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前列腺素E2凝胶剂，商品名Prostin ETM2，是比利时普强药厂生产的阴道剂，其有效成分前列腺素E2(Prostaglandin E2，简称PGE2)具有引起子宫平滑肌收缩，调节子宫、阴道对其它激素刺激的反应等一系列药理作用，临床上用于引产［1，2］。厂附检验标准采用液相色谱柱后衍生化法测定，必须装备柱后衍生装置，方法较复杂。本文采用高效液相色谱法，以对羟基苯甲酸丙酯为内标，选用210 nm为检测波长。实验结果表明，本法PGE2最低检出量为0.03 μg，回收率为100.3 %，RSD=0.89 %(n=3)。方法简便，结果准确，重现性好。
1 仪器与试药
HP 1050型高效液相色谱仪，包括四元泵，自动进样器，1040型二级管阵列检测器，362型化学工作站及喷墨式打印机。
样品：Prostin ETM2 Vaginal Gel，每3 g含PGE2 2 mg；对照品：PGE2，按本文色谱条件分析，采用面积归一化法计算，含量为99.7%(RSD=0.48 %，n=18)，厂附方法测定结果为100.8%；内标物：对羟基苯甲酸丙酯；辅料：胶体化二氧化硅及甘油三乙酸酯。均由比利时普强药厂提供。
乙腈为色谱纯，三乙胺、高氯酸、四硼酸钠、冰醋酸及二氯甲烷均为分析纯，水为去离子重蒸水。
2 色谱条件
色谱柱：Hypersil ODS(5μm，4 mm×125 mm)；流动相：乙腈－水－三乙胺(45∶55∶1)，用高氯酸调节pH 4.0；流速：1 mL.min-1；检测波长：210 nm；柱温：室温；进样量：10 μL；分析时间：10 min。色谱图见图1。PGE2峰保留时间为2.3 min，内标峰保留时间为3.4 min。
图1 样品与赋形剂色谱图
A.样品 B.赋形剂
1.PGE2 2.内标 3 校正因子测定
3.1 内标溶液的制备 精密称取对羟基苯甲酸丙酯2 mg，置100 mL量瓶中，加二氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2 测定 精密称取PGE2对照品2 mg，置250 mL分液漏斗中，加二氯甲烷100 mL，振摇溶解，加0.32
%四硼酸钠溶液(pH 9.2)20 mL，强烈振摇2 min，放置分层，弃去下层，再加二氯甲烷50 mL，振摇30s，放置分层，弃去下层。加5 %冰醋酸溶液2 mL，精密加入内标溶液10 mL，再加二氯甲烷30 mL，强烈振摇2 min，放置分层，分取二氯甲烷置100 mL量瓶中，水层再分别用二氯甲烷提取2次，每次30 mL,合并提取液，用二氯甲烷稀释至刻度，摇匀。精密量取25 mL，用氮吹干，精密量取45%乙腈水溶液1 mL溶解，摇匀，取10 μL注入液相色谱仪。按峰面积计算校正因子［3］。平均校正因子为13.31，RSD=1.3%，n=18。
4 线性关系与最低检测量试验
取按校正因子测定项下处理好的含PGE2 598.5 μg.mL-1与内标57.25 μg.mL-1的溶液，分别取0.5、1.0、2.5、5、10 μL注入色谱仪分析，以进样量X(μg)与峰面积Y进行线性回归，PGE2与内标回归方程分别为：
Y=3.526+194.6X r=0.99995
Y=1.008+3520.6X r=0.999999进样0.5 μL，相当于PGE2为0.3 μg时峰高约10 mAu(峰面积57.58)，基线噪声约0.3 mAu，1 mAu时S／N约为3，最低检出量为0.03 μg。
5 回收率试验
按处方量，称取胶体化二氧化硅0.24 g、甘油三乙酸酯2.76 g，置研钵研磨制成基质(3份)，用二氯甲烷 100 mL洗入250 mL分液漏斗，分别精密称取PGE2对照品1、2、3 mg置分液漏斗中，照校正因子测定项的方法，自“振摇溶解”起，依法测定，按平均校正因子计算，结果见表1，平均回收率100.3%。
6 样品测定
取样品1支(用减重法取样)，精密称定，注入250 mL分液漏斗中，再精密称定空注射器。照校正因子测定项下的方法，自“加二氯甲烷100 mL”起依法测定，计算即得。样品3批，各取5支作平行实验
7 讨论
7.1 厂附检验资料用HPLC柱后衍生化法，用280 nm为检测波长，是将经柱分离后的PGE2，用氢氧化四甲铵在100 ℃反应，碱化脱水和异构化成在278 nm有特征吸收峰的PGB2。对羟基苯甲酸丙酯有强紫外吸收，PGE2为末端吸收。本法采用210 nm为检测波长，两者产生相同响应值浓度比为1∶10。本法PGE2峰与内标峰分离度大于4，经峰纯度检查均为纯峰，赋形剂对测定无干扰(见图1-B)。
7.2 本品外观为半透明粘性胶，装于注射器内。胶体化二氧化硅和甘油三乙酸酯为新型基质，溶于有机溶媒。每3 g样品仅含PGE2 2 mg，利用PGE2的化学转化与转化产物溶解性能的差异，除基质和提取PGE2，内标在样品处理时加入，对照品同法操作，消除操作误差，对照品与样品处理时，加入内标量一致，可采用内标一点法［5］计算。计算简便。