反相高效液相色谱法测定萘丁美酮及其片剂

　　萘丁美酮，原名萘普酮(Nabumetone, NAB)，化学名为4-(6-甲氧基-2-萘基)2-丁酮，是一种非甾体消炎、镇痛解热药^［1］，用于治疗类风湿性关节炎、骨关节炎、扭伤、肩周炎、神经痛、牙痛，尤其手术后镇痛效果更佳。萘丁美酮含量测定法国内报道了盐酸羟胺法、紫外分光光度法、重量法^［2］、正相高效液相色谱法^［3，4］和气相色谱法^［5］等，反相高效液相色谱法未见报道。

1　仪器与药品
美国SP—8800液相色谱仪，Spectra—100紫外检测器，SP—4400积分仪。萘丁美酮对照品(含量100.0%)、萘丁美酮原料及片剂分别由江西黎明制药厂、江西康明制药公司、四川西南合成制药公司提供；醋酸强的松(含量99.5%)由江西国药有限责任公司生产。甲醇为色谱纯，水为双蒸馏水。

2　色谱条件
色谱柱：Zorbax ODS 4.6 mm×25 cm， 5 μm；流动相：甲醇-水(60∶40);流速：1.0 mL^.min^-1，检测波长：261 nm，进样量：10 μL。色谱图见图1。

图1　色谱图
1. 6-羟基-2-萘乙酮　2.内标　3. 6-甲氧基-2-萘乙酮　4.萘丁美酮

3　内标及对照品贮备液的配制
精密称取醋酸强的松适量，加流动相制成约0.5 mg^.mL^-1的溶液，作为内标贮备液；取经真空干燥至恒重的萘丁美酮对照品适量，精密称定，加流动相超声溶解并定量稀释制成约0.5 mg^.mL^-1的溶液，作为对照品贮备液。

4　线性关系的考察
精密吸取萘丁美酮对照品贮备液2，4，6，8，10 mL，分别置50 mL量瓶中，准确加入内标贮备液3 mL，用流动相定容，摇匀后各进样10 μL，重复2次，以对照品浓度C(μg^.mL^-1)及对照品与内标物面积比的平均值Y求得标准曲线方程：

Y=1.855 7C-0.022 59　r=1.000

线性范围为20～100 μg^.mL^-1。

5　精密度试验
精密吸取萘丁美酮对照品溶液(40 μg^.mL^-1)重复进样5次，峰面积积分值的RSD为0.4%。

6　片剂回收率试验
精密称取已知含量样品(批号：960402)约0.012 g(约相当于萘丁美酮0.01 g)共5份，置50 mL量瓶中，分别加入萘丁美酮对照品10 mg，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，精密量取续滤液5 mL和内标贮备液3 mL置50 mL量瓶中，用流动相定容，照含量测定项下方法，测定平均回收率为100.4%，RSD为0.4%，n=5。

7　含量测定
原料：精密称取本品约20 mg，置50 mL量瓶中，加流动相超声溶解并定容，精密量取5 mL与内标贮备液3 mL置50 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，进样10 μL，记录峰面积，按内标法计算含量。结果见表1。

表1　7批原料含量测定结果(n=4)

批号

含量/%

RSD/%

9707001

100.1

1.1

9707002

100.1

0.3

9707003

100.8

0.5

980301

99.4

1.2

980302

100.2

0.2

980303

99.6

1.1

870000

97.6

0.4

　　片剂：取本品10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约相当于萘丁美酮20 mg)，加流动相超声溶解并定容，过滤，精密量取续滤液5 mL，余同原料的含量测定方法。结果见表2。

表2　3批片剂含量测定结果(n=4)

批号

标示量%

RSD/%

960402

92.7

0.2

970215

101.9

1.6

971016

97.4

0.5

8　讨论
萘丁美酮的合成过程中，可能存在以下杂质，6-羟基-2-萘乙酮(AHN)、6-甲氧基-2-萘乙酮(AMN)、4-(6-甲氧基-2-萘基)-4-羟基-丁-3-烯-二酮(MNB)，结构中均含萘乙酮与二酮，可与盐酸羟胺反应，对盐酸羟胺法有干扰；它们与萘丁美酮有相同的最大吸收波长，吸收系数却大得多，萘丁美酮E^1%_1cm为255，AMN为1.86×10⁶，AHN为1.45×10⁶，对紫外分光光度法测定也有干扰。据测定，当有关物质为3.1%时，用紫外分光光度法的对照品比较法测得的含量为102%，而本法测定为97.6%，它是因为用反相高效液相法测定时，样品主峰与杂质峰分离，排除了干扰。
本法适应性广，色谱条件简单，内标物易得，避免了正相色谱对色谱柱和流动相的较高要求。作为萘丁美酮及其片剂的质量控制，可消除杂质的干扰，方法准确快速，重现性好。

作者单位：江西省药品检验所 南昌330046

参考文献
1　Boygle E A, Freeman P C, Mangan F R, et al. Nabume-tone: a new antiinflammatory agent. J Pham Pharmacology, 1982, 34:562
2　吴联奎，武秀英，黄慧敏等.萘丁美酮分析方法的研究.江西药学，1993，1(1)：41
3　陈新菊，吴联奎.高效液相色谱法测定萘丁美酮及其片剂的方法研究.江西药学，1995，3(2)：13
4　BP addenum 1997. 1808
5　李平，宁雅君.气相色谱法测定萘丁美酮及其制剂的含量.药物分析杂志，1993，13(2)：96

收稿日期:1998-11-10