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摘要：本文综合论述对濒临灭绝的道地广药――石牌广藿香所进行的种质资源及物种鉴定、规范化种植、组织培养育苗、指纹图谱、化学成分分析、药理药效、饮片、标准提取物等研究。
关键词：濒临灭绝石牌广藿香GAP指纹图谱标准提取物
广藿香[Pogostemon cablin (Blanco) benth]是中国药典（CP）收载的常用品种，为唇形科刺蕊草属植物，以全草入药。味辛，性微温，归脾、胃、肺经。具有芳香化浊、开胃止呕、发散表邪的功能。用于治疗湿浊中阻、脘痞呕吐、暑湿倦怠、胸闷不适、寒湿闭暑、腹痛吐泻、鼻渊头痛、疟疾痢疾、口臭等症。广藿香不仅是30多种中成药（包括香雪牌抗病毒口服液）的主要原料，而且广藿香挥发油也是医药工业和轻、化工业的重要原料。
2000年，广州市香雪制药股份有限公司在与广州中医药大学联合承担国家“九五”重点攻关课题中药现代化研究与产业化开发专项――广藿香等五种中药材规范化种植示范研究及广东省有关中药材GAP基地试点建设任务的同时，在广州建立了广藿香GAP示范研究基地，成功挽救了濒临灭绝的广州地道中药材――石牌广藿香，其商品在形、色、气、味等方面均能保持优质，达到了药用植物与绿色食品出口行业标准。组织培养育苗及利用药材渣发酵成生物有机复合肥料的固体废物综合利用处理技术也取得了突破性进展。2002年11月，示范研究课题通过科技部验收，GAP基地也于2002年被批准为国家中药现代化科技产业基地。针对广藿香药材，2003年，香雪制药还承担了国家“十五”科技攻关计划创新药物和中药现代化项目广藿香（油）标准提取物质量标准研究课题。
以下是香雪制药及其协作单位针对石牌广藿香所进行的种质资源及物种鉴定、规范化种植、组织培养育苗、指纹图谱、化学成分分析、药理药效、饮片、标准提取物等研究的综述：
1．种质资源及物种鉴定
广藿香原产菲律宾、印尼、马来西亚等热带地区，我国引种栽培已有千余年历史（自宋朝引种栽培），长期以来，我国广东省广州市郊石牌，高要、肇庆、海南省万宁、云南临沧等地区均有传统栽培，其中牌香叶大，主茎矮，质较结实，药用最佳，广藿香酮为其特有的抗菌成分。陈仁山《药物出产辩》云：“藿香产广东，以番禺、河南宝岗、喃唔庄、石牌为好，肇庆六步为肇香，次之，琼州所产者为南香，更次。”由此可见，广藿香不仅在广东省的栽培历史悠久，而且牌香也是公认的质量最优的广东地道药材。进入九十年代以来，原盛产优质广藿香而闻名中外的广州石牌，因城市规划建设，现到处高楼林立，空中高速公路与立交桥纵横交错，再也看不见广藿香的踪影，石牌广藿香也成为了一个濒临灭绝的道地广药。因此对石牌广藿香进行规范化种植研究并形成产业化生产，有非常广阔的应用前景。
在种质资源及物种鉴定方面，我们对不同产地广藿香原植物形态，气孔指数、栅表比和脉岛数等显微常数，叶表面气孔、非腺毛表面疣点、细胞表面角质纹饰以及花粉粒、花粉囊的电镜扫描特征比较，RAPD指纹图谱，蛋白质带超薄等电聚焦电泳技术和GC-MS指纹图谱进行了全面的比较和综合鉴定。
2．规范化种植研究
2.1育苗：
2.1.1扦插育苗：
广藿香从热带地区的原产地引种到亚热带地区后，因气温低，很少开花，即使开花也多不孕，目前，广藿香主要采取无性扦插繁殖（营养繁殖）。
2.1.1.1沙床扦插育苗：
2.1.1.1.1苗床的选择原则：
宜选避风的13°以下林间平缓坡地，土壤以排水良好、富含腐殖质的砂质壤土为好，土层要深厚，土壤酸碱度以PH4.5－5.5为宜。
2.1.1.1.2苗床整理：
深沟高畦，最好在畦面平铺一层细河沙，然后撒施石灰消毒。
2.1.1.1.3扦插育苗时期：
以秋季为佳，亦可在2－5月，气温回升到15℃以上，雨季开始，植物体内液体流动旺盛时进行。
2.1.1.1.4插条选择与截取：
选取当年生5个月以上粗壮、节密、叶小而厚、无病虫害的枝条作插穗，最好是取中部以上主茎的侧枝，根据药农经验，下部褐色木栓化、髓部白色，折之有响声，断面有汁液流出的枝条为好；取嫩枝的顶梢，截成长10－15cm的小段，每段具3―5个节，在距离插条最下部一个芽2－3cm左右剪成锲形，剪口平滑整齐，剪去下部叶片，仅留顶端两片叶和小的心叶。
2.1.1.1.5插条处理：
插条剪好后，用甲基托布津或多菌灵500倍消毒；扦插前，插条下部1－2个节沾上ABT生根粉、杀菌剂、维生素（或赤霉素）、蔗糖和黄泥的混合物，或用萘乙酸（NAA）浸泡插条基部。
2.1.1.1.6扦插要求：
在苗床开横沟，插条与地面呈60°角按一定株行距斜倚沟壁，再覆盖河沙，入沙深度为插条的1/3－1/2，插后浇足定根水，使插条与沙土紧密结合。
2.1.1.1.7苗期管理：
2.1.1.1.7.1遮阴：阴蔽度以40－50%为宜。
2.1.1.1.7.2淋水与防涝。
2.1.1.1.7.3追肥：
根系生长初期，不宜施过浓的肥料，以免灼伤苗木，在晴天结合浇水进行低浓度的叶面追肥。
2.1.1.1.7.4苗期病虫害防治。
2.1.2组织培养育苗：
广藿香的扦插繁殖存在着成活率低、繁殖速度慢、易带病菌、受环境条件影响大、需消耗大量原植物材料和人工、种质容易退化等缺点，对种苗的供应极为不利。采用茎尖或叶片组织作为材料，以0.2%升汞消毒15min，接种于MS+6-BA 2mg.L-1培养基上，先置黑暗下培养2d后置于光照下培养，能生成较多愈伤组织，继续培养生成丛生芽，丛生芽置于1/2MS培养基上能生成较多根，试管苗移栽到大田后，成活率达95%以上。
2.1.3大田直插法：
将新鲜的、较长的插穗不经过苗圃扦插育苗阶段，而直接插于大田的快速繁殖栽培方法。
2.2大田栽培管理：
2.2.1选地、整地与施基肥：
在前作收获后的秋冬季节，深翻晒土，施以火土灰、土杂肥、禽畜粪尿等作基肥（我们提倡使用药渣发酵后的生物有机复合肥料作基肥），至翌年栽植前再整理成深沟高畦形式。
2.2.2移栽：
2.2.2.1移栽时期：
于清明前后选择阴雨天或傍晚进行，秋季移栽以秋分前后较好。
2.2.2.2栽植密度：采用双行种植，2000－3000株/亩。
2.2.2.3栽植方法：
移栽前前一周追施出嫁肥， 起苗时苗床浇水湿透，以利带沙、土移栽，按株行距呈品字型挖小穴，每穴栽苗1－2株，栽后覆土压紧，浇足定根水。
2.2.3田间管理：
2.2.3.1遮阴：生长前期遮阴，阴蔽度以40－50%为宜。
2.2.3.2适时排、灌水。
2.2.3.3补苗与间种：
2.2.3.3.1补苗：广藿香种植后，要及时补栽同龄生根苗。
2.2.3.3.2间种：
在广藿香行间间种蔬菜等，既能充分利用地力、空间和光能等资源，又能满足广藿香生长前期需要适当遮阴的生理需求，更能提高单位面积的经济效益。
2.2.3.4中耕、除草和清沟培土：结合人工除草进行中耕和清沟培土。
2.2.3.5合理追肥、调节根冠比：
2.2.3.5.1广藿香生长周期短、产量高的作物，在施足基肥的情况下，还要根据其生长特征、需肥规律、土壤供肥状况等合理追肥，才能获得高产，从种植到收获，必须追肥7－8次；
2.2.3.5.2追肥原则：以有机肥为主，先淡后浓、勤施薄施。
2.2.3.5.3追肥方式：可采用低浓度叶面追肥、淋施、撒施、沟施或穴施等。
2.2.3.5.4追肥种类：以腐熟的有机肥为主，我们提倡使用药材渣发酵后的生物有机复合肥料，还可施用N、P、K复合肥、尿素、微生物生长调节剂等。
2.2.3.5.5因广藿香最终收获物是以茎、枝、叶等营养器官为主，生长前期应当重施氮肥，加大N/C比，促进地上部分营养器官的快速生长，使之尽快形成较宽大的冠幅，打下优质高产的物质基础，为保证作物的高产优质，在生长过程中还要增施磷肥和钾肥。
2.2.3.6打顶：根据植株生长情况和需要摘除顶芽，促进分枝生长，摘心后应及时追肥，促进新芽萌发。
2.2.4病虫害的综合防治：
广藿香的病害主要有根腐病和角斑病等，虫害主要有蚜虫、卷叶螟、红蜘蛛、地老虎等。进行病虫害综合防治时，要坚持贯彻环境保护、维持生态平衡的环保方针及预防为主、综合防治的原则，采取农业防治、生物防治和化学防治相结合，做好病虫害的监测、预防、预报和田间药效试验，提高防治效果，严禁使用国家禁用农药，如滴滴涕、六六六、甲胺磷、甲基异硫磷、杀虫脒等，将病虫害造成的损失降低到最低程度。
2.2.4.1农业防治：
2.2.4.1.1合理的轮作与间作：
2.2.4.1.2土壤消毒：
结合整地作畦，进行土壤消毒。
2.2.4.1.3清洁田园：
清除杂草落叶、感染病虫害植株，集中处理，以减少病虫源。
2.2.4.1.4科学的栽培管理，培育壮株：
通过追肥，做好田间管理各项措施，促进植株生长健壮，增强抗病虫害能力。
2.2.4.2生物防治：包括以虫治虫、以菌治虫、以菌治菌。
2.2.4.3物理防治：包括人工捕杀和光色诱杀等。
2.2.4.4化学防治：必须交替用药，防止病虫害产生耐药性。杀菌剂我们提倡使用波尔多液。
2.2.5采收：
2.2.5.1采收时期：
关于广藿香的采收时间，传统要求在14个月以上采收，根据我们对不同生长时期广藿香挥发油、广藿香酮、广藿香醇等有效成分的积累动态研究，广藿香定植栽培7－8个月亦可采收。
2.2.5.2采收方式：
选择晴天露水刚干后进行，剪割地上部分或将植株全株挖起，亦可用手连根拔起，除净泥土和须根，进行翻晒处理。
2.3后处理：
2.3.1广藿香的加工工艺：
广藿香采收后，及时摊晒数小时，使叶片稍成皱缩状态，再将广藿香捆扎成小把，将成把药材分层交错堆叠一夜，堆上用草席覆盖，再用塑料薄膜盖面，将叶片闷黄，堆叠闷黄时，切勿将叶与根部混迭。堆叠闷黄一夜后，翌日再晒，反复摊晒2－5天，直至全干。
2.3.2包装：
2.3.2.1选择不易破损的包装材料，如纤维袋等，以保证药材在运输、贮藏、使用过程中质量；
2.3.2.2发送药材必须有包装，标签应注明药材品名、产地、采收日期及注意事项等。
2.3.3运输：
运输工具应有通风设备，防止日晒、雨淋、潮湿、损坏、污染。
2.3.4贮藏：
选择通风、干燥、无污染的环境，彻底灭菌，并采用一定的控温、控湿技术，防止霉变，消灭虫源，防止发生虫蛀和鼠害。
2.3.5质量检测：
结合药典标准，采用DNA、TLC、GC、GC-MS、HPLC等指纹图谱作为药材有效物质群的质量控制方法。主要检测指标包括水分、总灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、醚溶性浸出物、总挥发油、广藿香醇、广藿香酮的含量以及重金属、农药残留和黄曲霉素等有害物质的含量等。
3．化学成分分析及药理药效研究
香雪制药在进行广藿香GAP研究以及承担广州名优中成药指纹图谱质量控制示范研究――抗病毒口服液指纹图谱研究的同时，采用HPLC、GC、GC-MS、PGC等现代分析技术，对不同品种、不同产地、不同采收期的广藿香进行了全面、系统地指纹图谱研究。包括化学成分的定性、定量分析以及建立药材药理、药效与化学成分的关联等。
3.1化学成分分析：
3.1.1主要化学成分及其含量：
3.1.1.1广藿香全草均含挥发油，在所有的药用部位中，叶的挥发油含量最高，是重点的药用部位，在叶中挥发油主要分布在叶肉组织和叶脉的韧皮部薄壁细胞中。根内木质部的粗度、茎皮和叶片的厚度可作为评价广藿香品种优良的三个指标。这些都为合理评价和采收广藿香提供了科学的理论依据。
3.1.1.2牌香全草所含挥发油低于肇香和南香，其中牌香的挥发油含量在0.5%左右，肇香在1－2%，南香在2－3%。
3.1.1.3广藿香挥发油中主要化学成分包括广藿香醇（Patchoulialcohol）、广藿香酮（Pogostol）、β-广藿香烯、β-榄香烯、顺式-石竹烯、反式-石竹烯、刺蕊草烯、α-愈创木烯、α-广藿香烯、δ-愈创木烯、未鉴定A、苯甲醛、广藿香吡啶碱、表瓜亚吡啶碱等，主要成分为广藿香醇，广藿香酮为牌香特有的广谱抗菌成分成分，其他品种广藿香酮含量甚微。
表3.1不同产地广藿香主要化学成分及其含量比较
牌香
肇香
南香
挥发油（在干燥全草中的百分比含量）
0.5%左右
1-2%
2-3%
广藿香醇（在挥发油中所占百分比含量）
30%左右
40-60%
50-70%
广藿香酮（在挥发油中所占百分比含量）
30%左右
5%左右
0.2-0.5%
3.2广藿香的药理作用主要表现在抑菌、抗螺旋体、促进消化、缓解胃肠损害、抑制呼吸道病原体等。其挥发油能刺激胃肠运动、促进胃肠分泌、解除胃肠痉挛；还有抗病原微生物的作用，挥发油对皮肤癣和条件致病真菌有抑制作用；另外，还有抑制子宫收缩和镇痛作用。
4．饮片、标准提取物研究
2003年，香雪制药承担了国家“十五”科技攻关计划创新药物和中药现代化项目广藿香（油）标准提取物质量标准研究课题。目前广藿香饮片和标准提取物的生产与质量控制研究正在进行中。
参考文献
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