(山东省青岛市药品
检验所 青岛 266071)
摘要:采用YMC-ODS-AQ柱,流动相为水-乙腈-1 mol.L-1磷酸二氢钾溶液-1 mol.L-1醋酸溶液(862∶130∶7∶1),检测波长为254 nm。结果表明线性范围在0.2~2.0 mg.ml-1(r=0.9997),平均回收率为99.8%,RSD为0.54%。该方法简便,结果准确,适用于该
制剂的质量控制。
Content Determination of Ampicillin Capsules by HPLC
LI Hong-bing,ZHU Bo,ZHONG Na(Qingdao Institute for Drug Control,266071)
ABSTRACT:This Paper reported that C18 colum was used,mobil phase was water-acetonitile-1 mol.L-1 potassium dihyd-rogenphosphate-1 mol.L-1 acetic acid(862∶130∶7∶1),detection wavelenth was 254nm.The Results showed that there was detection ranges were 0.2~2.0mg.ml-1.The average recovery of ampicillin was 99.8%(n=0.54%).The method is simple,convenient and accurate.
KEY WORD:Ampicillin;Capsules;HPLC
氨苄西林胶囊是
临床上广泛应用的一种口服抗生素制剂,我国药典目前还未收载。美国药典XXⅢ版采用剩余碘量法,有的地方标准(海南、广东等)采用米唑分光法。鉴于上述两种方法操作较繁琐和近年来HPLC法的普及应用,本文参照USP XXⅢ版氨苄西林原料的测定方法,采用HPLC法测定了胶囊剂中氨苄西林的含量,分离杂质完全,结果准确且较原方法简便。
1 样品与试剂
氨苄西林胶囊,市售。氨苄西林对照品,中国药品生物检定所提供。乙腈,化学纯。磷酸二氢钾,冰醋酸均为分析纯。
2 仪器与测定条件
岛津LC-10ADHPLC仪,SPD-10A紫外检测器,YMC-ODS-AQ(150×6.0 mm,I.D,5 μm)色谱柱,20 μl定量阀,检测波长为254 nm。流动相∶水-乙腈-1 mol.L-1磷酸二氢钾溶液-1 mol.L-1醋酸溶液(862∶130∶7∶1),流速为1 ml/min,衰减3,灵敏度0.02 FuFs。
3 方法与结果
3.1 系统适用性试验 精密称取氨苄西林对照品适量,按含量测定项下条件配制溶液,吸取此溶液在上述色谱条件下测定,6次进样的相对标准差(RSD)不大于2.0%。以氨苄西林峰计,理论板数大于2000,与杂质峰的分离度大于1.5。
图1 氨苄西林色谱图
1.氨苄西林 (TR=6.3min)
3.2 线性试验 精密称取氨苄西林对照品,加流动相制成约为4 mg.ml-1的溶液,分别取0.5,1,2,3,4,5 ml,用流动相稀释成每ml含氨苄西林为0.2,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0 mg的溶液,按上述色谱条件进行测定,结果浓度在0.2 mg.ml-1~2.0 mg.ml-1范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,其回归方程:
Y=69118.26X+723.40,相关系数r=0.9997
4 回收率和重复性试验
按供试品处方制成模拟胶囊,按样品测定项下方法测定,测得平均回收率为99.8%,(n=5),RSD为0.54%。同一批样品,重复测定5次,RSD为0.87%。
5 样品的测定
精密称取内容物适量(约相当于氨苄西林50 mg),置50 ml量瓶中,加流动相约30 ml,充分振摇溶解,加流动相至刻度,另取对照品同法处理,将上述两种溶液注入液相色谱仪,根据峰面积计算结果。(见图1、表1)。
表1 样品测定结果(n=5)
样品
批号HPLC法%米唑分光法%碘量法%
193.994.294.5
295.295.896.8
396.296.997.2
6 讨论
6.1 用原流动相,出峰缓慢,保留时间过长,样品放置过夜后,分解产物增多,样品含量降低。对原流动相,加大乙腈比例后,在10 min以内出峰,样品液配置后,当日测定,未发现不稳定现象。
6.2 从表1结果可知,高效液相色谱法测定结果与原方法基本一致,且比原方法操作简单,节约试剂。
参考文献
[1]USP XXⅢ版,P.107,108.
[2]海南省药品标准琼Q/WS-137-93.
[3]广东省药品标准1987年版,下册,P.1030.
作者:
李红兵祝波仲娜 2007-5-18