FL2200在液态奶中三聚氰胺检测的应用

摘要：本文采用浙江福立分析仪器有限公司生产的FL2200高效液相色谱仪对液态奶中的三聚氰胺进行检测，建立了液态奶中三聚氰胺的高效液相色谱法，最小检测浓度达0.004mg/L，回收率在90.5%～98.7%之间，峰面积的RSD为0.100% ，有良好的线性关系（r=0.9993），具有快速、准确、高效的特点。

      三聚氰胺，简称三胺，分子式C3N6H6，是一种重要的氮杂环有机化工原料。由于三聚氰胺分子中含有大量氮元素，而普通的全氮测定法测液态奶和食品中的蛋白质含量时不能排除这类伪蛋白氮的干扰，因而一些厂商为了能低成本而添加这种化工原料，以提高产品中蛋白质含量。《国际化学品安全手册》第三卷和国际化学品安全卡片说明：长期或反复大量摄入三聚氰胺可能对肾与膀胱产生影响，导致产生结石。奶粉中相继查出含大量的三聚氰胺，不由让我们对液态奶中是否含有三聚氰胺，产生质疑。本文采用浙江福立分析仪器有限公司生产的FL2200高效液相色谱仪建立液态奶中三聚氰胺快速、准确的检测方法。

1、 材料和方法
1.1 主要仪器和试剂
      FL2200高效液相色谱仪；
      高速离心机；
      超声波震荡仪；
      涡旋混合器；
      分析天平（万分之一）；
      溶剂过滤器（带0.45um有机、水系过滤膜和真空泵）；
      乙腈（HPLC级）；
      三聚氰胺（≥99.0%）；
      柠檬酸（分析纯）
      庚烷磺酸钠（色谱级）
      水（二次蒸馏水以上）

1.2 色谱条件：
      色谱柱  Venusil ASB C18 4.6*250mm 5um
      流动相  乙腈：10mM/L柠檬酸+10mM/L庚烷磺酸钠缓冲液=5：95（pH=3）
      检测波长 240nm
      柱温  30℃
      流速 1ml/min
      进样量 20uL

2、实验部分
2.1标样测定
      三聚氰胺标准溶液：称取三聚氰胺标样10.0mg ，加稀释液（稀释液为乙腈：水=76：24）溶解定容100ml，即得浓度为100mg/L三聚氰胺标样溶液。将浓度为100mg/L的三聚氰胺标准溶液分别用水稀释成浓度为1mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L、50mg/L的标准溶液，过0.45um过滤头过滤，保存待测。
2.1.1 重复性
      取浓度为10mg/L的标准溶液，重复进样5次，可得如下表

表1 浓度为20mg/L的重复性

图1  浓度为10mg/L的标准溶液谱图

2.1.2 线性实验
      取浓度为1mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L、50mg/L的标准品分别作样，并计算线性范围。

图2 三聚氰胺线性曲线

      可得：W=-1.84963E-5+2.33744E-10*A；R2=0.99935
      实验表明：三聚氰胺在1.0-50.0mg/L间，有良好的线性。
2.1.3 三聚氰胺最小检测浓度
      三聚氰胺的最小检测浓度为0.004mg/L

图3 三聚氰胺的最小检测浓度

2.2空白实验        
      称取2ml水于10ml具旋盖的塑料离心管中，加入5ml乙腈水（1：1），在旋涡混合器上混匀5min，超声波震荡30min，再在旋涡混合器上混匀5min，离心20min（10000r），取出上清液过滤，移取2ml，加入6ml 二次蒸馏水，混匀，过0.45um过滤头过滤后进样分析，无峰。

2.3 样品前处理
      随机抽取市面上的液态奶饮料，进行处理分析，得到以下图谱。

表2 六家厂家某批次液态奶中的三聚氰胺的含量

2.4 回收率实验  
      称取2ml液态奶样品于10ml具旋盖的塑料离心管中，分别加入浓度为10mg/L三聚氰胺标准溶液1ml、2ml、3ml；分别加入浓度为20mg/L三聚氰胺标准溶液1ml、2ml、3ml；分别加入浓度为30mg/L三聚氰胺标准溶液1ml、2ml、3ml，然后分别加入乙腈-水溶液（1：1），在旋涡混合器上混匀5min，超声波震荡30min，再在旋涡混合器上混匀5min，离心20min（10000r/min），取出上清液过滤，移取2ml，加入6ml 二次蒸馏水，混匀，过0.45um过滤头过滤后分析。
表3 回收率实验表
3、 实验结果
      试验证明：采用浙江福立分析仪器有限公司生产的FL2200高效液相色谱仪测定液态奶中的三聚氰胺，具有检测浓度低、精密度高、线性范围好和回收率高等优点，完全符合分析要求，适合食品中三聚氰胺的快速检测。