气相色谱法测定软膏剂中斑蟊素的含量

新疆药物研究所　乌鲁木齐　830002

　　由斑蟊等味药制成的软膏剂，经临床应用，对各种外伤，有明显的止痛和促进愈合作用。本软膏剂基质由植物油、液体石腊等组成，而斑蟊中的主要有效成分斑蟊素易溶于植物油^［1］，用常规萃取法无法将斑蟊素与植物油有效分离，给GC分析带来许多不便。本文应用硅胶小柱对样品进行前处理，用GC法进行含量测定，结果表明本法可靠、快速，对色谱分析干扰少，可作为同类剂型中斑蟊素的含量测定方法。
1　仪器与试药
GC—17AAF气相色谱仪、C—R4A数据处理机(均为日本岛津公司生产)。斑蟊素对照品(中国药品生物制品检定所)。
硅胶(层析用，60～120目，青岛海洋化工厂)。试剂：均为AR。
2　色谱条件
2.0m×3.0mm玻璃柱，固定液：3%的SE—30；担体：Chromsorb W-酸洗、60～80目。气体流速，氮气：45mL/min；氢气：45mL/min；空气：450mL/min。柱温：170℃。气化室温度：200℃。检测器：FID，温度：200℃。
3　线性范围
精密称取斑蟊素对照品适量，加氯仿制成0.01mg/mL溶液，作为对照品溶液。
精密吸取对照品溶液0.2、0.4、0.5、0.6、0.8、1.0μL，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归计算，回归方程为：
Y＝2486-36X　r＝0.995
结果表明斑蟊素在0.02～0.1μg范围内线性关系良好。
4　精密度实验
选取斑蟊素浓度为0.005mg/mL和0.01mg/mL。分别在同一天及不同天重复多次进样，计算日内和日间的差异。结果日间精密度(n=7)RSD分别为2.4%和1.1%，日内精密度(n=6)RSD分别为2.0%和1.2%。
5　回收率及重现性试验
取样品置70℃水浴上加热20min，精密量取已知含量样品5mL，加入斑蟊素标准品1.06mg，按样品测定项下操作。结果5次测定平均回收率为99.8%，RSD为2.1%。
取同一批号样品5批次，按样品测定项测定(n=3)，RSD＝1.8%。
6　样品测定
取置70℃水浴上加热20min的样品5mL，加入丙酮100mL，振摇20min，以滤纸加一层棉花过滤，滤液置70℃水浴上浓缩除去丙酮，冷却至室温，精密量取0.5mL置湿法装置的硅胶柱上(15mm，10g硅胶)层析，以石油醚(30～60℃)洗脱，收集洗脱液15mL，置70℃水浴上蒸干，残留物加氯仿溶解，置10mL量瓶中加氯仿并稀释至刻度即得。精密吸取对照品溶液及供试品溶液各1μL，注入气相色谱仪，见图1。以外标法计算含量，结果见表1。

图1　斑蟊素气相色谱测定图
a.标准品　b.样品　c.空白
1.　斑蟊素

7　结果与讨论
7.1　在试验中我们发现丙酮对液体石腊有较好的沉淀作用，液体石腊的沉淀速度随丙酮的量增大而加快，本实验中丙酮的加入量为样品的20倍以上为佳。
7.2　试验中我们比较了不同溶剂对斑蟊素的洗脱能力，结果以石油醚、氯仿为佳，经GC分析得知石油醚洗脱出的杂质少，易浓缩，且洗脱时间短，所以我们采用以石油醚作为洗脱剂。

表1　斑蟊素含量测定(n=3)

7.3　据文献^［2］报道，斑蟊素有一定的挥发性，因此本文样品处理方法过程对斑蟊素含量是否有影响进行了研究，对5份标准品样做不处理和按样品方法处理前后的含量数据进行统计学检验，结果表明，样品处理前处理后含量无显著性差异。
7.4　样品中斑蟊素的含量差别较大，这主要是斑蟊来源不同所致。因此应对原药材进行质量控制。

参考文献

1　中国医药公司上海化学试剂采购供应站.化学试剂手册.二版.上海：上海科学技术出版社，1985.268
2　王泽民主编.当代结构药物全集.下册.北京：北京科学技术出版社，1993.2125

(本文于1997年6月16日收到)