气相色谱法检测灭鼠药氟乙酰胺的应用研究

作者单位:广东省卫生防疫站　510300

　　氟乙酰胺是急性灭鼠药,该药对人体毒性很大,我国已禁止使用,但由于缺乏有效的监测手段,目前仍有部分药物流入市场,严重威胁人民群众身体健康,近年来常有报道误食急性灭鼠药(其中氟乙酰胺占相当大比例)中毒事件。为了更好地管理灭鼠药,杜绝使用氟乙酰胺,需建立一套检测氟乙酰胺的方法。对该药的检测,文献报道主要有一般化学法、核磁共振¹⁹F波普及气质联用等方法。因化学法步骤繁琐,且需多种试剂,不便应用于日常的灭鼠药监测,后两者因仪器价格昂贵,基层监测部门无法开展工作。因此,本文尝试采用气相色谱法检测灭鼠药中氟乙酰胺,并将其应用于样品的监测,现分述如下:
　　

材料与方法

　　1　仪器与试剂
　　SP-3400气相色谱仪(北京分析仪器厂),配A-4700数据处理机(北京东西电子研究所),带氢火焰离子化检测器(FID)。
　　内标物:苯甲酸甲酯,分析纯。
　　标准品:氟乙酰胺,纯度为95.0%,由北京农药检定所提供。
　　灭鼠药:"一扫光"(日本广岛高科技研究所、香港大隆鼠药厂联合生产)、"闻到死"(北京生化仙桃市分装)、"快杀灵"(沈阳市新型好猫鼠药厂)、"气死猫"(沈阳好猫鼠药厂)等毒饵,从市场流动摊档购买。

　　2　色谱条件
　　色谱柱:0.25×2000mm空心毛细管柱,内涂ov-210。
　　气体流速:载气(高纯氮)1ml/min;氢气30ml/min;空气300ml/min。
　　温度:柱温75℃,检测器、气化室温度150℃。

　　3　测定步骤
　　3.1　氟乙酰胺定性测定步骤
　　称取已磨成粉末的样品5g(准确至0.2mg),置于30ml具塞三角瓶中,加入丙酮,于振荡机振荡10min,将提取液过滤置于50ml容量瓶中,洗涤样品数次,合并滤液,用丙酮定容后备用。
　　量取上述药液10ml,加入5mg氟乙酰胺。
　　分别吸取以上药液1μl注入气谱仪分析。
　　3.2　氟乙酰胺定量测定步骤
　　3.2.1　内标溶液的配制:称取0.5g(准确至0.2mg)苯甲酸甲酯置于25ml容量瓶中,用丙酮定容后备用。
　　3.2.2　氟乙酰胺标准溶液的配制:称取0.075g(准确至0.2mg)氟乙酰胺置于25ml容量瓶中,用丙酮定容后备用。
　　3.2.3　样品溶液的配制:称取已磨成粉末的样品5g(准确至0.2mg),置于30ml具塞三角瓶中,加入丙酮,于振荡机振荡10min,将提取液过滤置于50ml容量瓶中,洗涤样品数次,合并滤液,准确加入2ml内标溶液,用丙酮定容后备用。
　　3.2.4　测定　在上述操作条件下,重复注射标准品溶液,使标准物和内标物的峰面积比达到恒定时才进行正式测定,进样量1μl。
　　氟乙酰胺(X)含量按下式计算:
　　X=Ai×Ms×PAs×W
　　X——氟乙酰胺含量(g/kg)
　　Ai——样品溶液中氟乙酰胺与内标物峰面积之比
　　As——标准品溶液中氟乙酰胺与内标物峰面积之比
　　Ms——氯乙酰胺标准品重量(mg)
　　W——样品称样重(g)
　　P——标准品纯度(%)
　　3.3　灵敏度测定
　　灵敏度(Y)按下式计算
　　Y=m×VM×v
　　Y——氟乙酰胺分析灵敏度(g/kg)
　　m——氟乙酰胺最小检出量(mg)
　　M——样品称重量(g)
　　v——进样量(ml)
　　V——提取液体积(ml)
　　

结果与讨论

　　1　灭鼠药中氟乙酰胺的定性分析
　　采用标准加入定性法,因本法氟乙酰胺分离度较高,如果加入的氟乙酰胺与样品中被测物色谱峰重叠,则被测物为氟乙酰胺可初步确认(见图1);如加入的氟乙酰胺与样品中被测物色谱峰分离,则可排除之。
　　2.1　精密度测定
　　取"一扫光"5份样品分别测定,结果变异系数为4.79%(表1),能满足常量分析要求。
　　表1　

精密度测定

2.2　准确度测定

　　标准加入回收率试验:在"一扫光"样品中加入准确称量的标准品,按本方法操作进行,结果回收率在94.9~96.7%之间。据文献报道,农药分析的回收率以90~110%为佳,可见,本法的准确度较为理想。
　　表2　

回收率测定

2.3　灵敏度测定

　　本方法的分析灵敏度为0.23g/kg,按氟乙酰胺一般正常使用量为5~20g/kg,可见,本方法的灵敏度亦能满足常量分析要求。

　　图1　①"一扫光"样品　　②"一扫光"样品+氟乙

　　2　氟乙酰胺的定量分析
　　定量分析色谱图见图2。

　　　注:①为氟乙酰胺峰　　　　②为内标物峰

　　3　灭鼠药中氟乙酰胺的定量测定结果
　　从市场购买四个牌号的灭鼠药分别进行测定,结果四个牌号的灭鼠药均检出氟乙酰胺,含量为4.33~6.67g/kg。可见,目前由于缺乏有效的监测手段,尽管国家已明文规定不准生产、销售、使用氟乙酰胺,但仍有不少用氟乙酰胺配制的灭鼠药流入市场,尤其是经非正式渠道经营的灭鼠药更为严重,如本次从流动摊挡抽检的灭鼠药检出氟乙酰胺率为100%。
　　本试验曾用内涂SE30毛细管柱,但氟乙酰胺分离效果不理想,因氟乙酰胺极性较大,故本文选用了极性柱OV-210,从而使氟乙酰胺得到较好的分离效果。
　　

参　考　文　献

　　1　全国爱卫会办公室.关于鼠药使用情况通报.中国媒介生物学及控制杂志,1996,7(6):1

　　2　何建邯,等.45例儿童鼠药中毒浅析.中国媒介生物学及控制杂志,1996,7(5):381

　　3　四川省农业科学研究所编.农药分析.北京:燃料化学工业出版社,1974.185

　　4　中华人民共和国国家进出口商品检验局编.农药残留量气相色谱法.北京:中国对外经济贸易出版社,1986.336