气相色谱法鉴别和测定脑清片

气相色谱法鉴别和测定脑清片

河南省药品检验所　郑州　450003

脑清片是目前常用的解热镇痛药，临床用于治疗头痛、神经痛、牙痛等。处方中含有氨基比林和咖啡因两种组分。测定法报道有中和法和碘量法^［1］、分光光度法^［2～7］以及高效液相色谱法^［8］。文献^［9］对咖啡因的鉴别方法进行了讨论。本文用气相色谱法鉴别和测定脑清片，样品不经分离即可同时测定氨基比林和咖啡因，同时与文献^［1］规定的方法测定结果进行了比较，得到了满意的结果。
1　仪器与试药
日本岛津GC—9A型气相色谱仪，C—R2AX微处理机。
氨基比林：本所化学室提供的符合药典要求的原料药品，本实验条件下为一单峰；偶氮苯(内标物质)和咖啡因：均为药典熔点测定标准品(中国药品生物制品检定所颁发)，本实验条件下均为一单峰；脑清片：河南省焦作市第二制药厂提供；氯仿：分析纯。
2　脑清片气相色谱条件
玻璃柱(3.2mm×2.6m)，担体：Gas Chrom Q 60～80目，固定液：3% SE—30，N₂：50mL/min，H₂：50mL/min，AIR：500mL/min，柱温：190℃，注样口和检测器温度：250℃，检测器：FID。
3　各组分保留时间、分离度及色谱柱理论板数的测定
按上述条件测定，脑清片的色谱图见图1，结果见表1。同时分别注射对照品溶液和供试品溶液各1μL，记录色谱图，供试品各组分的保留时间应与对照品各组分的保留时间一致。

图1　脑清片色谱图
1.偶氮苯(内标物)　2.咖啡因　3.氨基比林

表1　各组分保留时间、分离度及塔板数

组分名

保留时间(min)

分离度

塔板数

咖啡因　

6.71

6.56

3643

氨基比林

9.73

4.18

3792

4　线性范围及定量校正因子的测定
对照品溶液的配制：精密称取相当于2片量的氨基比林、咖啡因，置10mL量瓶中，加氯仿溶解并稀释至刻度摇匀，精密量取该溶液2.0mL，置25mL量瓶中，加氯仿稀释至刻度摇匀。
内标溶液的配制：精密称取内标物质偶氮苯60mg，置25mL量瓶中，加氯仿溶解并稀释至刻度摇匀。
线性范围的测定：精密吸取对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL，分别置10mL量瓶中，精密加内标溶液2.0mL，用氯仿稀释至刻度摇匀。每种浓度进样1μL，连续进样3次，由各组分浓度和对照品与内标峰面积比值进行回归，得咖啡因回归方程为：
Y＝0.1046X-0.01180　r＝0.9998
同法求得氨基比林回归方程为：
Y＝0.7671X-0.06256　r＝0.9998
咖啡因在0.032～0.257mg/mL、氨基比林在0.120～0.964mg/mL范围内线性关系良好。
定量校正因子的测定：精密量取对照品溶液2.0mL，加内标溶液2.0mL，按“线性范围的测定”项下操作，计算校正因子，咖啡因为2.660，氨基比林为1.335。
5　回收率测定
精密称取2片量的咖啡因、氨基比林及辅料，置10mL量瓶中，加氯仿适量，充分振摇使溶解，稀释至刻度摇匀，过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液2.0mL，置25mL量瓶中，加氯仿稀释至刻度摇匀，精密量取该溶液2.0mL，置10mL量瓶中，加内标溶液2.0mL，加氯仿稀释至刻度摇匀，进样1μL，每份注样3次，其回收率(n=6)为：咖啡因102.8%，RSD＝1.2%；氨基比林102.9%，RSD＝1.4%。
6　样品的测定
取本品10片，精密称定，研细，精密称取约相当于2片量的样品，置10mL量瓶中，按“回收率测定”项下操作，测定结果见表2，同时与文献^［1］规定的方法测定结果进行了比较。

表2　样品测定结果(%)

编号

组分名

GC法

规定法

1

咖啡因　

107.3(1.07)

108.8

氨基比林

100.9(0.88)

100.4

2

咖啡因　

106.3(0.30)

109.2

氨基比林

101.3(0.46)

98.60

注：括号内为RSD(%)。

7　讨论
7.1　实验结果表明，处方中的辅料不干扰测定。
7.2　本文方法不需进行预处理即可同时测定两组分，方法简单，操作方便，结果准确，测定误差在药典要求范围之内。
7.3　本法测定结果与规定方法测定结果基本一致

参考文献

1　　河南省卫生厅文件.豫卫药审字(89)第38号
2　　潘福海.双波长分光光度法测定脑清片中氨基比林、咖啡因的含量.药物分析杂志，1984，4(6)：362
3　　杨秋芳等.计算紫外分光光度法测定脑清片中两组分的含量.沈阳药学院学报，1990，7(2)：132
4　　李敬函.正交函数分光光度法测定脑清片含量.中国医院药学杂志，1992，12(9)：406
5　　黄喜茹等.多波长直线回归法测定脑清片中氨基比林和咖啡因的含量.河北医学院学报，1995，16(3)：139
6　　刘玉华等.倍增差示双波长分光光度法测定脑清片中氨基比林和咖啡因的含量.山东医药工业，1994，13(1)：8
7　　王　玺等.统计模拟分光光度法及其在复方制剂组分含量测定中的应用.药学学报，1995，30(5)：378
8　　路生满等.高效液相色谱法分离测定脑清片的含量.中国医科大学学报，1992，21(4)：301
9　　吕凤莲等.脑清片中咖啡因鉴别方法的讨论.药物分析杂志，1994，14(2)：45

(本文于1997年4月1日收到)