Literature
Home药品天地专业药学实验技术色谱技术色谱论文

蒙成药吉如很阿嘎如一8中多糖的组分分析和糖含量测定

来源:来宝网
摘要:摘要:文中介绍了提取吉如很阿嘎如一8中水溶性多糖的方法,并用硫酸-苯酚法测定了该药中总糖、水溶性多糖、不溶性多糖和游离糖的含量。用GC测定了吉如很阿嘎如一8中可溶性多糖由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖等组成。关键词:吉如很阿嘎如一8。多糖。...

点击显示 收起

摘要:文中介绍了提取吉如很阿嘎如一8中水溶性多糖的方法,并用硫酸-苯酚法测定了该药中总糖、水溶性多糖、不溶性多糖和游离糖的含量。平均回收率为99.9% ,RSD为0.90%。用GC测定了吉如很阿嘎如一8中可溶性多糖由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖等组成。它们的摩尔比为1.O0:0.76:3.61:2.88:5.00。
关键词:吉如很阿嘎如一8;多糖;气相色谱;提取
    吉如很阿嘎如一8是蒙医用来医治“赫依”热攻心,神昏谵语,心肌损伤,心前区痛等疾病的药。目前关于蒙药广枣的化学成分已有一些研究,其它蒙药的化学成分研究较少,关于吉如很阿嘎如一8的多糖成分分析的研究尚未见报导、近年来研究发现,多糖具有多方而的生物活性,并从药用植物中发掘出许多有生物活性的多糖,用于治疗免疫系统严重损伤的癌症、病毒感染的艾滋病(AIDS)、心脑血管疾病以及免疫缺损的慢性疾病等。本研究提取了吉如很阿嘎如一8的可溶性多糖并测定了多糖含量和可溶性多糖组成,为开发研制蒙药新制剂,提高蒙药药效,提供理论依据。
    l 材料、仪器及试剂
    l l 材料:吉如很阿嘎如一8由内蒙蒙药厂生产 批号为:980830
    1 2 仪器:HP5890气相色谱仪(美国产),721型分光光度计(上海产)。
    1.3 试剂:试剂均为优级纯和分析纯,双蒸馏水。
    2 实验方法与结果
    2.1 多糖的提取及测试
    2.1.1 总糖样品的制备:精确称取粉碎的吉如很阿嘎如一8200rag,置于100ml烧瓶中,加入1mol/L H2S04 50ml,回馏5小时,过滤,用双蒸馏水冲洗药渣,用l0%NaOH 中和至pH=6,最后定容250ml,待测总糖含量用。
    2.1.2 水溶性多糖的提取:称取粉碎吉如很阿嘎如一8药品10.0g,用三氯甲烷、丙酮抽提除去色素,将药渣风干放入烧杯中,加双蒸馏水机械搅拌加热,温度控制在70~80℃左右,提取2小时,共提取3次,合并提取液,用旋转蒸发仪减压浓缩至15ml,加乙醇沉淀,静置24小时,抽滤,用无水乙醇、丙酮洗3次,干燥得乳白色粗多糖1.1718g。精密称取恒重吉如很阿嘎如一8粗多糖10.5mg,置于100ml烧瓶中,加入1mol/LH2S04 20ml加热水解2小时,冷至室温,转入100ml容量瓶,稀释至刻度,待测水容性多糖含量用。
    2.1.3 不溶性多糖样品的制备:将已提取水溶性多糖的药渣风干,置于250ml烧瓶中,加入1mol/L H2S04 15Oml回馏5小时,用蒸馏水冲洗药渣,最后定容至250ml,待测不溶性多糖含量用。
    2 1 4 糖含量的测定:以葡萄糖为标准,用硫酸-苯酚法,在497nm波长处测定A值,求得标准曲线的回归方程为C=0.0025A+0.00195(r=0.9998),将上面得到的待测溶液,按标准曲线显色测定A值,由回归方程计算含量。
    加样测定平均回收率为99.9% ,RSD:0.90,水溶性粗多糖含量为87.7% 。
    2.2 水溶性多糖的组分分析
    2.2.1 各种标准单糖的气相色谱谱图:精密称取近2.0mg木糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、核糖、鼠李糖、岩藻糖等配成lmg/ml的混合液,再将阿洛糖、肌醇分别配在lmg/ml的溶液,将上述混合糖液取出0.2ml后,依次加入0.05m128%浓氨水、0.05ml肌醇和0.05ml阿洛糖混合好后,取出0.2ml依次加入少量乙醇、氨水 四氢硼钠混合,40℃水浴加热1小时,再依次加入冰醋酸、l-甲基咪唑和乙酸酐放置10分钟,冰浴10分钟,将溶液调制强碱性再冰浴30分钟,待分层后取出油层,用氮气吹干,然后用乙酸乙酯溶解,直接进行气相色谱分析。
    气相色谱条件:色谱柱为HPX70毛细管柱,检测器和进样口温度均为270℃ ,柱温为180~230℃,9分钟的程序升温,采用峰面积内标(用两种物质作内标)法定量。
    2. 2.2 水溶性多糖的单糖组成分析:精密称取近lOmg多糖,加入10ml 2mol/L硫酸水解2小时,取该液0.2ml,重复标准单糖的气相色谱分析方法。并将可溶性多糖的单糖组成及其含量列入表,可溶性多糖中单糖组成的摩尔比为阿拉伯糖:木糖:甘露糖:半乳恬:葡萄糖=1.00:0.76:3.61:2.88:5.00。
    3 讨论
    3.1 从表,吉如很阿嘎如一8多糖含量较高,总糖含量为21.80% ,其中水溶性多糖的含量为11.72%。从表看
吉如很阿嘎如一8水溶性多糖由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,其中甘露糖、半乳糖和葡萄糖含量较高,阿拉伯糖和木糖含量较少。
    3.2 将多糖水解成单糖时,水解不完全则测不准,过度又会导致多糖的差向异构化,故需准确确定水解时酸的浓度、温度和时间等条件。
    3.3 将单糖转化成多羟基醇时,用四氢硼钠还原.在实际操作中可使四氢硼钠微过量,再用冰乙酸分解过鞋的四氢硼钠,否则会干扰酰化过程。
    3.4 为了便于( 分析,将多元醇酰化,制成易挥发、对热稳定的衍生物。这个过程是多元醇与乙酸酐的反应.该反直的好坏取决于反应条件,最重要的条件之一是催化剂的使用,本实验用的是1一甲基咪唑。
参考文献
[1]内蒙古自治区卫生厅编.内蒙古蒙成药标准[M]呼和浩特:内蒙科技出版社,1984.
[2]李卫民,高志.蒙药广枣的药效学研究概况[J].中国民族医药杂志,1996,2(1):41.
[3]田庚元,等.植物多糖的研究进展[J].中国中药杂志,1995,20(7):441. ’
[4]方一苇.具有药理活性多糖的研究现况[J].分析化学,1994,22(9):955.
[5]李晓晖.灵芝多糖的含量研究[J].中草药,1997,28(9):530.
[6]白涛,等.谷物样品中淀粉、非淀粉多糖和游离糖的流水序列测定法[J].分析测试学报,1996,15(3):22.
作者: 未知
医学百科App—中西医基础知识学习工具
  • 相关内容
  • 近期更新
  • 热文榜
  • 医学百科App—健康测试工具