DNA导入哺乳动物细胞常见的方法

名称

机制

转染效率

用途

优缺点

影响因素

磷酸钙转染法

内吞作用

20%细胞被转染

瞬时表达

1、简单有效

2、适用于贴壁、非贴壁细胞

　　3、常作首选方法

1、Ca2+，DNA浓度

2、PH值，沉淀反应时间

　　3、氯喹，甘油和丁酸钠处理

DEAE葡聚糖转染法

抑制核酸酶

内吞作用

在BDC-1，CV-1和COS细胞中较高

瞬时表达

操作简单

1、需高浓度DNa

2、DEAE葡聚糖浓度

　　3、温育时间

Poly-brene转染法

不清楚

低分子量DNA转染率高于磷酸钙法

CHO细胞的稳定转化子

能得到较多的稳定转化子

1、受体细胞类型

2、转染调控信号

　　3、DNA浓度

原生质体融合

胞膜融合

50-100%转染，稳定子得率为0.2-0.02%

瞬时表达

稳定表达

1、操作复杂

2、不能进行共转染

　　3、慎用于筛选营养缺陷型变异株

1、溶菌酶、PEG浓度

2、温育时间

电穿孔

高压在膜上形成微孔

效率较高

瞬时表达

稳定转化

1、需精密仪器

2、可用于动物、植物细胞和细菌

1、电场强度

2、脉冲长度

　　3、温度，DNA浓度

　　4、培养液

脂质体

脂膜融合

50-60%转染

瞬时表达

稳定转化

1、操作简单

2、可用于体内试验

1、脂质体质量

2、DNA浓度

胞核微注射法

直接注射

50-100%转染

稳定转化

1、需要特殊仪器

2、处理样品数量少

　　3、高效

1、注射技术

2、DNA浓度