HPLC法测定硫酸阿托品注射液的含量

　　摘要　目的：建立测定硫酸阿托品注射液中硫酸阿托品含量的方法。方法：采用YWGCIDS色谱柱(4.6 mm×20 cm)为固定相，以甲醇^.水(45∶55)加0.1%三乙胺，用磷酸调pH5.2为流动相，非那西丁为内标物，检测波长210 nm。结果：硫酸阿托品在40～200 μg^.ml^-1浓度范围内线性良好，r=0.9999，平均回收率为101.80%，RSD为1.62%。结论：本法操作简单，快速，准确可靠。
　　关键词　硫酸阿托品注射液：非那西丁；高效液相色谱法
　　中图分类号：R927.2　　文献标识码：B　　
文章编号：　1006-0103(2000)03-0212-02

　　硫酸阿托品是抗胆碱药，临床应用十分广泛。其注射液含量测定方法有溴甲酚绿酸性染料比色法^［1］、高效液相色谱法^［2］。现采用高效液相色谱法测定其含量。

1　实验部分

1.1　仪器与试药
　　美国光谱物理公司的SP8810泵，SP8450检测器，SP4290积分仪。硫酸阿托品对照品和非那西丁内标物(中国药品生物制品检定所)；甲醇、三乙胺、磷酸均为分析纯；水为重蒸馏水；硫酸阿托品注射液(市售，批号980410，980222，980202，970804)。
1.2　方法与结果
1.2.1　色谱条件　固定相为YWG ODS色谱柱(4.6 mm×20 cm， 大连依利特公司)；流动相为甲醇-水(45∶55)含0.1%三乙胺，用磷酸调节pH5.2；流速1 ml^．min^-1；检测波长210 nm；纸速1 mm^．min^-1;灵敏度为0.1AUFS；进样量10 μl；室温测定。
1.2.2　标准曲线的绘制　精取硫酸阿托品对照品10 mg，加水溶解并定容至25 ml，得0.4 mg^．ml^-1的对照品贮备液备用。精取非那西丁8 mg，用甲醇5 ml溶解并加水定容至50 ml，得0.16 mg^．ml^-1的内标物贮备液备用。分别吸取硫酸阿托品贮备液1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 ml置5个10 ml量瓶中，同时分别加入内标液1.00 ml，加水定容配制成浓度为40、80、120、160、200 μg^．ml^-1的硫酸阿托品标准系列，每一浓度进样3次，每次10 μl记录色谱图，以对照品峰面积与内标物峰面积之比为纵坐标，进样浓度为横坐标，得回归方程为：y=0.02132+0.555x　r=0.9999。结果表明，硫酸阿托品在40～200 μg^．ml^-1范围内线性关系良好。
1.2.3　精密度试验　精取供试品溶液(相当于硫酸阿托品2.5 mg)，加内标液1.00 ml，加水定容至10 ml。进样10 μl。同法取同一批号样品测定6次，用内标法求出标示百分含量，其RSD为1.68%。
1.2.4　稳定性试验　精取对照品贮备液3.00 ml，加内标液1.00 ml，加水定容至10 ml。分别在0、1、2、4、8 h进样10 μl，记录色谱图，以内标法计算含量，RSD=1.76%。
1.2.5　回收率试验　精取样品溶液适量，加对照品溶液适量，加内标溶液1.00 ml，加水定容至10 ml。进样10 μl，测出硫酸阿托品的量，计算回收率，结果见表1。

表1　回收率结果(n=3)
Table 1　results of recovery(n=3)

Batch No.	HPLC法/%			±SD/%	药典法/%		±SD/%
980202	95.87	95.84	97.97		92.76	92.05
	97.76	94.35	98.80	96.76±1.68	93.79	93.98	93.14±0.91
980410	101.57	99.97	101.54		100.23	96.14
	100.34	101.53	100.60	100.76±0.64	96.52	97.97	97.72±1.85
980222	99.78	99.01	96.30		97.39	97.43
	98.20	97.90	96.86	98.01±1.30	92.76	97.43	96.25±2.233
980804	91.03	90.86	93.56		90.00	90.00
	90.23	91.62	93.21	91.75±1.35	88.13	87.26	88.55±1.38