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摘要 目的：建立人血浆中奥美拉唑的高效液相色谱测定法，以测定志愿者口服2种奥美拉唑制剂后的血药浓度，并对2种制剂的生物等效性进行评价。
方法：血浆中加入内标尼美舒利后，以乙醚提取，进行高效液相色谱法检测。色谱柱为Hypersil
ODS2 20 cm×4.6 mm,5 μm，流动相为甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(60∶40∶0.5∶0.5)，流速1mL.min-1，检测波长为302 nm。12名健康志愿者随机分成两组，分别服用2种奥美拉唑制剂，人体实验方案采用双交叉实验设计法。
结果：本测定方法的提取回收率为87.02%～98.07%，血浆中奥美拉唑的最低检出浓度为3
ng.mL-1，线性范围为5～1
800 ng.mL-1。用本法测定了12名志愿者随机交叉口服单剂量40
mg洛赛克胶囊和奥美拉唑肠溶片后血浆中奥美拉唑的浓度经时变化过程，并对其药动学参数进行估算。
结论：用本法测定人血浆中奥美拉唑浓度结果满意。奥美拉唑体内过程符合一室模型，统计学结果表明2种制剂吸收程度相近。
Determination
of Omeprazole and Its Pharmacokinetics in
Human Plasma
by an Improved HPLC Method Ding Li,Yang
Jing,Yan Huali,Zhang Zhengxing and An Dengkui
(Department of Pharmaceutical Analysis,China Pharmaceutical University,Nanjing
210009) AbstractObjective：To develop an HPLC method for the study of pharmacokinetics
and bioavailability of two omeprazole formulations in human body.
Methods:After adding the internal standard
nimesulide,the plasma samples were extracted with ethyl ether and
determined by HPLC.Chromatography was performed on a Hypersil ODS2
column(20 cm×4.6 mm,5 μm)with methanol-water-acetic acid-triethylamine(60∶40∶0.5∶0.5)as
the mobile phase.The flow rate of mobile phase was 1 mL.min-1.The
detection wavelength was 302 nm.The plasma concentration of omeprazole
was determined by this HPLC method following a single oral dose
of 40 mg of two omeprazole formulations given to each 12 volunteers
in an open randomized two-way crossover design.
Results:The extraction recovery of this
method ranged from 87.02% to 98.07%.The concentration detection
limit of omeprazole in human plasma was 3 ng.mL-1.The linear range was from 5～1 800 ng.mL-1.The
pharmacokinetics and relative bioavailability of the two formulations
were determined by this method.
Conclusion:The established HPLC method was
proved to be a good method for the determination of omeprazole in
human plasma.The plasma concentration-time curve of two formulations
conformed to one compartment model and the bioavailability results
of two formulations were similar.
Key words omeprazole,HPLC,pharmacokinetics 奥美拉唑(omeprazole)是一种新型的抗消化性溃疡药物［1］，血浆中奥美拉唑的高效液相色谱测定方法已有报道［2～5］，但这些方法的流动相均采用了磷酸盐或醋酸盐缓冲系统，调节pH至4.8，7.0或7.4，并在血样处理过程中均加入磷酸盐或碳酸盐缓冲液调整血浆pH至7.0或9.8，方法繁琐，且色谱图中杂峰干扰多，分离时间长。本文以乙醚为溶剂直接提取血浆样品，并以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(60∶40∶0.5∶0.5)为流动相，以尼美舒利为内标设计了血浆中奥美拉唑的HPLC测定方法，本法简便，快速，且色谱图干净，无杂峰干扰测定。检测灵敏度可达3
ng*mL-1。用本法对12名健康志愿者口服洛赛克胶囊和奥美拉唑肠溶片后体内过程进行了研究，统计学结果表明，2种制剂吸收程度相近。 1 仪器与试药
Shimadzu LC—6A平流泵；Shimadzu C—R6A数据处理机；Shimadzu SPD—10A可变波长检测器；GJ
605进样阀(大连依利特科学仪器有限公司)；奥美拉唑肠溶片(国内某制药厂生产，批号970504，规格：20
mg每片，以下简称制剂A)；洛赛克胶囊〔阿斯特拉(无锡)制药有限公司，批号9710019，规格：20
mg每粒，以下简称制剂B〕；奥美拉唑对照品(江苏省药品检验所提供，纯度大于99.5%)，尼美舒利(安徽省药品检验所提供)，乙醚、甲醇、冰醋酸、三乙胺均为分析纯。 2 色谱条件
色谱柱：Hypersil ODS2 20 cm×4.6 mm,5 μm(大连依利特科学仪器有限公司)，流动相：甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(60∶40∶0.5∶0.5)，流速1
mL.min-1，检测波长302
nm，灵敏度0.002 AUFS。 3 对照品溶液配制及血药浓度测定
3.1 对照品溶液配制
精密称取奥美拉唑对照品10 mg置10 mL量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为1
mg.mL-1的对照品贮备液，精密量取对照品贮备液10
μL及30 μL分别置于10 mL量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度分别为1
μg.mL-1及3
μg.mL-1的对照品溶液。
3.2 血药浓度测定
取血浆1.0 mL置离心管中，精密加入25 μg.mL-1的尼美舒利甲醇溶液15
μL，涡旋10 s，加乙醚6 mL，涡旋3 min，于3000 r.min-1离心5
min,取有机相约5 mL，于氮气流吹干，用100 μL流动相溶解残渣，3000
r.min-1离心5
min，吸取上清液20 μL，按上述色谱条件进样分析。 4 药代动力学实验方案
12名健康男性受试者，体重(65.5±5.10)kg，年龄(19.8±1.2)岁，经生化检验证实肝、肾功能正常，心电图检查正常。实验前1周及实验期间未服用其它药物及烟和酒，用药前12
h及用药后4 h内禁食，实验期间统一饮食。
12名男性健康受试者，按体重分组，随机分成A、B两组，随机一半先口服制剂A，后口服制剂B；另一半先口服制剂B，后口服制剂A。剂量均为40
mg(2片)，用200 mL温开水送服，于服药后0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0
h于肘静脉取血3.0 mL置肝素化试管中，3000 r.min-1离心5
min,取1 mL血浆供HPLC分析。
将所得血药浓度-时间数据用PKBP-N1程序计算药物的药代动力学参数，再取均值±S。
所得参数用交叉实验设计的方差分析，其中AUC0→∞，AUC0→12h，Cmax先进行自然参数转换，再进行分析，并进行双单侧检验。 5 结果
5.1 色谱行为及最低检测浓度
按“血药浓度测定方法”项下操作，色谱图见图1。奥美拉唑的保留时间约为5.4
min，内标尼美舒利的保留时间为7.3 min，以奥美拉唑计算理论塔板数为6351。在上述条件下测得血浆中奥美拉唑的最低检出浓度为3
ng.mL-1（S/N=3)。 | 
。结果表明30，300，1800
ng.mL-1
3种浓度标准血浆的提取回收率(n=5)分别为91.45%(RSD=1.6%),87.02%(RSD=1.7%),98.07%(RSD=0.84%)。