自1963年发现澳大利亚抗原（简称“澳抗”，现称唯一性肝炎表面抗原）之后，有关乙型肝炎的免疫血清学诊断技术不断发展，从琼脂扩散、对流电泳、血凝（间接血凝、反向间接血凝）酶联免疫直到放射免疫法，虽然其原理均是通过观测已知抗原（或抗体）和被测抗体（或抗原）发生反映情况来确定被检查血清有无感染，但因具体方法的不断改进，上述方法依次灵敏性逐渐提高，特异性逐渐增强。到目前最常用的是酶联免疫法（ELISA）和放射免疫法（RIA）此两法均非常灵敏，既可检测抗原，也可检测抗体，不仅作为检测乙型病毒性肝炎标志物的主要方法，也常作为其他一些肝炎病毒感染的检测方法。
20世纪80年代以后，特别是20世纪90年代，随着分子生物学的飞速发展，使有关肝炎病毒的病原学检测有了突破性进展，相继明确了甲、乙、丙、丁、戊五型病毒性肝炎的病原，基本搞清了它们的基因结构，此后又发现了己型、庚型等肝炎病毒。特别是核酸检测技术的建立，使病毒性肝炎的病因诊断又有了一个飞跃。我们可以直接检测病毒的DNA或RNA，从而使核酸检测技术成为目前确诊现症感染的最可靠检测方法。有关核酸检测技术主要有两种：一种是核酸杂交技术，一种是聚合酶链反应（PCR）。下面简要介绍。
（1）核酸杂交技术：其原理是利用基因工程技术制备出大量特异性的DNA、CDNA或RNA，再以放射性核素或生物素酶进行标志制成探针，与待检标本中的DNA或RNA按碱基配对的原则进行杂交，然后以放射自显影或底物显色的方法进行判断。病毒性疾病常用此作为诊断手段，直接检测病毒DNA或RNA用以确诊。
常用的杂交方法有斑点杂交、吸印杂交和原位杂交。三者各有所长，斑点杂交只能判定待检标本中是否有所检测的DNA，而不能对此DNA进行更深入的分析；吸印杂交不仅可直接检测DNA，也可检测RND，同时还可推测出该DNA是游离的还是整合的，是有复制还是没有复制；原位杂交对于研究DNA在组织中，特别是在肝组织冰冻切片中的定位很有帮助。
（2）PCR技术（聚合酶链反应）：即体外核酸扩增技术，经过一次操作，可使核酸扩增至百万倍以上，故灵敏性极高，极微量核酸即可被检出，目前主要用于检测HCV－RNA和HCV－RNA，这是因为它们在血中含量太少，用一般方法不易检出，其他肝炎病毒也可用本法检测。
由于PCR灵敏性太高，稍有污染就可出现加阳性，因此操作时必须非常小心。开展PCR检测要具备一定的条件，对实验室的要求较高，否则尽管此方法很灵敏，由于试剂不好或操作不当，做出结果也不一定非常准确。
作者：
佚名 2005-8-4