佩兰超临界CO2萃取物的抑菌活性研究

    佩兰为多年生重要的药食兼用草本植物，具有重要的药用价值。佩兰挥发油味微苦、性寒、有发表去湿的功能，用于伤暑头痛、无汗发热、胸闷腹痛、口中甜腻、口臭等。佩兰挥发油的主要成分为对聚伞花素、乙酸橙花酯、5-甲基麝香草醚。它们对流行性感冒病毒有抑制作用。本文旨在研究佩兰超临界CO2萃取物对容易引起食品腐败变质的一些微生物的抑制效果，以其为佩兰的综合利用提供参考。

    l 实验材料与方法

    1．1 荷叶：佩兰购于湘潭药铺。

    细菌：大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)；枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)； 蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)；金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)；沙门氏菌(Sahnonella)。
霉菌：青霉(Penicillium sp．)；根霉(Rhizopus sp．)；曲霉(Aspergillus)。

    酵母(yeast)。菌种均由学校微生物实验室提供
培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基。

    1．2 实验方法

    1．2．1 佩兰超临界C()2萃取物的制备 佩兰磨碎，超临界CO2萃取：压力15MPa，温度32℃，流速20Kg／h，萃取时间100min，得萃取液，经旋转蒸发仪蒸发浓缩成浸膏，待用。

    1．2．2 抑菌试验

    1．2．2．1 佩兰超临界CO2萃取物的抑菌活性：滤纸片法
萃取物浸膏配成溶液，测定其抑菌圈大小，同时以相应溶剂做空白试验。

    1．2．2．2 佩兰超临界C02萃取物的MIC测定：滤纸片法

    1．2．2．3 pH对佩兰超临界CO2萃取物的抑菌活性的影响

    将萃取物浸膏溶液调成不同的pH值，分别做抑菌试验(滤纸片法)观察不同pH值下萃取物抑菌活性的变化。

    1．2．2．4 温度和时间对佩兰超临界C02萃取物抑菌活性的影响

    将萃取物置于不同温度和时间条件下处理，然后采用平板计数法滤纸片法测定其抑菌活性。

    2 结果与讨论

    2．1 抑菌活性试验

    可以看出，佩兰超临界C02萃取物对细菌、酵母、霉菌均有较强的抑菌作用。这是因为佩兰超临界CO2萃取物为精油，其中含有一些萜烯类、酸、醇、醛、酮、萘、酚、醚等物质，可能是这些物质的分子结构特征与生物膜分子结构特征相似，容易进人菌体从而发挥抑菌作用，它们综合作用能较强的抑制微生物的生长。

    2．2 MIC的测定

    可以看出随着佩兰超临界CO2萃取物浓度的降低，其抑菌活性也降低，MIC：金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、霉菌为0.32g／l，大肠杆菌、酵母为0.16g／l，总的来说，对于大多数细菌、酵母、霉菌，佩兰超临界CO2萃取物的MIC不超过0.32g／l。

    2．3 pH对佩兰超临界CO2萃取物抑菌活性的影响

    可以看出，对大多数微生物来说，总的趋势是，偏酸性或偏碱性环境萃取物抑菌活性较强，这可能是因为在有大量[H]+和[OH]-的环境中使微生物菌体细胞膜内外的正常电荷分布发生改变，从而加强了佩兰萃取物一些成分的抑菌活性。

    2．4 温度对佩兰超临界CO2萃取物抑菌活性的影响

    可以看出，低温或高温瞬时处理对佩兰超临界C02萃取物的抑菌活性影响不大，但高温长时间理对其抑菌活性影响较大。这可能是因为高温长时间处理使佩兰超临界CO2萃取物(精油)中的抑菌物质发生了某物理或化学变化或挥发掉了，致使其抑菌活性降低。

    3 结论

    3．1 佩兰超临界CO2萃取物(精油)对细菌、酵母、霉菌均有一定的抑菌活性，在酸性环境和碱性环境较为显著，对大多数细菌、酵母、霉菌的MIC不超过0.32g／1。

    3．2 佩兰超临界CO2萃取物(精油)用于抑菌作用时，不宜高温长时问处理，但可以高温瞬时或低温处理。

参考文献：

【1】吴征镒等．中国植物志(66卷)．北京：科学出版社，(1977)

【2】孙绍美．佩兰挥发油药理作用的研究．西北药学杂志，1995．10(1)

【3】崔水杰．佩兰挥发油化学成分的研究．药物分析杂志，2002．5

来源：东方医药网