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1. 原理：
1.1.计算细胞数目可用血球计数盘或是Coultercounter粒子计数器自动计数。
1.2.血球计数盘一般有二个chambers，每个chamber中细刻9个1mm2 大正方形，其中4个角落之正方形再细刻16个小格，深度均为0.1mm。当chamber上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积为1mm2 x0.1 mm=1.0x 10-4ml。使用时，计数每个大正方形内之细胞数目，乘以稀释倍数，再乘以104，即为每ml中之细胞数目。
1.3.存活测试之步骤为dyeexclusion，利用染料会渗入死细胞中而呈色，而活细胞因细胞膜完整，染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypanblue 染料，如果细胞不易吸收trypanblue，则用红色之Erythrosinbluish。
2.材料：
2.1.0.4 %w/v trypanblue (GibcoBRL15250-061)
2.2.Erythosinbluishstain
取0.1gram Erythrosinbluish(SigmaE-9259)及0.05gram preservativemethyl
paraben(SigmaH-3647)溶于100ml Ca++/Mg++free saline
2.3.血球计数盘及盖玻片(Hemocytometerand coverslip)
2.4.计数器(counter)
2.5.低倍倒立显微镜
2.6.粒子计数器(Coultercounter,CoulterElectronics)
3.步骤：
3.1.取50ml细胞悬浮液与50mltrypanblue (orErythrosinbluish)等体积混合均匀于1.5ml小离心管中。
3.2.取少许混合液(约15ml)自血球计数盘chamber上方凹槽加入，盖上盖玻片，于100倍倒立显微镜下观察，活细胞不染色，死细胞则为蓝色(或红色-Erythrosinbluish)。
3.3.计数四个大方格之细胞总数，再除4，乘以稀释倍数(至少乘以2，因与trypanblue 等体积混合)，最后乘以104，即为每ml中细胞悬浮液之细胞数。若细胞位于线上，只计上线与右线之细胞(或计下线与左线之细胞)。
4 大格*细胞总数x2 x104 /4= 细胞数/ml
*每一大格的体积=0.1cm x0.1cm x0.01cm= 10-4ml
3.4.若不用血球计数盘，可用Coultercounter作自动计数，惟无法辨别死细胞或活细胞。
3.5.范例：
T75monolayerculture制成10ml细胞悬浮液，取0.1ml 溶液与0.1mltrypanblue 混合均匀于试管中，取少许混合液加入血球计数盘，计数四大方格内之细胞数目。
活细胞数/方格：55,62, 49,59
死细胞数/方格：5,3, 4,6
细胞总数=243
平均细胞数/方格=60.75
稀释倍数=2
细胞数/ml：60.75x 104x 2= 1.22x 106
细胞数/flask：1.22 x106 x10ml =12.2 x106
存活率：225/243﹦92.6%