用药，具有一定的疗效。东莨菪碱属麻醉性药物，而且毒性较大，中国药典规定限量使用,康灵片中虽每片含量甚微（约0.1mg每片），但治疗剂量大（30片每日）。为了保证用药的安全有效，必须准确测定东莨菪碱的含量以控制康灵片的质量。 1 仪器与试药
1.1 仪器
GC-14B气相色谱仪，C-R7A积分仪(日本岛津）。LE-131型薄膜蒸发仪,KQ-150型超声波清洗器。
1.2 试药
氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品化学对照品（本所提供），氯仿、甲醇、碳酸氢钠、氯化钠试剂均为分析纯。康灵片(甘肃省平凉制药厂提供，批号为950501、950502、950503)。 2 色谱条件
色谱柱：SE-30键合石英毛细管柱（25m×0.2mm，0.33μm）；检测器：FID，氢气50mL.min-1，空气500mL.min-1，尾吹气40mL.min-1；载气：氮气，流速1mL.min-1,分流比1/50；柱温：250℃；进样器/检测器温度：280℃。 3 样品分析
3.1 线性范围
精密称取氢溴酸东莨菪碱适量，用内标溶液溶解，配制成每毫升中约含1.3mg的溶液，作为储备液，分别吸取储备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL,于5mL量瓶中，加内标液稀释到刻度，摇匀，测定时进样4μL。利用氢溴酸东莨菪碱与硫酸阿托品峰面积的比值，对氢溴酸东莨菪碱的进样量计算回归方程，结果为: Y＝1.3661X+0.03797 r=0.9991 进样量在1.04～5.20μg范围内呈良好的线性关系。
3.2 加样回收率测定
采用在已知含量的康灵片中加入氢溴酸东莨菪碱的方法测定回收率。精密称取康灵片粉约1g，加0.208mg.mL-1氢溴酸东莨菪碱的甲醇溶液1.0mL，挥干甲醇，照样品分析法操作，测得平均回收率为97.97%,RSD为1.8%，n=5。
3.3 供试品溶液制备
精密称取剥去糖衣并研细的康灵片粉约1g于100mL磨口锥型瓶中，准确加稀盐酸50mL，密塞，置超声波清洗器内，超声30min，离心，准确吸取上清液5.0mL于分液漏斗中，加10%碳酸氢钠溶液调pH约为7，用氯仿提取2次，每次用量20mL，合并有机层，用饱和氯化钠溶液2mL洗1次，氯化钠液用氯仿10mL回提1次，合并有机层，通过无水硫酸钠滤过，减压蒸干，残留物加含有内标物的甲醇溶液0.5mL溶解，摇匀，即得。
3.4 内标液的制备
称取硫酸阿托品，用甲醇配制成每1mL含硫酸阿托品约0.2mg的溶液即得。
3.5 对照品溶液的制备
精密称取氢溴酸东莨菪碱约5mg，用稀盐酸溶解并定容于25mL量瓶中，摇匀，
准确吸取2mL于分液漏斗中，加稀盐酸3mL，摇匀，按供试品溶液制备法，从“加10％碳酸氢钠”起操作即得。
3.6 样品测定
分别吸取对照品溶液及供试品溶液各4μL注入气相色谱仪，测定，计算康灵片中东莨菪碱的含量（图谱见图1-A）。3批样品含量(以东莨菪碱计)分别为0.099%、0.093%、0.095%(n=2)。 |