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摘要：目的：测定生发灵酊剂中阿魏酸的含量。方法：高效毛细管电泳法。缓冲液：30 mmol／L四硼酸钠(pH8．2)，高压进样5 s，分离电压12 kV，温度为25℃，检测波长为313 nm，咖啡酸为内标。结果：阿魏酸在4～20 μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0．9997)，平均回收率为98．93％(n：5，RSD：2．16％)。结论：本法简单、快捷、灵敏。
关键词：生发灵酊剂，阿魏酸，高效毛细管电泳法
生发灵酊剂为我院药学部与皮肤科合作研制的一种纯中药复方外用擦剂，自临床用于治疗脱发以来，取得了显著疗效。处方中主含当归，有效成分为阿魏酸，具有活血补血等功效。目前测定阿魏酸含量较成熟的方法有HPLC法。高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展迅速的一种新的分析技术，具有高效、快速、微量和易于自动化等优势。本文建立了用HPCE测定阿魏酸含量的方法，此法简便灵敏，结果可靠，重现性好。
1 仪器与试药：Waters公司高效毛细管电泳仪，石英毛细管柱(60cm×75 μm)；Millennium 32数据处理系统；离心机(ABBOT，美国)；超声波仪(KQ3200，昆山市超声仪器有限公司)；阿魏酸、咖啡酸对照品(中国药品生物制品检定所)；生发灵酊剂(100 ml，南方医院药学部自制)，四硼酸钠、氢氧化钠均为分析纯。
2 方法与结果
2．1 缓冲液的配制：精密称取四硼酸钠适量溶于500 ml超纯水中，配成30 mmol／L四硼酸钠电泳缓冲液，磷酸调pH至8．2。
2．2 电泳操作条件：分离电压：12 kV；检测波长：313 nm；进样量：50 kPa×5 s；缓冲液：30 mmol／L四硼酸钠溶液(pH 8．2)。每次进样前用缓冲液冲洗毛细管柱10 min，每次分析后用0．1 mmol／L的氢氧化钠冲洗2 min，水冲洗10 min。所用溶液均经0．45μm纤维树脂膜过滤。按上述电泳条件，得电泳图。
2．3 对照品溶液和内标溶液的配制：精密称取阿魏酸对照品15．0 mg，置于100 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。吸取上述溶液5 ml置25 m1量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，配成30 g／ml的阿魏酸对照品溶液。精密称取咖啡酸对照品10．0 mg置于100 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。吸取上述溶液5 rnl置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，配成20g／ml的咖啡酸内标溶液。
2．4 样品溶液的制备:精密量取生发灵酊剂l0ml置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，超声提取30
min，提取液转移到2ml离心管中，10000 r／min离心15 min。取上清液，用0．45μm孔径的有机滤膜滤过，弃去初滤液，收集续滤液作为样品溶液。
2．5 阴性样品溶液的制备：按处方比例及生产制备方法，制备不含阿魏酸的阴性样品，按“2．4”项下方法制备阴性溶液。
2．6 线性关系考察：精密吸取阿魏酸对照品溶液2、4、6、8、10 ml置于25 ml量瓶中，分别加内标溶液5 m1，用甲醇稀释至刻度，摇匀，按上述电泳条件，分别进样5 s，以对照品浓度( g／m1)为横坐标(C)，阿魏酸主峰面积与内标峰面积比为纵坐标(A)作图，回归方程为：A=0．2246C+0．301，r=0．9997(n=5)，阿魏酸在2．4～l2 g／ml浓度范围内线性关系良好。
2．7 精密度试验:按标准曲线项下方法同一天配制6、12、20 g／ml三个浓度的阿魏酸对照品溶液进行测定，另外以同样方法在不同日内测定，分别计算日内、日间精密度，结果见表1。
2．8 回收率试验：精密量取已测知含量的生发灵酊剂5．0 ml置25 ml量瓶中，分别加入阿魏酸适量，按“2．4”项下方法依次操作，进样5 s，以阿魏酸峰面积与内标峰面积比代人回归方程计算回收率，平均回收率为98．56％ ，RSD为1．94％ (n=5)。
2．9 样品测定：取生发灵酊剂3批，精密量取l0ml置25 m1量瓶中，加内标溶液2ml，加甲醇至刻度。按“2．4”项下方法依次操作，进样5 s，内标法计算3批样品的含量，结果见表2。
表2 样品测定结果(n=5)
批号 阿魏酸( IIl1)
o3O612
030626
0307l8
l1．38±O．23
l1．56 ±0．18
l1．23 ±0．21
3 讨论
中药复方制剂所含成分复杂，采用HPLC法进行测定时，往往因杂质太多，容易污染色谱柱，使柱效降低。而采用HPCE法进行分析时，由于毛细管易冲洗再生，保持高效，使各成分的分离较佳。笔者采用高效毛细管电泳法测定生发灵酊剂中阿魏酸的含量，方法简便、准确、快速、重复性好，可为生发灵酊剂的质量控制提供一种简便的方法。
参 考 文 献
1 魏伟，等．中药成分的毛细管电泳分析．药学学报，1997，32(6)：476