气相色谱法测定异氟烷的含量

山东省药品检验所　250012

山东省千佛山医院药剂科

　　异氟烷(Isoflurane)临床上用作吸入麻醉剂。美国药典^［1］已有收载，其含量测定方法是采用气相色谱法，以10%的壬苯醇醚—30和15%的聚烷撑二醇为固定液，热导池为检测器，外标法进行测定，条件苛刻，操作中易产生误差。本文试用氯仿作内标，以聚乙二醇—20M为固定液，用氢火焰离子化检测器进行异氟烷的含量测定，获得了满意结果。
1　仪器与试药
仪器：日本岛津GC—9A型气相色谱仪，配C—R2AX数据处理机。
试药：异氟烷对照品(由山东省医药工业研究所提供，含量经归一化分析为99.93%)；氯仿(内标)为优级纯；正己烷(溶剂)为分析纯。
2　色谱条件
色谱柱：25% PEG—20M不锈钢柱(3.1m×2.4mm)；柱温：80℃，检测器及进样口温度：130℃；检测器：FID；气体流速：氮气30mL/min，氢气59.06kPa，空气49.22kPa；量程：10²；衰减：9。
3　保留时间、分离度和色谱柱理论板数的测定
异氟烷与内标物用上述色谱条件测定，两者之间的分离度为6.8；色谱柱的理论板数为1054；异氟烷与内标物的保留时间分别为4.6、10.6min，色谱图见图1。

图1　异氟烷与内标色谱图
1.溶剂　2.异氟烷　3.内标

4　线性关系与定量校正因子的测定
精密量取异氟烷对照品1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分别置25mL量瓶中，精密加入内标(氯仿)5.0mL，用正己烷稀释至刻度，摇匀，进样1μL，以不同浓度时的峰面积与内标峰面积之比对浓度(V/V)进行回归计算，结果二者呈良好的线性关系，其回归方程为：
Y＝6.356X+0.0056　r＝0.9998
校正因子为0.7846(n=5)，RSD＝0.57%。
5　精密度试验
在上述选定的色谱条件下，重复进样5次，计算RSD为0.51%，结果表明其稳定性和重现性良好。
6　加样回收试验
精密量取已知含量的异氟烷样品2.0mL(5份)，分别置25mL量瓶中，并分别精密加入异氟烷对照品1.0mL，内标5.0mL，用正己烷稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件进行测定，进样1μL，得平均回收率为99.85%，RSD为0.71%。
7　样品测定
精密量取本品3.0mL，置25mL量瓶中，精密加内标5mL，用正己烷稀释至刻度，摇匀，依法测定，结果见表1。
8　讨论
8.1　本文采用正己烷作溶剂，氯仿为内标测定异氟烷的含量与外标法相比，方法准确，精密度高，避免了因进样而产生的误差。

表1　异氟烷含量测定结果

批号

含量(%)

RSD(%)

960901

99.77

0.61

960903

99.83

0.57

960905

99.72

0.52

8.2　文献^［1］中采用TCD检测器，灵敏度较低，进样量较大(20μL)，易产生超载或气化不完全，出现拖尾。本文经试验选用普遍采用的FID检测器提高灵敏度，进样量减少，使样品、内标与挥发性杂质得以很好地分离，峰形较好。
8.3　在本实验条件下异氟烷和挥发性杂质峰分离良好，因而可以用于杂质限量检查。

参考文献
1　　USP.ⅩⅩⅡ，726；ⅩⅩⅢ，841

(本文于1997年4月9日收到)