点击显示 收起
侧柏叶为柏科植物侧柏[Platycladusoriontalis(L·)lfFranco]的干燥枝梢及叶Ⅲ，具有凉血止血的功效，临床常用于止血、镇咳、祛痰和抗结核。本实验使用磷钼钨酸一干酪素比色法，利用鞣质在碱性溶液中将磷钼钨酸还原，产生深蓝色，其吸收度与含量成正比，采用比色法测定，以没食子酸为对照品，测定总酚和不被干酪素吸附酚的含量，二者之差即为鞣质的含量。
1实验材料
1．1仪器
岛津uv一2400紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)；Uv一2401PC紫外扫描仪、KQ-500B超声仪(昆山市超声仪器有限公司)；万能粉碎机(天津泰斯特)。
1．2试剂
钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂、无水碳酸钠、磷酸、盐酸均为分析纯；干酪素(生化试剂)；没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号110831-200302)：其它试剂均为分析纯。
1．3药材
侧柏叶生品购白南京市药材公司，并经我校中药鉴定教研室吴启南老师鉴定；炭品根据药典炒炭方法炮制而成。
2方法与结果
2．1测定波长的选择
取对照品总酚和不被吸附的酚比色液，在400～900nm波
长处测定，结果3种比色液均在760nm处有最大吸收，因此，确定测定波长为760nm。
2．2供试品溶液制备方法选择
因鞣质受热不稳定，故不选加热回流提取，采用冷浸过夜超声提取，且操作简单。
2．3干酪素用量选择
参照2005版《中华人民共和国药典》，选用600mg的干酪素可基本吸附完全。
2．4对照品溶液的制备
精密称取没食子酸50．02mg，置i00mL的棕色容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取5mL置50mL棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得每1mL含没食子酸0．05002mg。
2．5供试品溶液的制备
取药材粗粉10．Og，精密称定，置250mL棕色量瓶中，加水150mL放置过夜，超声处理10min，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，静置(使固体物沉淀)，滤过，弃去初滤液50mL，精密量取续滤液20mL，置100mL棕色量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，静置，即得。2．6标准曲线的制备
精密量取对照品溶液0．5、1．O、2．O、3．O、4．0mL，分别置25rIlL棕色量瓶中，各加入磷钼钨酸溶液1mL，再分别加水11．5、ll、10、9、8mL，用29％碳酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min，以相应的试剂为空白，照紫外可见分光光度法在760nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。回归方程为：Y=O．2109X--O．1425，r=O．9994。