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TF口服液诱导T细胞IL-2、IL-6及CD分子的表达
中国免疫学杂志 2000年第12期第16卷 分子与细胞免疫学
作者：孙万邦 张忆雄 王燕妮 李官成 宋明英 罗军敏 黄俊琼
单位：遵义医学院免疫学教研室, 遵义563003
中国图书分类号 R392.11
转移因子（transfer factor，TF）是介导细胞免疫的重要因子之一，其TF口服液具有协同诱导人T淋巴细胞IFN-γ和HLA-DR/DQ分子的表达［1］，促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能，促进人T淋巴细胞增殖发挥良好的免疫调节作用［2］。为进一步了解TF口服液协同诱导细胞因子的分泌和CD分子的表达，我们以TF口服液加入外周血淋巴细胞培养，观察其协同PHA诱导T细胞、IL-2、IL-6的分泌及CD3、CD4、CD8T细胞的变化。
1 材料与方法
1．1 TF口服液，按文献［3］制备，含量1 mg/ml。主要试剂 PHA，广州医药工业研究所产品； CD3、CD4、CD8免疫组化试剂盒为USA-DAKO公司产品；IL-2、IL-6试剂盒为USA，Genzyme公司产品；96孔细胞培养板为USA-COSTOR公司产品；RPMI-1640营养液为USA-GBICO产品。
1．2 体外淋巴细胞培养 取5 份健康成人全血，先按献血员标准检测合格后制成淋巴细胞浓度为106个/ml悬液，分为3组，每组分15个复孔加入96孔培养板。即单纯外周血淋巴细胞组(PBL)；PBL加PHA组(PHA 10 μg/孔)；PBL加PHA+TF口服液组(口服液0.068 mg/孔)。将培养板置37°C，5%CO2培养72 h后高速低温离心，取上清液作IL-2、IL-6检测，取沉淀细胞制片做CD3、CD4、CD8检测。
1．3 IL-2、IL-6含量 按试剂盒要求用ELISA法测定。
1．4 CD3、CD4、CD8T细胞 采用免疫组化法。
2 结果
2．1 TF口服液诱导人T细胞分泌IL-2、IL-6 PBL+PHA组含量较高， PBL+PHA+TF组含量最高，与PBL组有差异（表1，P＜0．05和P＜0．01）。
2．2 TF口服液诱导人T细胞CD3、CD4、CD8的变
化以每份细胞3个复孔细胞分别以ABC免疫组化法进行CD3、CD4、CD8阳性细胞观察，结果见表2，在PHA和TF诱导下，CD3、CD4、CD8阳性细胞稍有增高趋势，但结果经统计学处理其P＞0．05，无差异性。
表1 外周血淋巴细胞培养液IL-2、IL-6检测结果(
Tab.1 The concentration of IL-2、IL-6 in peripheral blood lymphocyte supernatant from normal people(
| Group | IL-2(pg/ml) | IL-6(pg/ml) | P |
| PBL | 33.0±17.5 | 190.0±77.7 | |
| PBL+PHA | 70.0±24.7 | 232.0±41.8 | ＜0.05 |
| PBL+PHA+TF | 108.0±16.6 | 272.4±70.7 | ＜0.01 |
表2 CD3、CD4、CD8 T细胞检测结果(%)
Tab.2 T lymphocyte subpopulations in peripheral blood culture from normal people(%)
| Group | CD3(%) | CD4(%) | CD8(%) |
| PBL+PHA | 71.5 | 42.2 | 30.1 |
| PBL+PHA+TF | 74.2 | 45.2 | 31.3 |
3 讨论 IL-2是免疫调节中起重要作用的T细胞因子,有多种生物学功能。它能激活多种免疫细胞，其中特别是诱导T淋巴细胞增殖，发挥免疫效应；也能促进B淋巴细胞产生免疫应答；同时能促进Mφ和NK细胞等的增殖，还具有诱生分泌多种细胞因子等免疫活性物质。通过复杂的免疫调节使机体表现出抗肿瘤抗感染改善免疫功能和状态等。IL-6是产生于活化T细胞、Mφ等细胞的一种多功能细胞因子。IL-6可诱导B细胞的终末分化，刺激B细胞产生抗体，且可诱导T细胞等表达IL-2R和产生IL-2及Tc细胞的增殖分化，也能刺激骨髓瘤细胞的增殖，与临床许多疾病的发生和转归密切相关，并表现出多种生物学功能。
本文用 TF口服液诱导T细胞分泌IL-2、IL-6，
从实验结果表明，TF口服液可增强T细胞分泌IL-2和IL-6。由于IL-2和IL-6都具有多种生物学功能，它们并能相互诱生，协同促进细胞增殖［4］。本研究提示，TF口服液在肿瘤等一些免疫功能低下的疾病作为免疫增强剂提供了一定的理论依据。
本实验同时用TF口服液诱导T细胞CD3、CD4、CD8表达，其CD3、CD4、CD8 T细胞数量虽呈上升趋势，但无统计学意义，故可认为TF口服液是通过诱导T细胞分泌细胞因子发挥免疫调节作用。
作者简介:孙万邦，男，50岁，教授，硕士生导师，主要从事分子免疫学研究
参考文献
1，孙万邦，王燕妮，张忆雄et al．TF口服液协同诱导T淋巴细胞IFN-γ和HLA-DR/DQ分子的表达． 中国免疫学杂志，1997；13（专）：19
2，张忆雄，孙万邦，王燕妮et al．TF口服液对小鼠吞噬功能及淋巴细胞增殖反应的影响．中国免疫学杂志，1997；13（专）：24
3，孙万邦，张忆雄，王宁海et al．TF口服液制备的最适条件研究．中国免疫学杂志，1995；11（增）：622
4，Baroja M L，Ceuppens J L，Van Dzmme J．Cooperation between an anti-T cell （anti-CD28）monoclonal antibody and monocyte-produced IL-6 in the induction of T cell responsiveness to IL-2．J Immunol，1988；141（5）：1502
收稿2000-05-12
修回2000-07-24