高效液相色谱法测定氟康唑滴眼液的含量

　　氟康唑(Fluconazole，FCZ)为第三代抗真菌药物^［1］。其滴眼液在临床应用中对真菌性角膜炎有较好的疗效^［2，3］。氟康唑的含量测定方法有高效液相色谱法^［4］等，我们采用反相高效液相色谱法^［4］，以氢化泼尼松为内标物，对氟康唑滴眼液含量进行测定，结果准确可靠。

1　仪器与试药
岛津LC—5A高效液相色谱仪，SPD—2AM可调波长紫外检测器，C—R3A色谱数据处理机，美国Rheodyne 7125进样阀。
氟康唑对照品(含量99.9%，中国大连辉瑞制药有限公司提供)，甲醇(分析纯，北京化工厂)，水(重蒸去离子水)，氟康唑滴眼液(河南医科大学药物研究所提供，处方：氟康唑5.0 g，氯化钠8.5 g，聚维酮50.0 g，加注射用水至1000mL，批号：970617、970619、970621)。

2　实验方法与结果
2.1　色谱条件　
色谱柱：Spherisorb C₁₈不锈钢柱(5 μm,4.6 mm×150 mm，大连依利特公司)，流动相：甲醇-水(63∶37)，流速：0.9 mL^.min^-1，柱温为室温，检测波长：261 nm，灵敏度：0.16 AUFS，氟康唑、氢化泼尼松保留时间分别约为2，4 min。分离色谱图见图1。
2.2　线性试验　
精密称取氢化泼尼松10 mg， 置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，即得内标溶液；精密称取氟康唑对照品适量，加流动相稀释成2 mg^.mL^-1的溶液，即得对照品贮备液。精密量取对照品贮备液1，2，5，10，15，25 mL，分别置100 mL量瓶中，各精密加入内标溶液10 mL，用流动相稀释至刻度，摇匀，进样20 μL，以样品峰面积与内标峰面积之比Y对样品浓度X(mg^.mL^-1)作图，得回归方程为：

Y=6.102X-0.004 4　r=0.999 9　n=5

图1　色谱图
1.氟康唑　2.氢化泼尼松

2.3　校正因子的测定　
精密量取对照品贮备液5 mL，置50 mL量瓶中，精密加入内标溶液5 mL，加流动相稀释至刻度，摇匀，进样20 μL，记录峰面积，计算校正因子为1.500，RSD=0.4%(n=5)。
2.4　加样回收率试验　
按处方比例配制氟康唑滴眼液9份，3份作样品含量测定，3份测定时分别加入对照品贮备液1 mL，3份测定时分别加入对照品贮备液5 mL，按样品测定项下进行操作，计算回收率为99.01%～99.42%，RSD小于0.7%。
2.5　样品测定　
精密量取氟康唑滴眼液(5 mL∶25 mg)2 mL，置50 mL量瓶中，精密加入内标溶液5 mL，加流动相稀释至刻度，摇匀，依法测定，结果见表1。

表1　样品测定结果(n=3)

样品批号

含量/%

RSD/%

970617

105.6

0.4

970619

104.9

0.4

970621

105.3

0.3

3　讨论
3.1　本文选择内标时，曾考察了氢氯噻嗪、氢化可的松、邻苯二甲酸氢钾、醋酸泼尼松，最终确定氢化泼尼松作内标物。
3.2　流动相配比以甲醇-水(63∶37)为最佳，增加甲醇量，样品与内标物分离不好，增加水量则内标物保留时间迅速延长，且峰发生扩散。
3.3　流动相配制的氟康唑对照品溶液，置岛津UV—260分光光度计上，在200～400 nm波长范围扫描，结果在261 nm波长处有最大吸收，故本文检测波长选用261 nm。
3.4　供试品溶液在10 h内重复进样，样品与内标峰的保留时间、峰面积基本不变，溶液稳定。

作者单位:河南省药品检验所 郑州450003

参考文献
1　Grant SM, Clissold SP. Fluconazole, a review of pharma- codynamic and pharmacokinetic properties, and therapeutic potential in superficial and systemic mycoses. Drugs, 1990, 39(6):877
2　陈祖基.三唑类抗真菌药及其在眼科的应用.国外医学眼科学分册，1994，18(5)：257
3　丁丽远，黄松春，王凤.氟康唑局用治疗霉菌性角膜炎.中国实用眼科杂志，1995，13(7)：442
4　白林，张志萍，陈秀兰等.高效液相色谱法测定氟康唑血药浓度.药物分析杂志，1994，14(2)：22

收稿日期:1998-09-16