提要:
本文报道了用气相色谱法测定食品中香兰素(C8H8O3,Vanillin)的 分析方法.样品经过酸碱处理,多次萃取后,采用2%OV17/Chromosorb W-AW-DMCS色谱柱, 柱温180℃, 样品回收率为94.99%,变异系数0.12%,线性回归方程Y=(1.059e+04)X+(-17648.54),R=0.9937,方法快速,准确,灵敏度高.
关键词:
气相色谱分析法, 香兰素(3-甲氧基-4-羟基苯甲醛C8H8O3), 食品, 食品添加剂.
香兰素(3-甲氧基-4-羟基苯甲醛,香草醛)(1) 是一种白至微黄色针状结晶粉,有香荚兰豆特有的香味,易溶于乙醇、乙醚、冰醋酸和热挥发油,沸点284~285℃,作为食品添加剂常用于冷饮,麦片,豆奶,糖果等食品,食品中香兰素的测定方法主要有薄层层析法(2) ,气相色谱法分析食品中的香兰素未见报道,本文对食品中的香兰素进行酸碱处理,多次萃取后用气相色谱法进行分析，样品回收率94.99%,变异系数0.12%,线性回归方程Y=0.99X+0.12,结果令人满意 .
1 实验部分
1.1仪器及试剂
气相色谱仪:上分GC-103型附氢火焰检测器FID，SPB-3型全自动空气源（北京中惠普分析技术研究所），SH-200型氢气发生器（山东化工研究所），WDL-95色谱工作站（中科院大连化物所），香兰素（分析纯,含量≥99.5％,上海分装）.
1.2色谱条件
色谱柱:2m*3mm玻璃柱2%OV17/Chromosorb W-AW-DMCS 60/80目,
汽化室温度:240℃,
检测器温度:240℃,
柱温度:180℃,
载气N2:20ml/min(0.2 MPa), H2:65ml/min,Air:300ml/min.
1.3操作方法
1.3.1样品处理
称取样品10.0g加入20ml10%CuSO4,4.4ml(1mol/L)NaOH溶液,加蒸溜水至100ml,静置30min,取上清液50ml(相当于样品5.0g)于分液漏斗中,加入2ml1mol/L硫酸酸化,用40ml三氯甲烷分二次萃取 (20,20ml), 合并三氯甲烷层, 用5ml1mol/L氢氧化钠溶液提取二次, 碱液层用2ml1mol/L硫酸酸化, 用5ml三氯甲烷萃取，合并三氯甲烷层, 用无水Na2SO4干燥后定容至5ml,待测.
1.3.2. 标准曲线的制作
吸取香兰素标准溶液(5.0mg/ml)0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml于分液漏斗中, 加入2ml1mol/L硫酸酸化, 操作方法同上,进样2ul(见图一),测定保留时间及峰高.每个浓度重复测定三次,取峰高平均值.以香兰素含量对峰高作图,绘制标准曲线
1.3.3.样品测定
取待测样品2ul进样,以香兰素标准峰的保留时间定性,由标准曲线上计算出香兰素的含量
2 结果与讨论
2.1.香兰素极性较强,直接进样(填充柱)不能出峰,须进行酸碱处理.
2.2.溶剂选择三氯甲烷,二氯甲烷,石油醚,乙醚,正己烷等,石油醚,乙醚,正己烷不出峰,三氯
烷,二氯甲烷出峰,以三氯甲烷为最适宜.
2.3.柱温在180~210℃选择,高于或低于180℃色谱峰均分离不好,故选择柱温在180℃.
2.4.色谱柱分别SE30,OV17,FFAP,PEG-20M,DEGS等,以OV17柱分离较好.,故选择OV17色谱柱.
2.5.测定样品回收率94.99%,变异系数0.12%,线性回归方程Y=(1.059e+04)X+(-
17648.54),R=0.9937(见表一).
表1 样品测定结果及回收率
样品名称 含量(mg /ml) 添加量(mg/ml) 测得量 回收率
麦片1# 0.34 2.0 2.16 92.31
麦片2# 0.47 4.0 4.40 98.43
冷饮 1# — 2.0 1.91 95.50
冷饮2# 0.29 4.0 4.02 93.71
平均回收率为94.99%.变异系数0.12%.线性回归方程Y=(1.059e+04)X+(-17648.54),R=0.9937.
参考文献
1.贾淑贞,李发生,实用食品添加剂手册,郑州,河南科技出版社.1996,8,第一版,259.
2.肖学成,环境与健康杂志,1992,(9),增刊,18.
作者：
王建华 2007-5-18