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黄连黄连素薄层层析鉴别方法及条件探讨

来源:网上搜集
摘要:提要列举了不同制剂中黄连、黄连素薄层层析(TLC)鉴别方法及条件,为令后在制剂中有效成分黄连青的分析及测定提供参考。黄连来源于毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch、三角叶黄连CoptisdeltoideaC.Y.ChengetHsiao或云连CoptisteetaWall.的干燥根茎。黄连古多种生物碱成分,黄连索为其重要的化学成分之一。......

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提要 列举了不同制剂中黄连、黄连素薄层层析(TLC)鉴别方法及条件,为令后在制剂中有效成分黄连青的分析及测定提供参考。
    黄连来源于毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch、三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。性苦寒,归心、脾、胃、肝、胆、大肠经,为常用清热燥湿、泻火解毒药。黄连古多种生物碱成分,黄连索为其重要的化学成分之一。TLC鉴别方法在中药制剂中常用于黄连的定性检验,但因中药剂型与制剂较多,黄连应用广泛,定性检测方法也有不同,为了便于查阅与选择.觋将黄连索的TLC鉴别方法及条件选择摘录如下。
    1 方法
    取黄连粉束50mg.加甲酵5ml,承褡回流15min,滤过,滤液补甲酵使成5 ml.供试.盐酸小檗碱对照品制成量含0.5 mg/ml的溶液。点样各1μL,以荤-醋酸乙酯-甲酵-异丙酵-水(6:3:1.5 : 1.5: 0.3)为展开剂.并置蒸气饱和的层析缸内展开.紫外灯(365nm)下,检视黄连、黄连素的黄色黄光斑点。
    取黄连养肝丸10g.剪碎,加硅藻土15g.研碎,加甲酵30ml,滤过,滤液作供试品溶液。另取黄连药材O.1g,加甲酵l0ml,超声处理15min,滤藏为对照药材溶液。上两种溶液各点样l0μL于硅胶G 薄层板上,以苯-醋酸乙醇:甲酵:异丙酵-浓氨试藏(12:6:3:31)为展开剂.置氨蒸气预饱和15min的层析缸内展开,置紫外灯(365nm)下.检视与对照药材色谱相应位置上的黄色荧光斑点.
    取小儿暑感宁糖浆3O m1.用乙酸乙醇萃取2次,20 ml/次,合并萃取液,挥干,残渣加O.5 ml溶解为供试液。另取盐酸小檗碱加乙醇制成含量lmg/ml的溶藏.为对照品液。取样品液5μl,对照品藏1~2μl.点于同一硅胶G薄层板上,以正丁酵-冰醋酸-水(7:l:2)为展开剂展开,置紫外光灯(365nm)下观察,用于检视黄连、盐酸小檗碱(黄色荧光斑点)。
    取葛根芩连胶囊2粒.加术l00 ml,煮沸30min,滤取上清液l0ml.水浴蒸干,残留物用5ml甲醇溶液滤过,得供试品液。取黄连素以甲醇配制lmg/ml的溶液为对照品藏。用硅胶G-CMC板.以乙酸乙酯-丁酮-醋酸-水(10:7:5:3)为展开剂展开,喷以改良碘化铋钾溶被.置紫外灯(365nm)下观察,以检视黄连、黄连素黄绿色荧光斑点。
    取复方黄连索片5片.去糖衣研细,取粉末约1g,加甲酵索氏提取至近无色.为供试品液。另取盐酸小檗碱配成l mg/ml的溶液为对照品溶液。两溶被各取2μl点于硅胶G-CMC扳上,以正丁醇-冰醋酸-水(7:l:2)为展开剂,日光下检视黄连、盐酸小檗碱(黄色斑点):紫外灯(254nm或365nm)下检视小檗碱(黄绿色荧光斑点) 。
    取香连九60mg,研碎,加甲醇5ml,水浴加热提取15min滤过.滤液补加甲醇使成5ml为供试藏。另取小檗碱以甲醇制成O.5 mg/ml的溶液为对照品液。各点样lμl于同一硅胶G薄层板上,以苯-醋酸乙醇-甲酵-异丙酵-浓氨试液(6:3 :1.5 :1.5:O.5)为展开剂展开,置紫外灯(365nm)下观察,检视黄连、小檗碱(黄色荧光斑点)。
    取导赤丸l丸,剪碎,加硅藻土1g,研匀,置具塞三角瓶中.加甲醇lOml冷浸lh,滤过,滤液为供试品液。另取盐酸小檗碱以甲醇配成每O.5 mg/ml的溶液为对照品溶液 点样品液2~ 3μl,对照品液10μl于同一硅胶G 薄层板上,以正丁醇-冰醋酸一水(7:1:2)为展开剂,展开.置紫外灯(365nm)下观察,检视黄连中小檗碱(黄色斑点)。
取朱砂安神丸10g,8O℃下干燥,研细,加乙醇回流lh.滤过,滤液浓缩至lml.为供试品液。另取盐酸小檗碱,用适量乙醇溶解,点样2μl于同一硅胶G薄层板上,以正丁酵-36% 醋酸-水(7:2:1)为展开剂展开,于紫外灯(254nm)下观察,用于检视黄连中小檗碱(黄绿色荧光斑点)。
    取黄连解毒汤粉末4.5g置锥形瓶中,加木30ml,加热30min,滤过,滤液蒸干残渣加甲醇2Oml溶解,作供试品藏。取黄连药材2g,置锥形瓶中,以下同上述方法制备对照药材溶藏。吸取上述各滤液lOμ1,点于同一硅胶GF254.薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水(7:2:1)为展开剂展开.于紫外灯(254nm)下观察,用于检视黄连中小檗碱(黄绿色荧光斑点)。
    取黄连解毒汤粉末4.5g置锥形瓶中,加水30ml加热3Omin,滤过.滤液蒸干残渣加甲醇2Oml溶解,作供试品藏。取黄连药材2g,置锥形瓶中,以下同上述方法制备对照药材溶液。吸取上述各溶液l0μ1,点于同一硅胶GF254.薄层板上.以正丁醇-冰醋酸-水(7:l:2)为展开剂展开,置(365nm)紫外灯下,检视黄连中的黄色荧光斑点。
薄层层析法l将样品的甲酵提取液点于硅胶G板上.以苯-乙酸乙醇-甲醇-异丙醇浓氨试液(12:6:3:3:1)展开,(须先用氨蒸汽饱和),紫外灯(365nm)下检枧,黄连、小檗碱呈黄色荧光斑点。
    薄层层析法2 将样品的甲酵提取藏点于硅胶G板上,以氯仿-甲醇-氨水(15:4:1)展开,天然光下小檗碱呈黄色,紫外光(254 m)下显亮黄绿色斑点。用改良碘化铋钾试藏显色,斑点显红色 。
    2 小结
    综上有关黄连的TLC方法及条件,可见制剂不同,方法有别在应用中.可根据实际状况及所具备的条件,进行取样、展开剂等灵活选择。使TLC方法更方便的为黄连质量检测服务,使中药质量跨上新的台阶。

作者: 2008-3-21
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